腫瘤多藥耐藥基因表達(dá)與逆轉(zhuǎn)的實驗研究及應(yīng)用

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1、重慶大學(xué)碩士學(xué)位論文腫瘤多藥耐藥基因表達(dá)與逆轉(zhuǎn)的實驗研究及應(yīng)用姓名:周琦申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):生物醫(yī)學(xué)工程指導(dǎo)教師:王遠(yuǎn)亮;徐建業(yè)2002.10.1重慶人學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要摘要腫瘤多藥耐藥是造成腫瘤化學(xué)治療失敗的最主要原因。本文通過實驗方法研究設(shè)計和臨床應(yīng)用,探討腫瘤多藥耐藥基因(MDR-1)的異常表達(dá)檢測方法及其臨床意義。采用逆轉(zhuǎn)錄一多聚酶鏈反應(yīng)雙酶單管PT.PCR法,建立了檢測腫瘤細(xì)胞MDR.1基因表達(dá)的方法。所建立的檢測實體瘤MDR一1基因表達(dá)的方法,檢測用標(biāo)本量小、特異性強、敏感性高,同時可避免同

2、位紊污染,具有省時、省事、高效、敏感、特異的優(yōu)點,在臨床上有廣闊的應(yīng)用前景。J從實驗結(jié)果及分析可知,MDR.1是腫瘤組織標(biāo)本中可以檢測的客觀指標(biāo),并且在一些惡性腫瘤組織中呈高表達(dá)。在實驗用惡性腫瘤組織中,MDR.1呈不同程度的高表達(dá),乳腺癌中MDR.1陽性率最高,大腸癌次之,其次為卵巢癌、食管癌,MDR.1在不同腫瘤中表達(dá)陽性率可相差3倍。丫一用腫瘤多藥耐藥細(xì)胞株KBV200為細(xì)胞模型,實驗研究中藥逆轉(zhuǎn)劑、多藥耐藥基因反義鏈、細(xì)胞分化劑及加溫處理的逆轉(zhuǎn)效果。探討了多種中藥、反義技術(shù)、加溫及細(xì)胞分化劑逆轉(zhuǎn)多藥耐藥

3、作用與誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的關(guān)系。實驗結(jié)果表明,TTD、RTD、CDA.II、加溫有明顯逆轉(zhuǎn)作用;LTZ、MDR-1反義核酸有一定逆轉(zhuǎn)作用;TTD與MDR-1反義核酸、CDA.II、加溫有協(xié)同逆轉(zhuǎn)作用;CDA.II與加溫有協(xié)同逆轉(zhuǎn)作用;加溫、CDA.II可誘導(dǎo)KBV200發(fā)生凋亡。通過對53例卵巢癌患者的MDR.1表達(dá)情況,及其化療療效和生存率進(jìn)行觀察隨訪研究,探討了MDR-1基因表達(dá)在臨床應(yīng)用的地位。研究發(fā)現(xiàn):MDR.1陰性或陽性表達(dá)與化療療效存在明顯的相關(guān)性,即化療可誘導(dǎo)產(chǎn)生耐藥,誘導(dǎo)生成MDR.1。臨床可通過MD

4、R-1檢測及逆轉(zhuǎn)方法研究以指導(dǎo)其用藥,減少耐藥發(fā)生。對卵巢癌合并腹水病例,應(yīng)用細(xì)胞分化劑CDA.II的初步臨床觀察顯示,在術(shù)前化療的同時,給予CDA.II合并治療,可以降低惡性腫瘤MDR.1表達(dá),利于腹水控制和腫瘤縮小。CDA.II是通過改變腫瘤細(xì)胞甲基化狀態(tài),從而誘導(dǎo)其凋亡并逆轉(zhuǎn)耐藥,增加化療敏感性,提高療效。y,/關(guān)鍵詞:月浦,細(xì)胞,多藥商螽,基因衾送,逆轉(zhuǎn)錄多藁螽鏈反應(yīng)文重慶人學(xué)碩士學(xué)位論文英文摘要ABSTRACTThemulti—dmgresistanceisanimportantfactortoind

5、ucethefailureofchemotherapyinhumancancers.Throughexperimentalmethoddesignandclinicalapplication,thispaperinvestigatedthedetectingmethodandclinicalsignificanceofmulti—drugresistancegene(MDR·1)expression.Thedetectingmethodofmulti-drugresistancegene(MDR一1)expre

6、ssionwasestablishedbythereversetranscriptionpolymerasechainreaction(RT-PCR).Becauseofitsefficient,sestiveandeconomic,thedetectingmethodhaswideclinicapplication.TheexperimentalresultsandanalysisshowedthatMDR一1istheobjectivemarkondetectionofthesamples.TheMDR一1

7、displayedhighexpressionatthedifferentdegreesinsomecancers.Usedhumanmulti—drugresistanceKVB200celllineaSthecellmodel,thereversaleffectsofaChinesemedicinereversalagent,multi-drugresistancegeneantonymchain,celldifferentiationagentandhyperthermiawereinvestigated

8、bytheexperiments.ThepaperexploredtherelationshipsamongmultiChinesemedicines,antonymtechnology,hyperthermiaandcelldifferentiationagenttothereversingofmulti-drugresistanceandinducingapoptosisincan

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