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《兩種果蝠微衛(wèi)星位點篩選及通用性研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、兩種果蝠微衛(wèi)星位點的篩選及通用性研究作者:邵偉偉指導(dǎo)老師:周善義教授陳金平副研究員張樹義教授年級:2005級專業(yè):動物學(xué)研究方向:動物分子生物學(xué)摘要棕果蝠(Rousettusleschenaulti)、大長舌果蝠(Eonycterisspelaea)主要分布于我國的熱帶和亞熱帶地區(qū),對當(dāng)?shù)氐凝堁?、荔枝等水果種植業(yè)造成巨大危害。近年來,棕果蝠在國內(nèi)被大范圍捕殺,造成其種群數(shù)量急劇下降。棕果蝠、大長舌果蝠在生態(tài)系統(tǒng)中對經(jīng)濟植物傳花授粉和種子傳播起著重要的作用,所以研究這些物種的種群遺傳結(jié)構(gòu)和種群變化對更好的保護該物種提供基礎(chǔ)資料。為了獲得用于研究棕果蝠、大長舌
2、果蝠的種群結(jié)構(gòu)和遺傳多樣性的分子標(biāo)記,我們利用探針富集法分別構(gòu)建了棕果蝠和大長舌果蝠的微衛(wèi)星基因組文庫。篩選出棕果蝠的11個高度多態(tài)性位點(M3-1、M3-3、M3-120、M3-8、M3-6、M3-121、M4-2、B04、D04-2、D10-2、D12-2),并在廣西種群的57個棕果蝠個體中檢測。運用GENEPOP3.4軟件進行哈迪-溫伯格平衡和連鎖不平衡檢測。結(jié)果表明,這11個位點在廣西種群中均符合Hardy-wenberg平衡,并且不連鎖。篩選出大長舌果蝠9個位點(DC3D6、DC205、DC322-3、DC631-2、DC618、DC615、DC
3、645-3、DC683-2、DC636-2),并在一個云南種群39個大長舌果蝠個體中檢測。除了引物DC618外,其余8對引物擴增片段顯示有高度多態(tài)性(大于7個等位基因)。哈迪-溫伯格平衡檢測指示在兩個位點DC631-2,DC683-2上有嚴(yán)重的雜合度缺失,Bonferronicorrectionformultipletests顯示P<0.0071,并MICRO-CHECKER軟件對這兩個位點分析存在零等位基因。GENEPOP3.4軟件檢測顯示9個位點不連鎖。此外,分別檢測了上述分離到的位點在其他果蝠種群中的通用性。10對棕果蝠特異的微衛(wèi)星引物(M3-1、M
4、3-3、M3-120、M3-8、M3-6、M3-121、B04、D04-2、D10-2、D12-2)在其它4種果蝠(短耳犬蝠、犬蝠、大長舌果蝠、小長舌果蝠)內(nèi)的通用性,其中,8對引物能在大長舌果蝠中擴增出相應(yīng)大小的產(chǎn)物,短耳犬蝠中能獲得預(yù)期大小產(chǎn)物的引物有5對,犬蝠有2對,而小長舌果蝠只有1對能適用。而9個大長舌果蝠特異的微衛(wèi)星標(biāo)記在犬蝠中,其中只有2對引物(DC615、DC618)能擴增出特異的條帶。這些微衛(wèi)星標(biāo)記為果蝠種群遺傳學(xué)研究提供了更多的工具。關(guān)鍵詞:大蝙蝠亞目;棕果蝠;大長舌果蝠;微衛(wèi)星;近緣種;通用性ITheIsolationofMicros
5、atelliteLociinTwoSpeciesofFruitBatandTheirApplicabilityinCloselyRelatedSpeciesAuthor:ShaoWeiweiGrade:2005Speciality:ZoologyResearchArea:ZoologyMolecularBiologySupervisor:Prof.ZhouShanyiAssociateProf.ChenJinpingProf.ZhangShuyiAbstractRousettusleschenaultiandEonycterisspelaeaaremain
6、lydistributedintropicandsemi-tropicalareas.Theyeatfruits,suchaslonganandlitchi.InChina,theyhavebeenkilledatlargescaleandthepopulationsizehasdecreaseddramatically.ManyplantspeciesrelyonR.leschenaultiandE.spelaeaforpollinationanddispersaloftheirseedinecologysystem,soanalysesofpopula
7、tiongeneticstructureandpopulatinvariationintwospeciesprovidesbasicdataforprotectingthesespecies.Inordertostudytheirpopulationstructureandgeneticdiversity.weconstructedanenrichedDNAmicrosatellitelibraryofR.leschenaultiandE.spelaea,andobtainedelevenpairsofspecialpolymorphismmicrosat
8、elliteprimers(M3-1、M3-3、M3-120、M3