青牛膽急性毒性實(shí)驗(yàn)性研究

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1、青牛膽急性毒性實(shí)驗(yàn)性研究作者：姜月霞，張俊清，劉明生【摘要】目的：采用海南青牛膽莖提取物，通過對(duì)小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)及安全性研究，作出初步評(píng)價(jià)。方法：取KM小鼠50只，雌、雄各半，10只做預(yù)試驗(yàn)，另40只按同性別隨機(jī)分為雌、雄空白對(duì)照組(蒸餾水組)和藥物組，每組各20只。對(duì)小鼠空腹經(jīng)口灌胃給予青牛膽提取物分別為人臨床用量的200倍、400倍和600倍劑量，觀察小鼠出現(xiàn)的毒性反應(yīng)及有無死亡。結(jié)果：觀察7d，未見小鼠死亡，所有受試小鼠毛色光潔,活動(dòng)、飲食和二便正常,兩組經(jīng)t檢驗(yàn),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P&g

2、t;0.05)。結(jié)論：海南青牛膽未見有明顯毒性反應(yīng)，表明本品安全性較高。【關(guān)鍵詞】青牛膽;提取物;急性毒性實(shí)驗(yàn);海南省　　[ABSTRACT]Objective:Toevaluatethesafetyoftinosporahainanensis.Methods:200,400and600timesofclinicaldosageoftinosporahainanensisextractionwereadministeredtoratsbyintragastricadministration.Ac

3、utetoxicityreactionsanddeathwererecorded.Results:During7daysofadministration,allratsate,anddischargednormally,keptnormalfigureandmovement.Nodeathwasobserved.There6isnosignificantdifferencebetweenthedispersingliverandimprovingeyesightandthedistilledw

4、atergroup(P>0.05).Conclusion:Noobvioustoxicityreactionswereobservedandtinosporahainanensisisprettysafe.　　[KEYWORDS]Tinosporahainanensis;Extraction;Acutetoxicitytest;HainanProvince　　海南青牛膽(TinosporahainanensisH.S.LoetZ.X.Li)系防己科青牛膽屬植物，為海南特有種[1]，在民間廣

5、泛用以治療關(guān)節(jié)疼痛和筋骨損傷。具有鎮(zhèn)痛、松筋、抗炎和抗菌的功效[2]。近年來海南青牛膽藥效物質(zhì)的研究已取得重大進(jìn)展。通過經(jīng)典柱色譜的分離，結(jié)合體外細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)研究，確定了該復(fù)方有效部位為植物總甾酮類化合物，既可顯著地抑制鈣的流失和促進(jìn)成骨細(xì)胞的形成，亦可改善因鈣流失或成骨細(xì)胞合成受阻而造成的骨質(zhì)疏松[3]。為進(jìn)一步挖掘海南青牛膽的藥用價(jià)值，確保其安全性，根據(jù)中藥臨床前毒理學(xué)評(píng)價(jià)的指導(dǎo)原則，筆者對(duì)海南青牛膽提物進(jìn)行了急性毒性試驗(yàn)研究,為開發(fā)利用海南青牛膽資源提供了科學(xué)根據(jù)?！　?材料與方法　　1.1

6、實(shí)驗(yàn)材料6　　1.1.1藥物來源實(shí)驗(yàn)用藥為醇提海南青牛膽。以95%乙醇回流3次，合并提取液后濃縮，產(chǎn)率為20.13%。　　1.1.2動(dòng)物KM小鼠50只，體重18～22g，雌雄各半，由長沙市開福區(qū)中創(chuàng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技服務(wù)部提供。湖南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證第002478號(hào)?！　?.2方法　　1.2.1預(yù)實(shí)驗(yàn)劑量確定為探討其急性毒性,在預(yù)試灌胃測不出LD50的情況下,進(jìn)行了小鼠最大耐受試驗(yàn)最低劑量組定為6g/kg，用10只小鼠(雌雄各半)做預(yù)試,經(jīng)觀察后,小鼠無一例死亡,也未出現(xiàn)任何中毒現(xiàn)象。故此劑量為安全

7、劑量,經(jīng)計(jì)算可得,此劑量為成人日用量的100倍。將最大濃度溶液(能夠用灌胃針頭注射為標(biāo)準(zhǔn))的濃度定為最高劑量組36g/kg?！　?.2.2急性毒性實(shí)驗(yàn)取KM小鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分成空白組與藥物組(按同性別分組),采用空腹經(jīng)口灌胃給藥，各組藥物濃度不同,灌胃體積相同,均為每只給藥0.5mL,一次性給藥，灌胃前禁食12h,但不禁水。蒸餾水作為空白對(duì)照。每日3次給藥，間隔86h，然后觀察小鼠的死亡、中毒及活動(dòng)情況,并記錄小鼠的體重、飲食變化。連續(xù)觀察1周。　　1.2.3觀察指標(biāo)給藥后密切觀察12

8、h，并詳細(xì)記錄觀察結(jié)果，以后每天上午8～9時(shí)及下午3～4時(shí)各觀察1h,并記錄觀察結(jié)果，對(duì)其中死亡的動(dòng)物立即進(jìn)行尸體解剖檢查。連續(xù)觀察7d，神經(jīng)系統(tǒng)方面:(1)行為及反應(yīng)(包括不正常叫聲、煩躁、不安等);(2)運(yùn)動(dòng)(包括肌肉抽搐、僵硬、強(qiáng)迫運(yùn)動(dòng)等);(3)瞳孔及分泌物(瞳孔有無縮小或放大、流淚等);(4)呼吸及心血管:呼吸急促或過緩、鼻分泌、觸心前區(qū)心率快慢等;(5)胃腸方面:腹部脹氣或收縮、大便堅(jiān)硬或濕等;(6)泌尿生殖系統(tǒng):陰唇、乳腺腫脹、會(huì)陰部骯臟;(7)皮膚和毛:顏色、完整性、有否充血、發(fā)