超聲耦合亞臨界水提取螺旋藻活性多肽及降血糖活性研究

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1、７乂｜ＳｏｕｔｈＣｈｉｎａＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ碩士學(xué)位論文超聲耦合亞臨界水提取螺旋藻活性多肽及降血糖活性研究作者姓名胡雙飛學(xué)科專業(yè)制糖工程指導(dǎo)教師張學(xué)武教授一所在學(xué)院食品科學(xué)與工程論文提交日期２０１８年４月Utrasound-assistedsubcriticalwaterextractionofpeptidesfromSpirulinaplatensisandtheirhypoglycemicactivitiesADi

2、ssertationSubmittedfortheDegreeofMasterCandidate：HuShuangfeiSupervisor：Prof.ZhangXuewuSouthChinaUniversityofTechnologyGuangzhou,China分類號：TQ941學(xué)校代號：10561學(xué)號：201520120104華南理工大學(xué)碩士學(xué)位論文超聲耦合亞臨界水提取螺旋藻活性多肽及降血糖活性研究作者姓名：胡雙飛指導(dǎo)教師姓名、職稱：張學(xué)武教授申請學(xué)位級別：工學(xué)碩士學(xué)科專業(yè)名稱：制糖工程研究方向：糖生物技

3、術(shù)與安全論文提交日期：2018年4月20日論文答辯日期：2018年月日學(xué)位授予單位：華南理工大學(xué)學(xué)位授予日期：2018年月日答辯委員會成員：主席：蔡俊鵬委員：張學(xué)武、魏東、陳谷、范曉丹華南理工大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研宄所取得的研宄成果。除了文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果作品。對本文的研宄做出重要貢獻(xiàn)的個人和集體，均己在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識到本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。一

4、＞沱年作者簽名：日期：６月日７學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，艮研宄生在校攻讀學(xué)位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬華南理工大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保存并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許學(xué)位論文被查閱（除在保密期內(nèi)的保密論文外）；學(xué)校可以公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以允許采用影印、縮印或其它復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文一。本人電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相致。本學(xué)位論文屬于：□保密，（校保密委員會審定為涉密學(xué)位時間：年月日

5、）＿＿＿于年日解密后適用本授權(quán)書。＿＿月＿＿０不保密，同意在校園網(wǎng)上發(fā)布，供校內(nèi)師生和與學(xué)校有共享協(xié)議的單位瀏覽；同意將本人學(xué)位論文提交中國學(xué)術(shù)期刊（光盤版）電子雜志社全文出版和編入ＣＮＫＩ《中國知識資源總庫》，傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。“”，（請?jiān)谝陨舷鄳?yīng)方框內(nèi)打Ｖ）作者簽名：日期：＇指導(dǎo)教師簽名Ｊ７ＶＸ－Ａ日期：作者聯(lián)系電話：２電子郵箱：Ｖ聯(lián)系地址（含郵編摘要螺旋藻具有豐富的營養(yǎng)與藥用價值，國內(nèi)外對螺旋藻與螺旋藻蛋白的生物活性如抗氧化、抗菌

6、、抗腫瘤等進(jìn)行了廣泛的研究，本文對其多肽的降血糖活性進(jìn)行了研究，進(jìn)一步拓展了螺旋藻的應(yīng)用價值。本文以螺旋藻粉為原料，采用超聲耦合亞臨界水法提取螺旋藻粗蛋白/多肽，與反復(fù)凍融和超聲均質(zhì)聯(lián)用法獲得的螺旋藻粗蛋白/多肽進(jìn)行了對比。系統(tǒng)研究了溫度、超聲功率、壓力、時間等因素對提取率的影響規(guī)律，并建立了響應(yīng)面數(shù)學(xué)模型。通過測定不同提取溫度下獲得的螺旋藻粗蛋白/多肽的抗氧化與降血糖活性，篩選得到活性較好的組分，利用分析型HPLC對其分子量進(jìn)行測定，通過制備型HPLC對其進(jìn)行分離純化，采用質(zhì)譜技術(shù)得到多肽序列，結(jié)合Pepti

7、deRanker與pepATTRACT對獲得的多肽進(jìn)行生物活性的預(yù)測，篩選出綜合排名前三的肽序列進(jìn)行合成并驗(yàn)證其降血糖活性。本文的主要研究成果如下：1）對亞臨界水提取設(shè)備中的提取釜結(jié)構(gòu)進(jìn)行改進(jìn)，增加了原料與亞臨界水的接觸面積，蛋白/多肽提取率由10.30%顯著提高至40.20%(p＜0.01)；四個因素對提取率的影響主次順序?yàn)椋簻囟?超聲功率>提取時間>壓力。建立的響應(yīng)面數(shù)學(xué)模型，以提取率為響應(yīng)值，以溫度、超聲功率、時間為因子，得出提取蛋白/多肽的最佳條件為：溫度153℃，超聲功率221W，提取時間64min，

8、壓力10MPa，經(jīng)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)得蛋白/多肽提取率為74.02%。而反復(fù)凍融與超聲均質(zhì)聯(lián)用法蛋白/多肽質(zhì)提取率為45.76%。由此可見，超聲耦合亞臨界水法更優(yōu)。2）采用ABTS、DPPH、羥基自由基清除率法評價螺旋藻粗蛋白/多肽的抗氧化能力。結(jié)果表明：通過超聲耦合亞臨界水提取獲得的螺旋藻蛋白/多肽在0~10mg/mL的實(shí)驗(yàn)劑量范圍內(nèi)均具有較強(qiáng)的抗氧化活性，且明顯大于超聲均質(zhì)與反復(fù)凍融聯(lián)用提取