黑靈芝多糖對小鼠腸道黏膜免疫及黏膜損傷的影響

黑靈芝多糖對小鼠腸道黏膜免疫及黏膜損傷的影響

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1、摘要摘要靈芝,在我國已有兩千多年的使用歷史,現(xiàn)代醫(yī)學(xué)也證明靈芝具有增強免疫力、抑制腫瘤生長、降血壓血脂血糖、抗氧化等諸多功效。多糖被認(rèn)為是其主要生物活性成分,本實驗室以江西贛南人工栽培的黑靈芝為原料,分離純化得到黑靈芝多糖PSG-1,前期已深入探討PSG-1對巨噬細(xì)胞及脾淋巴細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用。本研究通過腹腔注射環(huán)磷酰胺構(gòu)建免疫抑制模型,在組織水平、細(xì)胞水平和蛋白水平上,研究不同劑量的黑靈芝多糖對小鼠腸道黏膜屏障損傷及腸道黏膜免疫的影響。現(xiàn)將本研究主要結(jié)論歸納如下:1、腹腔注射環(huán)磷酰胺導(dǎo)致小鼠體質(zhì)量減輕,胸腺萎縮,小腸組織黏膜屏障損傷,影響小鼠的消

2、化吸收功能。黑靈芝多糖能夠使免疫抑制小鼠體重回升,胸腺指數(shù)增加,有利于機體健康的恢復(fù)。同時,黑靈芝多糖可以增長絨毛長度,隱窩深度,使得V/C值顯著增加。黑靈芝多糖還可以促進隱窩底部的干細(xì)胞分化、增殖為小腸杯狀細(xì)胞,增加腸絨毛表面粘液的分泌量??梢姡陟`芝多糖對小腸黏膜屏障損傷具有一定的修復(fù)作用。2、黑靈芝多糖能夠促進免疫抑制小鼠小腸中細(xì)胞因子INF-α、IL-1β向正常狀態(tài)的恢復(fù),提高小腸中IgG、IgE、IgM以及血清中sIgA、IgE的釋放量,參與機體體液免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)。此外,黑靈芝多糖還能促進小腸組織中IL-2、TNF-αmRNA基因水平的相對

3、表達。說明,環(huán)磷酰胺對正常小鼠腸道免疫環(huán)境具有破壞作用,黑靈芝多糖參與腸道免疫環(huán)境的調(diào)節(jié)。3、黑靈芝多糖能夠促進小腸組織相關(guān)免疫細(xì)胞表面的Toll樣受體(TLR-2、++TLR-4、TLR-6)基因水平的表達,提高小腸T細(xì)胞向不同細(xì)胞亞群CD4T、CD8T+++細(xì)胞的分化、增殖,且對CD4T細(xì)胞影響更大,提高CD4T/CD8T比值。ELISA法檢測小腸組織中Th1、Th2、Th17和Treg細(xì)胞分泌的不同類型的細(xì)胞因子,Wsternblot法檢測小腸組織核轉(zhuǎn)錄因子蛋白水平的表達發(fā)現(xiàn):PSG-1可以調(diào)節(jié)小腸組織不同T細(xì)胞亞群(Th1、Th2、Th17

4、和Treg)細(xì)胞因子的釋放,調(diào)節(jié)關(guān)鍵蛋白(T-bet、GATA-3、RORγt和Foxp3)的表達,進而可能促進Th1/Th2細(xì)胞平衡、Th17/Treg細(xì)胞平衡的恢復(fù)。最后,采用直接免疫熒光法發(fā)現(xiàn),黑靈芝多糖促進小腸組織IgA分泌細(xì)胞的表達,增強主效應(yīng)因子sIgA的分泌。綜合表明,黑靈芝多糖促進小腸細(xì)胞分化的可能路徑為:免疫細(xì)胞表面受體TLRs識別I摘要+++PSG-1的刺激,促進T細(xì)胞分化為CD4T、CD8T細(xì)胞,初始CD4T細(xì)胞在細(xì)胞因子等的作用下主要分化為Th1、Th2、Th17和Treg四類T細(xì)胞亞群,Th2細(xì)胞介導(dǎo)的體液免疫活化B細(xì)胞,

5、促進IgA漿細(xì)胞的增殖,成熟IgA漿細(xì)胞通過分泌sIgA抗體參與腸道黏膜免疫。關(guān)鍵詞:黑靈芝多糖;腸道屏障損傷;腸道免疫;腸道黏膜IIABSTRACTABSTRACTGanodermaatrumhasbeenusedformorethan2000yearsinourcountry.ModernmedicinealsoproveedthatGanodermaatrumhasmanyfunctionssuchasenhancingimmunity,inhibitingtumorgrowth,reducingbloodpressure,highblood

6、lipids,highbloodsugarandanti-oxidation.Polysaccharideswereconsideredtobethemainbioactivecomponents.Inourlaboratory,GanodermaatrumcultivatedintheGanzhouofJiangxiProvincewasusedasrawmaterialtoseparateandpurifypolysaccharidePSG-1.Intheearlystage,theimmunoregulatoryeffectsofPSG-1o

7、nmacrophagesandspleenlymphocyteshavebeenthoroughlyinvestigated.Inthisstudy,animmunosuppressivemodelwaswasestablishedbyintraperitonealinjectionofcyclophosphamide,andmolecularbiologicalmethodswereusedtostudytheeffectsofdifferentdosesofPSG-1onintestinalmucosabarrierandintestinalm

8、ucosainmiceatthetissuelevel,cellslevelandproteinlevel.Themain

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