β二甲基巰基丙酸內(nèi)鹽DMSP降解代謝相關(guān)功能新基因的克隆及初步鑒定

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1、學(xué)校名稱:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)分類號:學(xué)號:2010304110022單位代碼:10504密級:無華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文13.二甲基巰基丙酸內(nèi)鹽(DMSP)降解代謝相關(guān)功能新基因的克隆及初步鑒定CloningandFunctionalIdentificationofNewGenesInvolvedInDimethylsuifoniopropionaeDegradation研究生:學(xué)號:指導(dǎo)教師:指導(dǎo)小組:汪鵬2010304110022李友國教授陳大松副教授謝福莉講師李一星講師專業(yè):微生物學(xué)研究方向:環(huán)境微生物學(xué)獲得學(xué)位名

2、稱:理學(xué)碩士獲得學(xué)位時間:2013年6月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院二O一三年六月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明及使用授權(quán)書學(xué)位論文否如需保密,解密時間年月日是否保密獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在導(dǎo);

3、!幣指導(dǎo)下迸行的研究T-f睨t取得的研究成果.盡我所知,除了文中特_男{

4、加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他入已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得華中農(nóng)業(yè)大學(xué)或其他教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料,指導(dǎo)教師對此進(jìn)行了審定.與我一同工作的問患對本研究所傲的任何貢獻(xiàn)均已在論文中做了明確的說嬲,并表

5、示了謝意.研究生蔬孑矽彩帆秒多月,弘學(xué)位論文使用授權(quán)書本人完全了解華中農(nóng)業(yè)大學(xué)關(guān)于保存、使用學(xué)位論文的規(guī)定,幫學(xué)生必須按照學(xué)校要求提交學(xué)位論文的印刷本和電予版本;學(xué)校有權(quán)保存提交論文的印劂版和電予舨,并提供目錄檢索和閱覽服務(wù),可以采用影句、縮印或掃描等復(fù)稠手彀保存,匯編學(xué)位論文.本人同意華中農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不阿方式在不同媒體土發(fā)表、傳播學(xué)位論文的金都或部分內(nèi)容,為存在館際合作關(guān)系的咒弟高校用戶提供文獻(xiàn)傳遞和交換服務(wù),同時本人保留在其他媒體發(fā)表論文的權(quán)力.注:保密學(xué)位論文(印涉及i技術(shù)秘密、商業(yè)秘密或申請專.;香!

6、籌

7、潛在翳要提交保密妁論文)在解密后適用-t:本授權(quán)書.學(xué)位論文作者簽名:主荔懈務(wù)導(dǎo)幫簽名:繃簽名日期:汐,之年么月f)甚簽名日期勘f弓年£月I靠壘:三里薹蕉薹亙壁囪墊!型塑!隆堡垡塑擔(dān)羞功筐塹莖國絲壅隆壁墊壟鱉棗目錄摘要????????????????????????????????..IABSTRACT???????????????????????????????????????。II縮略表????????????????????????????????Ⅳ1前言???????????????????????????

8、????????????????11.1DMSP的生物學(xué)功能???????????????????????。11.2DMSP代謝途徑中的相關(guān)功能基因?????????????????。21.2.1DMSP去甲基化降解途徑及關(guān)鍵功能基因?????????????.41.2.2產(chǎn)DMS降解途徑及關(guān)鍵功能基因????????????????..51.2.3DMSP分解代謝中的輔助功能基因???????????????121.3研究目的和意義?????????????????????????.151.4技術(shù)路線??????

9、??????????????????????.172材料與方法?????????????????????????????182.1實驗材料????????????????????????????.182.1.1菌株和質(zhì)粒?????????????????????????。182.1.2培養(yǎng)基???????????????????????????182.1.3主要儀器和試劑???????????????????????192.2實驗方法????????????????????????????.202.2.1細(xì)菌基因組

10、DNA的提取????????????????????202.2.2基因組DNA的部分酶切及回收????????????????。212.2.3載體的制備?????????????????????????。232.2.4DNA連接反應(yīng)????????????????????????..242.2.5連接產(chǎn)物的包裝???????????????????????..242.2.6包裝產(chǎn)物的侵染???????????????????????。252.2.7文庫的質(zhì)量分析???????????????????????..25

11、2.2.8文庫的保存?????????????????????????..252.2.9文庫的篩選?????????????????????????。262.2.10B22.1的抗生素抗性分折???????????????????262.2.11三親本接合轉(zhuǎn)移???????????????????????272.2.12無DMSP代謝能力的突變株的篩選???

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