天蠶素a_馬蓋寧雜合肽對(duì)小鼠小腸黏膜結(jié)構(gòu)_小腸黏膜免疫功能和腸道菌群的影響

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1、動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)2014,26(11):3387-3395ChineseJournalofAnimalNutritiondoi:10.3969/j.issn.1006-267x.2014.11.027天蠶素A-馬蓋寧雜合肽對(duì)小鼠小腸黏膜結(jié)構(gòu)、小腸黏膜免疫功能和腸道菌群的影響111121*楊田田于龍魅劉二強(qiáng)陳香君朱明星王秀青(1.寧夏醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)學(xué)院,銀川750004;2.寧夏醫(yī)科大學(xué)科技中心,銀川750004)摘要:本試驗(yàn)旨在研究天蠶素A-馬蓋寧雜合肽對(duì)小鼠小腸黏膜結(jié)構(gòu)、黏膜免疫功能和腸道菌群的影響。選取18只健康且體重相近的BALB/c小鼠隨機(jī)分成3組:對(duì)照組(生理鹽

2、水0.75mL/d灌胃)、低劑量雜合肽組(0.26mg/mL的雜合肽0.75mL/d灌胃)、高劑量雜合肽組(0.52mg/mL的雜合肽0.75mL/d灌胃)。試驗(yàn)期為6周。結(jié)果表明:1)2個(gè)雜合肽組十二指腸絨毛長(zhǎng)度均顯著大于對(duì)照組(P<0.05),各段小腸的隱窩深度均顯著低于對(duì)照組(P<0.05),各段小腸絨毛長(zhǎng)度/隱窩深度均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。2)與對(duì)照組相比,2個(gè)雜合肽組各段小腸黏膜內(nèi)免疫球蛋白A陽(yáng)性表達(dá)水平均顯著升高(P<0.05)。3)2個(gè)雜合肽組小腸黏膜內(nèi)白細(xì)胞介素(IL)-2、干擾素-γ(IFN-γ)及IL-4含量均顯著高于對(duì)照組(P<0.0

3、5),而IFN-γ/IL-4各組之間差異不顯著(P>0.05)。4)2個(gè)雜合肽組盲腸內(nèi)容物中的大腸桿菌數(shù)量均顯著低于對(duì)照組(P<0.05),雙歧桿菌與乳酸桿菌數(shù)量均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。由此得出,天蠶素A-馬蓋寧雜合肽灌胃能改善機(jī)體小腸黏膜結(jié)構(gòu);可促進(jìn)免疫球蛋白A的表達(dá)來(lái)提高小腸黏膜免疫防御功能;可促進(jìn)IL-2及IFN-γ的分泌來(lái)提高腸道細(xì)胞免疫水平,促進(jìn)IL-4的分泌以提高腸道體液免疫水平并能夠保持輔助性T細(xì)胞(Th)1/Th2的平衡狀態(tài);可有效降低腸道致病菌大腸桿菌的數(shù)量并顯著增加腸道益生菌雙歧桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量。關(guān)鍵詞:天蠶素A-馬蓋寧雜合肽;小鼠

4、;小腸黏膜結(jié)構(gòu);黏膜免疫;細(xì)胞因子;腸道菌群中圖分類(lèi)號(hào):S816.7文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1006-267X(2014)11-3387-09長(zhǎng)期、廣泛且不分選擇的濫用抗生素加重了及革蘭陰性細(xì)菌均具有良好的抑菌活性,且對(duì)機(jī)病原微生物的耐藥,同時(shí)導(dǎo)致了動(dòng)物機(jī)體內(nèi)抗生體正常微生物菌群無(wú)不良影響,具有良好的開(kāi)發(fā)[3]素藥物的大量殘留。因此研發(fā)“無(wú)毒,無(wú)殘留,無(wú)應(yīng)用前景。天蠶素A-馬蓋寧雜合肽有望作為耐藥性”的抗微生物制劑代替抗生素成為近期研一種新的環(huán)保型飼料添加劑,達(dá)到徹底替代飼用[1]究的熱點(diǎn)。抗菌肽作為具有抗菌作用的陽(yáng)離子抗生素的目的,對(duì)降低機(jī)體內(nèi)抗生素殘留以及生小肽

5、,因分子質(zhì)量小、構(gòu)象簡(jiǎn)單、無(wú)免疫原性不易產(chǎn)綠色、營(yíng)養(yǎng)的畜禽產(chǎn)品,發(fā)展健康養(yǎng)殖業(yè)具有重引起耐藥等特點(diǎn)極有可能成為新型抗微生物藥要意義。本研究團(tuán)隊(duì)前期研究發(fā)現(xiàn)在治療大腸桿[2]物。天蠶素A-馬蓋寧雜合肽(cecA-mag)是根菌引起的雛雞疾病模型的試驗(yàn)中,在同等劑量情據(jù)GenBank中天蠶素A(cecropinA)成熟肽段1~況下抗菌肽口服的治療效果比肌肉注射的治療效[4]7以及馬蓋寧(magainin)2~12的氨基酸序列選用果要好。此研究結(jié)果提示我們,天蠶素A-馬蓋酵母偏愛(ài)密碼子設(shè)計(jì)合成的雜合肽,對(duì)革蘭陽(yáng)性寧雜合肽除了具有直接抑菌的作用效果外,還可收稿日期:2014

6、-05-03基金項(xiàng)目:寧夏教育廳資助課題(NGY2012070)作者簡(jiǎn)介:楊田田(1987—),女,山東泰安人,碩士研究生,研究方向?yàn)椴≡⑸锱c分子診斷學(xué)。E-mail:happy516122@163.com*通訊作者:王秀青,副教授,碩士生導(dǎo)師,E-mail:xiuqingwang1979@163.com3388動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)26卷能通過(guò)其他的途徑引起其抗菌效果的提高。小腸染,然后取下扎口的盲腸,液氮速凍后放置于黏膜對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收是機(jī)體得以生長(zhǎng)發(fā)育的基-80℃冰箱中保存,用于測(cè)定內(nèi)容物中大腸桿菌、本保證,而正常的小腸黏膜免疫功能是動(dòng)物抵抗雙歧桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量

7、。將各小鼠剩余小腸腸道有害菌群入侵,調(diào)節(jié)腸道正常微生物菌群水自同一部位取0.2g放于離心管中,液氮中速凍后平,促進(jìn)所飼養(yǎng)動(dòng)物健康發(fā)育的前提。兩者相輔置于-80℃冷凍保藏用于ELISA檢測(cè)細(xì)胞因子的相成,共同促進(jìn)動(dòng)物抗微生物感染的能力和生產(chǎn)含量。性能的提高。因此我們推測(cè)口服途徑給予機(jī)體此1.3.2小腸黏膜結(jié)構(gòu)的觀察雜合肽可能會(huì)影響小腸黏膜的結(jié)構(gòu)、小腸黏膜免石蠟切片常規(guī)蘇木素-伊紅(HE)染色后,采疫功能及腸道不同菌群的數(shù)量,從而進(jìn)一步影響用Olympus顯微鏡10倍物鏡下觀察各組小腸黏動(dòng)物機(jī)體的整體免疫水平。為此設(shè)計(jì)和實(shí)施本試膜結(jié)構(gòu),應(yīng)用Leica圖像分析軟件測(cè)量

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