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《利用SSR標記技術(shù)對白樺長纖維性狀的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、摘要白樺(BerulaplaO,phyUa)為我國東北與內(nèi)蒙古林區(qū)的先鋒樹種，是非常優(yōu)良的短周期闊葉紙漿用材樹種。纖維長度是影響紙張品質(zhì)的主要因素之一，為了加速長纖維白樺紙漿材新品種選育進程，本文進行了以下研究：1、通過測定和分析帽兒山實驗林場583株白樺和哈爾濱林場200株白樺纖維長度的分布特點，不僅說明纖維長度性狀是典型數(shù)量性狀、適合采用分子標記技術(shù)進行研究，而且分別從中選擇出能代表這2個群體的100株個體組成分析群體用于長纖維性狀分子標記分析、40株驗證群體用于長纖維標記的驗證。2、通過正交設(shè)計方法確定了SSR反應(yīng)體系，并對結(jié)果進行了驗證。在正交設(shè)計的基礎(chǔ)上，得出了白樺SSR最佳反應(yīng)體系
2、。20／zL反應(yīng)體系包括：DNAl00ng，Mg+23mmol／L，Taq酶0．5U，dNTP0．5mmol／L，引物濃度為0．49mol／L；循環(huán)參數(shù)為：94℃預(yù)變性5min后，進行35個循環(huán)94℃變性30s，59．5℃復(fù)性30s，72℃延伸30s；72℃延伸5min，4。C保存。3、利用生物信息學(xué)方法，分析了NCBI數(shù)據(jù)庫的2548條歐洲白樺(Betulapendula)EST序列，結(jié)果表明：其中共有260條EST序列含有307個SSR，占全部EST的10．20％，SSR的出現(xiàn)頻率是12．05％。利用SSRPrimer和Primer3軟件對發(fā)現(xiàn)的260個含有SSR序列的EST序列進行東北白
3、樺SSR引物設(shè)計，結(jié)果表明：在Primer3設(shè)計出的176對引物，共有104對引物產(chǎn)生擴增現(xiàn)象，占合成引物的59．09％，其中27對引物具有多態(tài)性，僅占25．96％；在SSRPrimer設(shè)計的100對引物，有37對引物產(chǎn)生了擴增產(chǎn)物，占合成引物的37．00％，其中只有18對引物的擴增具有多態(tài)性。4、通過纖維長度與SSR標記的多元回歸分析，得到了4條與白樺纖維長度呈顯著相關(guān)SSR片段擴增條帶。利用與這4條片段對應(yīng)的SSR引物對驗證群體進行擴增結(jié)果表明，4對長纖維性狀SSR引物對長纖維白樺的鑒定率平均為60．00％，對短纖維鑒定率為7．00％，其中PBl5引物對長纖維性狀個體的鑒定率高達75．00
4、％。關(guān)鍵詞白樺，SSR，EST-SSR，纖維性狀A(yù)bstractTheBetulaplatyphyllaispioneerandexcellentshortcyclebroad-leavedpulptreeinnortheastandinner-Mongofiaregion．Becausethefiberlengthisthemainfactorforpaperqnality,thehereinafterstudyWasdoneinthispapertoacceleratetheprogressofnewvarietyforlongfiberpulpB．platyphylla．Aftermea
5、surementandanalysisfiberlengthtrait㈣anddistributingtraitof538individualsfromnatureB．platyphyllapopulationinmaoershanexperimentforestrycentreand200individualsfromnatureB．pkty}I的lkpopulationinharerbinexperimentforestrycentre，theFLTisthemodelquantitytraitsuittostudyusingmarkeranalysis，moreoverthe100ind
6、ividualsfrommaoershanand40fromharerbinwereselectedtobeanalyzedbymoleen]emarker．TheorthogonaldesignWasusedtooptimizeSSR-PCRamplificationsystem011B．platyphylla．AmostsuitableSSR-PCRsystemforB．platyphyllaWasestablished,itWas20／MLreactionsystemwhichcontained150rigDNAtemplate，3mmol／LMg“，0．5UTaqDNApolymere
7、se,0．5mmol／LdNTP,0．4／“mol／LPrimer,SSR-PCRreactionsystemofbirchwasperformed．InitialdenaturationWasfor5minat94"C，followby35cyclesofdenaturationfor30Sat94℃，annealingfor30Sat59．5"C，extensionfor30Sat72"Can
