資源描述：
《腦缺血對(duì)新生大鼠室管膜下區(qū)細(xì)胞凋亡、增殖及分化的影響》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文腦缺血對(duì)新生大鼠室管膜下區(qū)細(xì)胞凋亡、增殖及分化的影響姓名：張曉華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：外科學(xué)（神經(jīng)外科）指導(dǎo)教師：江基堯;邱永明20070501中文摘要目的：探討新生大鼠腦缺血后腦白質(zhì)損傷模型的建立方法，了解腦白質(zhì)損傷的相關(guān)病理過(guò)程和形態(tài)學(xué)變化，且利用該模型對(duì)SVZ細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)研究，了解缺血對(duì)該區(qū)干細(xì)胞的影響，特別是在細(xì)胞凋亡、增殖和分化方面，以探討該區(qū)腦缺血后內(nèi)源性修復(fù)機(jī)制，為臨床治療提供相應(yīng)的理論依據(jù)。方法：實(shí)驗(yàn)共分四部分，第一部分采用雙側(cè)頸動(dòng)脈結(jié)扎的方法造成建立以腦白質(zhì)損傷為主的P3SD大
2、鼠HI模型，術(shù)后進(jìn)行腦重、體重以及側(cè)腦室面積，胼胝體厚度測(cè)定，以及紋狀體髓鞘，胼胝體快蘭陽(yáng)性纖維計(jì)數(shù)。第二部分采用連續(xù)切片TUNNEL標(biāo)記，Leica顯微鏡下進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)方法檢測(cè)SVZdl及SVZa細(xì)胞凋亡情況，TUNNEL／nestin標(biāo)記，圖像疊加技術(shù)檢測(cè)凋亡細(xì)胞是否存在神經(jīng)干細(xì)胞。第三部分采用BrdU標(biāo)記，Leica顯微鏡下進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法檢測(cè)SVZdl和SVZa細(xì)胞的增殖情況，BrdU／nestin雙標(biāo)記檢測(cè)神經(jīng)干細(xì)胞的增殖狀況，第四部分采用BrdU／TuJl、BrdU／04、BrdU／GFAP雙標(biāo)記方法分別檢
3、測(cè)增殖神經(jīng)干細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞的分化及分布，所有數(shù)據(jù)均采用STAT4．5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組大鼠術(shù)后腦重、體重即出現(xiàn)增長(zhǎng)減慢，術(shù)后l、2、3、7天較對(duì)照組明顯；從術(shù)后第7天開(kāi)始，試驗(yàn)組P3大鼠側(cè)腦室較對(duì)照組明顯擴(kuò)大，同時(shí)出現(xiàn)胼胝體亦較對(duì)照組明顯變薄，隨后，側(cè)腦室面積及胼胝體厚度與對(duì)照相比，差異越來(lái)越大。實(shí)驗(yàn)組在術(shù)后l、2周紋狀體髓鞘數(shù)量較對(duì)照明顯減少。在術(shù)后1周，實(shí)驗(yàn)組胼胝體陽(yáng)性纖維明顯較對(duì)照組減少。SVZdl凋亡細(xì)胞計(jì)數(shù)試驗(yàn)組在BACO第2天凋亡細(xì)胞明顯增多，第3天達(dá)高峰，對(duì)照組細(xì)胞凋亡在術(shù)后
4、前3天也呈增高趨勢(shì)。SVZa凋亡細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)組術(shù)后第2天凋亡細(xì)胞開(kāi)始增加，到第3天達(dá)到高峰。BACO后第2、3、7天實(shí)驗(yàn)組凋亡細(xì)胞數(shù)目明顯高于實(shí)驗(yàn)組。連續(xù)組織切片在TUNNEL及nestin標(biāo)記后，Photoshop軟件，將兩圖片重疊，在SVZdl，SVZa未發(fā)現(xiàn)存在雙標(biāo)陽(yáng)性細(xì)胞。SVZaBrdU細(xì)胞計(jì)數(shù)，實(shí)驗(yàn)組增殖細(xì)胞在術(shù)后卜7天維持較高水平，在術(shù)后l、7天有兩個(gè)峰值，隨后在術(shù)后10天增殖細(xì)胞開(kāi)始減少，但仍較對(duì)照為高。SVZdl區(qū)在術(shù)后4、7、10、14天細(xì)胞增殖與對(duì)照組相比顯著增高，在術(shù)后4—7達(dá)高峰，隨后在術(shù)后10
5、天增殖細(xì)胞開(kāi)始減少，但仍較對(duì)照為高。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組BrdU+／TuJl+(即新生神經(jīng)元)主要集中分布在嗅球，其數(shù)量明顯高于紋狀體和皮質(zhì)。實(shí)驗(yàn)組不同部位BrdU+／TuJl+(即神經(jīng)元)的數(shù)目均明顯高于對(duì)照組。新生少突膠質(zhì)細(xì)胞(BrdU+／04+)在不同分布區(qū)域的數(shù)量依次為胼胝體、嗅球、隔核、紋狀體，且實(shí)驗(yàn)組新生少突膠質(zhì)細(xì)胞明顯高于對(duì)照組。新生星形膠質(zhì)細(xì)胞(BrdU+／GFAP+)在不同分布區(qū)域數(shù)量依次為嗅球、紋狀體、胼胝體，且實(shí)驗(yàn)組新生星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量明顯高于對(duì)照組。結(jié)論：l、3日齡新生SD大鼠雙側(cè)頸動(dòng)脈結(jié)扎，可建立腦白
6、質(zhì)損傷為主的腦缺血模型，胼胝體變薄、側(cè)腦室擴(kuò)大、髓鞘形成減少。2、3日齡新生SD大鼠腦缺血后神經(jīng)干細(xì)胞不受累，提示我q]P3大鼠神經(jīng)干細(xì)胞對(duì)于缺血有更好的耐受性。3、3日齡新生SD大鼠腦缺血后SVZ細(xì)胞增殖未受限，SVZa在損傷后1周內(nèi)神經(jīng)干細(xì)胞增殖維持在較高水平，提示我們P3SD大鼠缺血后內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞增殖修復(fù)途徑被啟動(dòng)。4、3日齡SD大鼠腦缺血后，SVZ細(xì)胞除增殖增加外，其新生的神經(jīng)細(xì)胞發(fā)生了遷移，并分化為：神經(jīng)元、少突膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞，表明缺血后，SVZ細(xì)胞有自身修復(fù)腦損傷的作用。關(guān)鍵詞：新生大鼠腦缺血凋亡
7、增殖分化室管膜下區(qū)4Bffectsofcerebralischemiaonapoptosis，proliferationanddifferentiationofsubventricularzonecellsinimmatureratsABSTRACT0bjective：Toinvestigatethemethodstoestablishamodelofcerebralwhitematterinjuryinimmaturerodents，toexploretheprocessofpathologyandmorphologi
8、caIchangesbecauseofwhitematterischemia。tostudytheSVZcells，especiallytheirapoptosis，proliferationanddifferentitionofstemcellslocatedinthisarea，todiscoverthemech
