tnfa、nfκβ在肝臟缺血再灌注損傷中的作用

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1、TNF-α、NF-κβ在肝臟缺血再灌注損傷中的作用摘要目的構(gòu)建大鼠失血性休克復(fù)蘇肝臟缺血再灌注損傷模型,用免疫組化方法探討TNF-α、NF-κβ在肝臟缺血再灌注損傷中的作用。方法30只清潔級(jí)SD大鼠被隨機(jī)分為假手術(shù)組(A組)、休克組(B組)、失血性休克/復(fù)蘇(C組)亦稱模型組。A組大鼠麻醉后,測(cè)平均動(dòng)脈壓(MAP)正常后直接處死采集大鼠肝組織。B組經(jīng)股動(dòng)脈穿刺置管放血,維持MAP為(35±5mmHg)持續(xù)90min后處死采集大鼠肝組織。C組大鼠麻醉后,經(jīng)股動(dòng)脈穿刺置管放血,維持MAP為(35±5mmHg)維持90min,回輸自體血液進(jìn)行復(fù)蘇

2、,維持MAP80-100mmHg,制作失血性休克復(fù)蘇模型,復(fù)蘇6h后處死采集大鼠肝組織。通過HE染色了解肝組織病理形態(tài)學(xué)改變,SP免疫組化測(cè)定各組大鼠肝臟TNF-α、NF-κβ表達(dá)情況,并采用全自動(dòng)圖像分析系統(tǒng)(Image-proplus6.0)計(jì)算各組陽性區(qū)域積分吸光度。應(yīng)用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±S)表示,成組資料采用單因素方差分析,進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn),各組間相互比較采用t檢驗(yàn)。以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果A組HE染色肝組織結(jié)構(gòu)及形態(tài)正常,B組見部分肝細(xì)胞空泡樣變性,損傷較輕,C組肝組織損傷較

3、最重,肝小葉結(jié)構(gòu)不清,肝細(xì)胞出現(xiàn)明顯的空泡變性,肝竇淤血,并見大量中性粒細(xì)胞滲出及肝臟巨噬細(xì)胞聚集。免疫組化結(jié)果顯示:C組表達(dá)TNF-α、NF-κβ最高,二者平均積分吸光度值分別為(0.197±0.026,0.131±0.035);B組的表達(dá)較C組低,二者平均積分吸光度值分別為(0.133±0.023,0.098±0.028);A組陽性表達(dá)最低,二者平均積分吸光度值分別為(0.075±0.030,0.045±0.021)。并經(jīng)SPSS軟件分析,各組間相互比較采用t檢驗(yàn),P值均<0.05,差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論成功建立大鼠失血性休克復(fù)蘇肝臟

4、缺血再灌注損傷模型;失血性休克復(fù)蘇后可能通過TNF-α及NF-κβ高表達(dá)引起肝臟缺血再灌注損傷。關(guān)鍵詞失血性休克肝臟缺血再灌注損傷TNF-αNF-κβ2TheroleofTNF-α、NF-κβintheliverischemia-reperfusioninjuryAbstract【Objective】ToinvestigatethefunctionofTNF-α,NF-κβintheroleofliverischemia-reperfusioninjury,usingimmunohistochemistrywiththemodelofhem

5、orrhagicshockandreperfusionliverinjury.【Methods】Thirtyratswererandomlydividedintoshamoperationgroup(GroupA),shockgroup(GroupB),hemorrhagicshock/resuscitation(GroupC).AnaesthetizetheratsinGroupA,whenmaintainingmeanarterialpressure(MAP)isnormal,directlycollectlivertissueafte

6、rtheexecutionofrats.PuncturethefemoralarteryofGroupBforbleeding,afterMAPas(35±5)mmHgfor90minitues,collectlivertissueofexecutedrats.Afterwards,anesthetizetheratsinGroupC,puncturethefemoralarteryforbleeding,thenMAPas(35±5)mmHgfor90minitues,recovertheratsbyreinfusionofautolog

7、ousblood,maintainingMAP80-100mmHgtoproducehemorrhagicshockandresuscitationmodel,moreover,collectlivertissueofexecutedratafter6hoursofrecovery.AccordingtoHEstaining,theunderstandingofpathologicalchangesofliver,thegroupconditionofSPimmunohistochemistryinliverTNF-α,NF-κβ,ther

8、egionalintegrationabsorbanceofeachgroupbyautomaticimageanalysissystem(Image-proplus6.0)ca

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