生長分化因子9與生長分化因子9B在卵巢組織中的表達(dá)與調(diào)控研究

生長分化因子9與生長分化因子9B在卵巢組織中的表達(dá)與調(diào)控研究

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1、原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨立進(jìn)行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。論文作者簽名:盟日期:蘭堅:生6關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解山東大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留或向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱;本人授權(quán)山東大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編

2、本學(xué)位論文。(保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定)論文作者簽名:查L導(dǎo)師簽名再三婭f期:塑翌生;山東大學(xué)碩士學(xué)位論文生長分化因子一9與生長分化因子一9B在卵巢組織中的表達(dá)與調(diào)控研究專業(yè)婦產(chǎn)科生殖醫(yī)學(xué)研究生李春艷導(dǎo)師陳予江中文摘要目的本實驗通過觀察生長分化因子一9(GDF一9)與生長分化因子一9B(GDF一9B)在不同發(fā)育階段的小鼠卵巢組織中的表達(dá)及促卵泡生成素(FSH)對其表達(dá)的影響,研究GDF一9與GDF一9B在卵泡形成和卵巢發(fā)育過程中的作用及其表達(dá)調(diào)控機制,探討GDF一9與GDF一9B在卵巢中自分泌及旁分泌作用機制及與生殖功能的關(guān)系,進(jìn)一步探討其臨床應(yīng)用前景。研究方法卵巢

3、標(biāo)本取自不同發(fā)育階段(出生后5天、10天、15天、20天、25天、30天)的小鼠及注射孕馬血清(PMSG)24小時的性成熟小鼠,對照組不給予PMSG;分離性成熟小鼠卵泡體外培養(yǎng),培養(yǎng)液中加FSH(IOOIU/L),對照組不加FSH72小時后收集卵泡取卵母細(xì)胞。所取的卵巢組織分別行免疫組化比較GDF一9蛋白的表達(dá)、原位雜交比較GDF一9BmRNA的表達(dá),所取的卵母細(xì)胞行免疫組化比較GDF一9蛋白的表達(dá)。結(jié)果1.出生后小鼠的卵巢開始發(fā)育,卵泡的生長啟動,逐漸從始基卵泡發(fā)展到初級卵泡、次級卵泡及成熟卵泡,GDF一9蛋白的表達(dá)從早期初級卵泡開始,直至成熟卵泡,其表達(dá)開始的時間與

4、初級卵泡出現(xiàn)的時間一致。GDF一9B與GDF一9有相似的表達(dá)模式,從晚期初級卵泡開始。2.共取20只小鼠的卵巢組織制片,免疫組化共計數(shù)370個卵泡,孕馬血清組較對照組GDF一9蛋白的表達(dá)增強,差異有顯著性:原位雜交共計數(shù)卵泡362個,孕馬血清組GDF一9BmRNA的表達(dá)無顯著性差異。3.卵泡培養(yǎng)后共收集卵母細(xì)胞58個,培養(yǎng)液中加FSH32個,對照組26個,免疫組化示培養(yǎng)液中加FS[I組GDF一9蛋白的表達(dá)較對照組增強,差異有顯著性,山東大學(xué)碩士學(xué)位論文與體內(nèi)實驗的結(jié)果一致。結(jié)論卵泡生長啟動后,GDF一9與GDF一9B在卵泡發(fā)育的各個時期均有表達(dá),歹l:始的時間與初級卵泡

5、出現(xiàn)的時間一致,F(xiàn)Stt可以在體內(nèi)、體外均增加GDF9的表達(dá),不影響GDF-9B的表達(dá)。關(guān)鍵詞;生長分化因子卵巢表達(dá)調(diào)控卵泡山東大學(xué)碩士學(xué)位論文TheExpressionandRegulationofGDF-9andGDF-9BinMiceOvaryABSTRACTObjectivesGrowthdifferentiationfactor一9(GDF一9)andit’shomologuegrowthdifferentiationfactor一9B(GDF9B),bothoriginatingfromtheoocyteplayamajorroleinearlyfoilic

6、ulogenesis.TofurtherinvestigatetheexpressionandtherelatedmodulatorymechanismsofGDF一9andGDF一9BweexaminedtheirexpressionduringovarianmorphogenesisandtheinfluencesofFSHontheexpressionbothinvivoandinvitro.MethodsMouseovarieswerecollectedon5day,10day,15day,20day,25dayand30dayafterbirthandafte

7、r24hoursofinjectionPMSGfromsexmaturemice,themiceinjectedNSascontr01.WedissectedfolliclesfromtheovariesofmaturemiceandculturedinvitrowithorwithoutFSH(IOOIU/L)for72hours.Thenoocytescollectionwasperformed.GDF一9proteinWSSdetectedbyimmunohistochemistrywhileGDF一9BmRNAbyinsituhy

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