先天性旋毛蟲病的研究

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1、2004屆鄭州大學(xué)碩士研究生論文先天性旋毛蟲病的研究研究生韓化敏導(dǎo)師崔晶王中全鄭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院寄生蟲學(xué)教研室(鄭州450052)河南省分子醫(yī)學(xué)重點(diǎn)學(xué)辯開放實(shí)驗室(鄭州450052)摘要旋毛蟲病是一種嚴(yán)重的人獸共患寄生蟲病，主要因生食或半生食含有旋毛蟲幼蟲囊包的豬肉或其它動物肉類而感染。本病嚴(yán)重危害人體健康，若不及時診斷和治療，患者的死亡率可高達(dá)3％-30％?？刂菩x病的關(guān)鍵措施在于預(yù)防，若能切斷其傳播途徑，則可防止本病的發(fā)生。動物實(shí)驗表明旋毛蟲病還可通過糞便傳播，蠅蛆也可能傳播旋毛蟲病。然而，關(guān)于

2、人體旋毛蟲病是否還存在有母嬰垂直傳播目前尚不清楚。鑒于此，本文應(yīng)用旋毛蟲病小鼠動物模型對先天性旋毛蟲病進(jìn)行了研究，并對子鼠的獲得性免疫及其免疫保護(hù)作用進(jìn)行了觀察。方法將昆明小鼠按受孕時間的不同分為受孕后感染組和感染后受孕組，待新生子鼠出生后1天內(nèi)將其殺死，剪碎后用貝氏法分離旋毛蟲幼蟲，觀察新生子鼠是否有先天性旋毛蟲感染。將正常母鼠所產(chǎn)子鼠出生后1天由感染旋毛蟲的母鼠喂養(yǎng)，21天后將子鼠宰殺，通過直接鏡檢法及人工消化法檢查旋毛蟲幼蟲，觀察旋毛蟲病是否可經(jīng)乳汁傳播。將感染旋毛蟲的母鼠所產(chǎn)子鼠于出生后1個月

3、收集血清，用間接ELISA法測定抗旋毛蟲抗體IgG，并觀察子鼠出生后不同時間的血清抗旋毛蟲抗體水平和持續(xù)時間。將感染旋毛蟲的母鼠所產(chǎn)子鼠子出生石40天用旋毛蟲肌幼蟲攻擊感染，感染后1個月將子鼠殺死，人工消化法收集幼蟲，計數(shù)并計算肌肉蟲荷，觀察從母鼠獲得的抗體對子鼠的免疫保護(hù)作用。此外，收集感染旋毛蟲的母鼠及其所產(chǎn)子鼠的血清，分別經(jīng)尾靜脈注射正常小鼠，攻擊感染后觀察被動轉(zhuǎn)移血清對旋毛蟲感染的抵抗作用。將未受孕的正常小鼠及受孕后不同時間的小鼠用旋毛蟲攻擊感染，感染后1個月殺死，計算肌肉蟲荷，觀察小鼠受孕后

4、對宿主抗旋毛蟲感染的免疫應(yīng)答是否具有協(xié)同作用。用SPSSl0，0對各組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。2004屆鄭卅l大學(xué)碩士研究生論文結(jié)果1．感染旋毛蟲的母鼠所產(chǎn)子鼠的旋毛蟲感染情況：感染旋毛蟲后8天和22天受孕母鼠所生子鼠中各有2只發(fā)現(xiàn)旋毛蟲感染，感染率為20％(2／10)和25％(2／8)，分別檢獲3條、2條、1條、1條幼蟲；受孕后7天感染旋毛蟲的母鼠所產(chǎn)子鼠中有2只感染旋毛蟲，感染率為33．3％(2／6)，分別檢獲幼蟲7條和24條。2．交叉哺乳試驗：3只正常雌鼠所產(chǎn)子鼠(9、10、11只)分別由3只剛產(chǎn)子鼠

5、的感染旋毛蟲的母鼠喂養(yǎng)，這3只母鼠曾分別在不同孕期(孕3天，孕11天，孕18天)用旋毛蟲攻擊感染。21天斷乳后剖殺子鼠，用直接鏡檢法和人工消化法檢查旋毛蟲幼蟲，結(jié)果30只子鼠均未檢出旋毛蟲。3．受孕后不同時間感染旋毛蟲的母鼠所產(chǎn)子鼠的血清抗體水平：受孕后1、5、16和18天感染旋毛蟲的母鼠所產(chǎn)子鼠出生后30天收集血清，用間接ELISA法檢測抗旋毛蟲抗體水平，抗體陽性率分別為0、0、33％(3／9)及O．11％(1／9)，其OD值分別為0．098--t：0．013、0．105：c-0．015、0．167

6、-4-0．085和0．127+0．038，但各組間的抗體水平無明顯差異(P>0．05)。4．感染旋毛蟲后不同時間受孕的母鼠所產(chǎn)子鼠的血清抗體水平：感染旋毛蟲后18、21、60天受孕的母鼠所產(chǎn)子鼠于出生后30天收集血清，用間接ELISA檢測血清抗旋毛蟲抗體，抗體陽性率分別為56％(9／16)、47％(8／17)及100％(21／21)，OD值分別為0．144"0．101、O．181+0．074及0．411+0．070。感染旋毛蟲后60天受孕的母鼠所產(chǎn)子鼠的血清抗旋毛蟲抗體水平最高，與感染后18天及21天

7、受孕母鼠所產(chǎn)子鼠相比有明顯差異(P=0．00<0．01)。s．母源性抗體在其子鼠體內(nèi)交化情況：用間接ELISA法檢測感染旋毛蟲后60天受孕的母鼠所產(chǎn)子鼠的血清特異性抗旋毛蟲抗體，子鼠出生后1、24、40天血清抗體陽性率分別為100％(9／9)、78％(21／27)、17％(4／27)，OD值分別為O．247+0．049、0．127+0．029、0．069+0．023，予鼠出生后24天的血清抗體水平與出生后1天相比較差異有顯著性(P=O．00<0．01)，出生后40天與24天相比較均有顯著性差異(尸=D

8、00<0．01)，表明子鼠的血清抗體水平隨出生后的時間延長而降低。6．小鼠體內(nèi)母源性抗體對旋毛蟲攻擊感染的保護(hù)作用：感染旋毛蟲的母鼠所產(chǎn)的21只子鼠出生后40天用旋毛蟲攻擊感染(200條幼蟲，只)，感染后30天剖殺，結(jié)果發(fā)現(xiàn)子鼠的每克膈肌幼蟲數(shù)(4559．238士2116．539)明顯低于對照組(11992．670-2：2002179)，減II2004屆鄭州大學(xué)碩士研究生論文蟲率為61％，與對照組相比有顯著差異(尸=O，00<0．01)，表明子鼠體內(nèi)的母