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1、葛根素預(yù)處理在大鼠肝臟缺血再灌注損傷中的抗氧化作用【摘要】目的觀察葛根素預(yù)處理對大鼠肝臟缺血再灌注損傷的防護(hù)作用。方法雄性SD大鼠，建立肝臟缺血再灌注模型(HIR)。隨機(jī)分為假手術(shù)組、HIR組和HIR-葛根素預(yù)處理組。黃嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸比色法分別測定肝組織中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性的變化，同時(shí)分析NO含量的改變。結(jié)果肝臟缺血再灌注損傷后，與假手術(shù)組比較，肝組織中MDA活性及NO含量均顯著增加，而SOD活性顯著降低；經(jīng)40mg/kg劑量的葛根素預(yù)處理7d后，與模型組相
2、比，肝組織中MDA活性及NO含量顯著降低，而SOD活性增高。結(jié)論葛根素預(yù)處理對大鼠缺血再灌注肝臟損傷有一定的保護(hù)作用。 【關(guān)鍵詞】葛根素；缺血再灌注；肝臟；抗氧化 【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheantioxidationeffectofkakkoneinonhepaticischemiareperfusioninjuryinrats．MethodsMaleSprague-Dawleyratswererandomlydividedintothreegroup
3、s:pseudo-operationnormalcontrolgroup，hepaticischemiareperfusioninjurymodelgroup,kakkoneingroup.Afterhepaticischemiaandreperfusion,toanalysisthelevelofMDA,SODandNOactivity.ResultsAfterhepaticischemiareperfusion,theMDAandNOlevelincreased,andtheSODactivity
4、decreasedobviouslycomparing5withthenormalgroup;Comparingtothehepaticischemiareperfusioninjurymodelgroup,theMDAandNOleveldecreased,andtheSODactivityincreased.ConclusionsTheapigeninhaveaprominentprotectiveeffectonhepaticischemiareperfusioninjuryinrats．
5、【Keywords】Kakkonein;Ischemiareperfusion;Liver;Antioxidation 肝臟缺血再灌注損傷是肝臟缺血后重獲血流灌注或氧供后，引起或加重肝臟缺血缺氧造成的損傷，是臨床肝臟手術(shù)過程中常見的一種病理生理變化，可產(chǎn)生氧自由基，引起鈣超載等改變，損傷肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)，影響肝臟的功能[1]。因此，如何減輕或防治肝臟缺血再灌注損傷的程度，是目前臨床肝臟手術(shù)中研究的熱點(diǎn)。NO能與含F(xiàn)e2+血紅素基團(tuán)的蛋白質(zhì)相結(jié)合，產(chǎn)生較穩(wěn)定的亞硝?；t素蛋白復(fù)合物。NO與超氧自
6、由基反應(yīng)生成的過氧亞硝酸根離子，能使各種含鐵-硫酶失活，阻斷細(xì)胞內(nèi)能量合成及DNA復(fù)制，影響細(xì)胞的線粒體功能，產(chǎn)生細(xì)胞毒性作用[2]。葛根素是一種天然多酚類化合物，結(jié)構(gòu)類似雌二醇，具有某些雌激素樣作用，研究發(fā)現(xiàn)它是一種天然的抗氧化劑，具有明顯的抗氧化作用，可消除體內(nèi)過多的自由基，保護(hù)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)[3]。本實(shí)驗(yàn)通過建立大鼠肝臟局部缺血再灌注模型，經(jīng)葛根素預(yù)處理，觀察肝組織中丙二醛(MDA)5含量和超氧化物歧化酶（SOD）的活性及NO含量的改變，從而探討葛根素對大鼠缺血再灌注肝臟損傷的保護(hù)作用。 1資
7、料與方法 1.1資料雄性SD大鼠，體質(zhì)量190～210g，由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供；MDA、SOD和NO試劑盒由南京建成生物工程研究所提供；葛根素購自中國藥品生物制品檢定所。 1.2動(dòng)物分組與模型建立大鼠肝臟缺血再灌注模型建立方法[4]：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，術(shù)前24h禁食，自由飲水，乙醚吸入麻醉，腹正中切口，暴露十二指腸韌帶及肝門部，分別夾閉肝動(dòng)脈和門靜脈，造成70％肝臟缺血，70min后去除血管夾，恢復(fù)肝臟血流。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為3組：①假手術(shù)組，大鼠給予開腹及暴露肝蒂處理，不阻斷肝臟
8、血流；②模型組，夾閉肝動(dòng)脈和門靜脈，缺血70min后，再灌注120min；③葛根素預(yù)處理組，術(shù)前7d，每天口服灌胃40mg/kg的葛根素，按上述方法建立大鼠肝臟缺血再灌注模型，阻斷肝動(dòng)脈和門靜脈，缺血70min后，再灌注120min。 1.3肝臟組織中MDA、SOD活性及NO含量的變化取出肝臟組織，冰浴中操作，加入1mol/L的HCl，碾磨制成組織勻漿，低溫離心機(jī)，離心15min，3000轉(zhuǎn)/min，取上清液。參照按試劑盒說明，分別用黃嘌呤氧化酶法測
