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《離體胚培養(yǎng)獲得大白菜結(jié)球甘藍(lán)異源三倍體及其生殖特性研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、河北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文離體胚培養(yǎng)獲得大白菜-結(jié)球甘藍(lán)異源三倍體及其生殖特性研究姓名：顧愛俠申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：蔬菜學(xué)指導(dǎo)教師：申書興20050601摘要為創(chuàng)制大白菜一結(jié)球甘藍(lán)異附加系、異代換系、易位系，利用四倍體大白菜(AAAA，2n=4x=40)和二倍體結(jié)球甘藍(lán)(CC，2n=2x=18)雜交，采用蕾期去雄授粉，子房培養(yǎng)結(jié)合胚珠培養(yǎng)的方法，獲得了大白菜和結(jié)球甘藍(lán)的異源三倍體雜交種。并對該雜種的形態(tài)學(xué)、細(xì)胞學(xué)及其生殖特性進(jìn)行了研究，為異附加系、異代換系、易位系的創(chuàng)制提供了物質(zhì)和理論基礎(chǔ)。初步探討了蕓薹屬A、C
2、基因組染色體的親緣關(guān)系，并摸索了蕓纂屬A、C基因組原位雜交的技術(shù)，為進(jìn)一步研究蕓薹屬A、C基因組組成、起源、演化奠定了基礎(chǔ)。研究結(jié)果表明：1四倍體大白菜與二倍體結(jié)球甘藍(lán)雜交時，以四倍體大白菜為母本時有利于授粉受精，且受精前的不親和不是種間雜交障礙的主要原因，而主要是由于受精后的胚胎4：能正常發(fā)育。子房培養(yǎng)結(jié)合胚珠培養(yǎng)克服了胚的天亡，獲得了異源三倍體雜交種。改良White培養(yǎng)基適宜子房培養(yǎng)，它的平均每角果成活胚珠率為14．1％。授粉后6d為子房培養(yǎng)的最佳時期，它的平均每角果成活胚珠率為28％。子房培養(yǎng)28d后進(jìn)行胚
3、珠培養(yǎng)，改良Hiidebrandt培養(yǎng)基適宜胚珠培養(yǎng)，其胚珠成活率達(dá)80％。2該雜交種總體形態(tài)偏近于白菜，但基生葉的葉柄有縱向排列的4～6對翅狀小葉，生長勢極強(qiáng)，株商(開花期)達(dá)2m；根尖染色體數(shù)目觀察2n=29。3對其生殖特性的研究表明：①減數(shù)分裂前期I，來源于大白菜和結(jié)球甘藍(lán)的染色體交互在一起形成兩個沒有明顯分離的染色體區(qū)域，出現(xiàn)高頻率的三價體甚至是四價體，說明大白菜與結(jié)球甘藍(lán)具有較強(qiáng)的同源性；在減數(shù)分裂中期l大多數(shù)染色體排列于赤道板上，少數(shù)游離于赤道板外；后期I有13—16、14—15、14—2．13，12
4、．2．15等多種分離方式；后期II有12—1—12．16．2．16，13．2．13．14．2．14，14．14．15．15，16—16—12．1—13等多種分離方式，形成配子的多樣性為創(chuàng)制整套的異附加系提供了可能。②花粉整齊度與花粉生活力存在顯著的正相關(guān)關(guān)系，花粉生活力與結(jié)籽率里顯著的正相關(guān)關(guān)系：異源三倍體的花粉量、花粉生活力極顯著的低于四倍體大白菜和二倍體結(jié)球甘藍(lán)：異源三倍體的花粉整齊度極顯著的低于二倍體甘藍(lán)的花粉整齊度。不同母本雜交組合的雜交種與四倍體大白菜花粉整齊度的顯著性差異是不一致的。③異源三倍體雜種與
5、二倍體大白菜回交的平均結(jié)籽率為2．34％。4采用改良SDS法提取的大白菜和結(jié)球甘藍(lán)基因組DNA量、純度、分子量都較高；煮沸法剪切基因組DNA簡單易行，具有可重復(fù)性。對于大白菜和結(jié)球甘藍(lán)DNA煮沸70rain時，DNA片段主要集中在200．500bp，適于基因組原位雜交中用做封阻；采用切刻平移法標(biāo)記大白菜和結(jié)球甘藍(lán)基因組DNA時，模板采用未打斷的基因組DNA，模板量O．5“g／10ul，標(biāo)記170min時的效率最高。關(guān)鍵詞：大白菜：結(jié)球甘藍(lán)：異源三倍體；離體培養(yǎng)：生殖特性；探針標(biāo)記AllotrlploidHybri
6、dsObtainedfromInterspeciflcHybridizationbetweenChineseCabbageandCabbageandtheResearchonReproductiveCharactersMaster：GuAixiaTutor：ShenShuxingMajor：VegetableStudyfield：Biotechnology&GeneticBreedinginVegetable(CollegeofHorticulture，AgricultureUniversityofHebei．B
7、aoding，China07100I)AbstractAllotriploidhybrids(2n=3x=29，AAC)wereproducedbycrossingtetraploidChinesccabbage(BrassicacampestrisL．ssp．pekinensisAAAA，2n=4x=40)anddiploidcabbage(占．oleracea1柵capitataL．CC，2n=2x=l8)usingoveryandovuleculturemethod，whichwillbeusedforco
8、nstructingChinesecabbage—cabbageadditionlines．substitutionlincsandtranslocationlines．Themorphology,cytology．a(chǎn)ndpollencharactersoftheallotriploidhybridswerestudied．whichprovidedtheoreticba
