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《玉米光周期敏感基因ZmELF4的克隆及功能驗證》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、1．3．5抑制因子?????????????????91．4水稻光周期作用分子機制的研究進展??????????．．102．玉米光周期敏感現(xiàn)象的研究進展??????????????112．1玉米光周期敏感現(xiàn)象???????????????．n2．2玉米光周期敏感指標(biāo)及特性?????????????．112．3玉米光周期敏感時期的研究?????????????．122．4玉米光周期敏感相關(guān)基因的定位研究??????????．．122．5玉米光周期敏感相關(guān)基因的克隆與研究??????????133．?dāng)M南芥ELF4基因及其在其它物種中同源基因的研究進展???????143．1擬南芥ELF4基因的研
2、究進展?????????????143．2ELF4-like基因在其它物種中同源基因的研究進展??????．．154．同源序列克隆法??????????????????．．154．1基因同源序列克隆法的原理?????????????．154．2同源序列克隆法的優(yōu)點及存在的問題??????????．．165．實時熒光定量PCR技術(shù)????????????????．．175．1實時熒光定量PCR技術(shù)原理?????????????．175．2實時熒光定量PCR技術(shù)的優(yōu)點????????????．．186．亞細胞定位技術(shù)??????????????????．．186．1免疫熒光技術(shù)?????????
3、????????．196．2免疫膠體金標(biāo)記?????．???????????．196。3融合報告基因定位法???????????????．197．?dāng)M南芥轉(zhuǎn)基因方法的研究????????????????20第二章玉米光周期敏感基因ZmELF4的克隆????????????．．221．材料與方法????????????????????221．1實驗材料??????????????????．．221．2試劑與儀器??????????????????231．3方法????????????????????231．3．1總RNA的提取與純化?????????????．231．3．2DNA的提取與純化??
4、????????????241．3．3cDNA第一鏈的合成?????????????．．251．3．4玉米ZmELF4基因片段的克隆???????????261．3．4．1玉米ZmELF4基因的PCR擴增?????????261．3．4．2玉米ZmELF4基因PCR擴增產(chǎn)物的回收、連接與轉(zhuǎn)化??．261．3．5測序結(jié)果分析???????????????．272．結(jié)果與分析????????????????????272．1RNA提取、純化、第一鏈合成及檢測??????????．．272．2玉米ZmELF4基因的克隆與分析????????????．282．2．1玉米ZmELF4基因的克隆????
5、????????．282．2．2玉米ZmELF4基因序列分析???????????．’．282．2．2．1CML288和黃早4中ZmELF4基因eDNA、DNA和氨基酸序列的比較分析??????????????????．．282．2．2．2ZmELF4基因的序列分析??????????．302．2．2．3玉米ZmELF4基因的氨基酸序列分析???????322．2．2．4玉米ZmELF4基因的兩種轉(zhuǎn)錄方式???????．．333．討論??????????????????????343．1玉米ZmELF4基因是應(yīng)心仇酲腭基因的同源基因???????343．2玉米ZmELF4基因下一步亟待需要探
6、討的問題????????．35第三章玉米ZmELF4基因及其相關(guān)基因的表達分析??????????．．361．材料與方法????????????????????361．1供試材料??????????????????．．361．2光周期處理與取樣???????????????．．371．3試劑與儀器??????????????????371．4方法???????????????????．．371．4．1總RNA的提取與純化?????????????．371．4．2cDNA第一鏈的合成?????????????．．371．4．3熒光定量PCR引物的設(shè)計????????????371．4．4標(biāo)準(zhǔn)品
7、的制備和標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立??????????381．4．5樣品檢測與數(shù)據(jù)處理?????????????．382．結(jié)果與分析????????????????????382．1基因標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立???????????????．382．2基因表達模式的研究???????????????．392．2．1ZmELF4基因的節(jié)律表達模式???????????392．2．2ZmELF4基因不同生長發(fā)育階段在葉片與莖尖中的表達
