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《粗腳粉螨居群遺傳多樣性的ISSR分析》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、摘要粗腳粉螨是我國(guó)常見(jiàn)的粉螨，是倉(cāng)儲(chǔ)糧食、經(jīng)濟(jì)作物和食用菌的重要害螨，其經(jīng)濟(jì)重要性受到國(guó)內(nèi)外的廣泛重視。本研究采用ISSR分子標(biāo)記探討了不同居群粗腳粉螨的遺傳多樣性及其居群遺傳結(jié)構(gòu)。主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下。(1)探索并確定了卡n腳粉螨基因組DNA提取的最佳方案。SDS(10％m／v)40“l(fā)，蛋白酶K(10mg／mL)61上l，STE204I，tl；消化溫度：45℃；消化時(shí)l’口J：10—12h；粗腳粉螨個(gè)體數(shù)：50只；總體積250“1。(2)建立了ISSR—PCR最佳反應(yīng)體系。通過(guò)『F交實(shí)驗(yàn)方法，建立了粗腳粉螨IS
2、SR．PCR最佳反應(yīng)體系：M92+濃度2．0mmol／L、TaqDNA聚合酶0．75U、dNTPs濃度0．25}tmol／L、引物濃度0．31amol／L、模版DNA量20rig，總體積為251．d。(3)ISSR．PCR擴(kuò)增結(jié)果：共篩選出18條條帶清晰、擴(kuò)增穩(wěn)定、多態(tài)性高的引物，分別對(duì)江西南昌(NC)、九江(JJ)及安徽巢湖兩個(gè)不同寄主(AH—l、AH．2)共4個(gè)不同居群進(jìn)行ISSR．PCR擴(kuò)增，共獲得136條帶，其中多念性條帶107條，多念帶百分比(PPB)為78．68％。(4)遺傳多樣性分析：在居群水平上，平均
3、期望雜合度(He)，Shannon信息指數(shù)(I)和多念帶百分比分別為O．1302，0．1875和30．15％；在物種水平上，期望雜合度(He)，Shannon指數(shù)(I)和多念帶百分率(PPB)分別為0．0586，O．5314和78．68％。4個(gè)居群的遺傳多樣性山高到低為：JJ>NC>AH．I>AH．2，九江居群遺傳多樣性豐富度最高。(5)群體問(wèn)遺傳變昴分析：各居群?jiǎn)柕幕蚍只禂?shù)Gst為0．6283，說(shuō)明四個(gè)居群J、日J(rèn)表現(xiàn)出較高水平的遺傳分化，這與AMOVA分析結(jié)果(FsT=0．5824，P<0．001)接近。遺傳
4、結(jié)構(gòu)分析表明J苦群?jiǎn)柣鶅戳?Nm=O．2957)水平較低。基于遺傳距離的UPMGA聚類分析顯示安徽粗腳粉螨兩居群親緣關(guān)系最為緊密，九江居群與其他居群親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。分析結(jié)果可得：不同居群的粗腳粉螨發(fā)生了一定的分化，地理居群遺傳差異大于不同寄主居群遺傳差異，各居群遺傳距離與地理距離無(wú)關(guān)，說(shuō)明地理隔離并不是形成遺傳差異的主導(dǎo)因素。關(guān)鍵詞：ISSR；粗腳粉螨：遺傳多樣性Abstract———————————————————————————————————————————————————————————一ABSTRACTAcd
5、rMsSiroLinnaeus，acommonacaroidmiteinChina,isoneofthemainpestmitesdamagingthestoredproducts，economiccropsandediblefungi．Themiteiswidelystudiedduetoitseconomicimportance．Inthispaper，thegeneticstructureandgeneticdiversityofA．sireindifferemareaofChinawerestudiedbyu
6、singISSRmarker．Themainresultswereasfollows：r1)ThediscussionandestablishmentoftheoptimumprotocolextractingDNAofA．sire：SDS(10％m／v)40I，tl，proteinaseK(10mg／mL)61al，STE2049l，total250pJofdigestingsystem，andthesampleseachconsistingof50individualsweredigestedat45℃for10
7、．12h．(2)OptimizationofISSR-PCRreactionsystem：theoptimalISSR-PCRreactionsystemwasestablishedwithL16(4’)orthogonaldesign：lOXPCRBuffer2．5mmol／L，Mg-'+2．0mmol／L．dNTPs0．25p．mol／L，ISSRprimers0．39mol／L，DNA20ng，TaqDNApolymeraseO．75U，total25肛1．(3)Theresultsofamplificatio
8、n：18primerswereselectedfortheirabilitytoproduceclearandreproduciblepatternsofpolymorphicbands．Thoseprimerswerethenusedforanalysinggeneticdiversitywithinandamongpopulationsof
