結(jié)球甘藍(lán)三倍體的創(chuàng)建及其細(xì)胞和胚胎發(fā)育研究

結(jié)球甘藍(lán)三倍體的創(chuàng)建及其細(xì)胞和胚胎發(fā)育研究

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1、河北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié)球甘藍(lán)三倍體的創(chuàng)建及其細(xì)胞和胚胎發(fā)育研究姓名:柳霖坡申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):蔬菜學(xué)指導(dǎo)教師:張成合20040620摘要本文以二、四倍體結(jié)球甘藍(lán)為試材,采用雌蕊整體壓片熒光顯微觀察和石蠟切片等技術(shù),對(duì)二、四倍體正反交的授粉受精和胚胎發(fā)育過程進(jìn)行了較系統(tǒng)地觀察比較,并對(duì)其雜交敗育的原因及解決方法進(jìn)行了研究探討。同時(shí),對(duì)所獲得三倍體的生長(zhǎng)發(fā)育特性、生理生化指標(biāo)以及減數(shù)分裂行為、花粉敗育途徑和配子傳遞率等進(jìn)行了觀察測(cè)定。此外,我們還發(fā)現(xiàn)了能自然產(chǎn)生2n配子的甘藍(lán)材料,并通過對(duì)其減數(shù)分裂中期II紡錘體的動(dòng)

2、態(tài)觀察,探討了其產(chǎn)生2n雄配子細(xì)胞學(xué)機(jī)制。所得結(jié)果主要有以下幾點(diǎn):1甘藍(lán)2x×4x、4x×2x授粉受精過程均能正常進(jìn)行,但胚胎發(fā)育均不正常,存在不同程度的胚胎敗育現(xiàn)象,且敗育均是由胚胎發(fā)育過程中胚乳異常退化、內(nèi)珠被細(xì)胞嚴(yán)重壞死,從而斷絕了胚胎發(fā)育的營(yíng)養(yǎng)供給所致,但兩者發(fā)生敗育的時(shí)間不同,2x×4x主要發(fā)生在小球胚階段,胚胎尚未出現(xiàn)組織分化,因此敗育十分徹底,最終形不成種子;而4x×2x主要發(fā)生在心形胚或晚心形胚階段,胚胎已有了明顯的組織分化,最終能形成少量具幼胚的小粒種子。2甘藍(lán)4x×2x和2x×4x結(jié)莢率都比較高,無明

3、顯差異,但結(jié)實(shí)性差異很大,2x×4x僅結(jié)有極少量的大粒種子(O.57%),而4x×2x除結(jié)有少量的大粒種子(O.54%)外,還結(jié)有一些小粒種子(3.25%)。經(jīng)倍性鑒定,4x×2x所結(jié)小粒種子中絕大部分為3x=27的三倍體,還有極少量為2n=26亞倍體和2n=28的超倍體,4xx2x和2x×4x所結(jié)的大粒種子均為四倍體。3激素處理膨大過程中的子房對(duì)雜種幼胚的發(fā)育有一定的促進(jìn)作用,其作用大小因激素種類、濃度和配比而異,其中200ppmlAA+200ppmBA的處理效果最好,結(jié)籽率較對(duì)照提高了3.87倍。4胚珠離體培養(yǎng)的效果

4、受胚胎發(fā)育程度的影響很大。在MS基本培養(yǎng)基上,心形胚以前的胚珠均未能培養(yǎng)成功,心形胚以后的部分胚珠能夠完成后熟作用,并直接萌發(fā)成苗。5雜交獲得的小粒種子在MS基本培養(yǎng)基上或在鋪有濕濾紙的培養(yǎng)皿中均能萌發(fā),前者的萌發(fā)率為45.56%,后者為31.10%,但后者的畸形苗相對(duì)較少,且操作簡(jiǎn)便。6三倍體結(jié)球甘藍(lán)生長(zhǎng)健壯,耐熱性增強(qiáng),結(jié)球緊實(shí),葉型指數(shù)變小,平均葉球重和部分營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)高于其二倍體。7甘藍(lán)三倍體減數(shù)分裂行為較二倍體復(fù)雜,終變期多以三價(jià)體存在,單價(jià)體和二價(jià)體占少數(shù);中期I、中期II均含有游離染色體:后期I染色體分離不

5、均衡有9/18、10/17、11/16、12/15、13/14等方式,頻率分別為0.77%,3.87%,8.76%,31+19%和48.45%,其中10/17分離是創(chuàng)建三體系的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)。8三倍體甘藍(lán)的花粉敗育主要是由于減數(shù)分裂行為異常,產(chǎn)生的小孢子本身染色體組成不均衡,導(dǎo)致其遺傳生理不協(xié)調(diào)所致,而與絨氈層細(xì)胞的發(fā)育關(guān)系不大。9甘藍(lán)3x×2x的結(jié)籽率為10.36%,2x×3x的結(jié)籽率為0.83%,但前者的2n+1株率為26.47%,后者為72.70%。表明甘藍(lán)三倍體產(chǎn)生的各種非整倍性配予中,通過花粉一般只能傳遞的n+l的

6、配子,而通過胚囊,不僅能傳遞n+l的配子,還能傳遞n+2、n+3等染色體組成更加不均衡的配子。10二倍體甘藍(lán)中存在能自然產(chǎn)生2n配子的植株,其形成2fl配子的細(xì)胞學(xué)機(jī)制主要是由于減數(shù)分裂中期II紡錘體定向發(fā)生改變,形成三分體和二分體所致,并以形成二分體為主。關(guān)鍵詞:甘藍(lán);三倍體;胚胎發(fā)育;減數(shù)分裂:敗育AStudyontheObtainingofTriploidanditsCell,EmbryodevelopmentinHeadCabbageuth0r:LIULin—poMaior:0lericultureSupervi

7、sor:ZHANGCheng-he(CollegeofHorticulture·AgriculturalUniversityofHebei.Baoding、China07l001)AbstractTheprocessofpollination,fertilizationandembryodevelopmentof4xX2xand2xX4xinheadcabbagewasobservedbythewaysoffluorescencemicroscopyandparaffinsection.Thenthecharacters

8、ofquality,growthanddevelopment,meiosisbehaviorandgamatestransmittingrateofthetfiploidplantsobtainedby4xX2xwerestudied,themethodsofsavingyoungembryocollapseandi

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