肺癌中循環(huán)腫瘤細(xì)胞的檢測(cè)

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1、國(guó)際腫瘤學(xué)雜志２０１２年７月第３９卷第７期ＪＩｎｔＯｎｃｏｌ，Ｊｕｌｙ２０１２，Ｖｏｌ３９，Ｎｏ７·５２３··綜述·肺癌中循環(huán)腫瘤細(xì)胞的檢測(cè)夏凡趙騰王艷【摘要】循環(huán)腫瘤細(xì)胞為腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的重要原因，檢測(cè)循環(huán)腫瘤細(xì)胞能早期發(fā)現(xiàn)腫瘤的轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)，同時(shí)也將有助于判斷疾病預(yù)后、指導(dǎo)治療。循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè)通常包含有篩選和分離技術(shù)如免疫磁性分選技術(shù)和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)等。隨著檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展出現(xiàn)了將篩選和分析技術(shù)合為一體的循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè)芯片?！娟P(guān)鍵詞】腫瘤循環(huán)細(xì)胞；肺腫瘤；檢測(cè)技術(shù)Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｔｅｃｈｎｉｑｕｅｏｆｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇｔｕｍｏｕｒｃｅｌｌｓｉｎｌｕｎｇｃａｎ

2、ｃｅｒＸＩＡＦａｎ，ＺＨＡＯＴｅｎｇ，ＷＡＮＧＹａｎ．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｎｃｏｌｏｇｙ，ＴｈｉｒｄＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＨａｒｂｉｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｒｂｉｎ１５００８１，Ｃｈｉｎａ【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇｔｕｍｏｒｃｅｌｌｓ（ＣＴＣｓ）ａｒｅｅｓｓｅｎｔｉａｌｆｏｒｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅａｎｄｍｅｔａｓｔａｓｉｓｉｎｍａｌｉｇｎａｎｔｔｕｍｏｒｓ．ＤｅｔｅｃｔｉｎｇＣＴＣｓｃａｎｈｅｌｐｆｏｒｅａｒｌｙｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅｃａｎｃｅｒｍｅｔａｓｔａｓｅｓａｎｄｒｅｃｕｒｒｅｎｃ

3、ｅｓ，ａｎｄａｌｓｏｃａｎｈｅｌｐｆｏｒｅｖａｌｕａｔｉｎｇｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃａｎｄｇｕｉｄｉｎｇｔｒｅａｔｍｅｎｔ．ＣＴＣｓｄｅｔｅｃｔｉｏｎｔｅｃｈｎｉｑｕｅｍａｉｎｌｙｉｎｃｌｕｄｅｓｃｒｅｅｎｉｎｇａｎｄｓｅｐａｒａｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｗｈｉｃｈｃｏｎｔａｉｎｓｉｍｍｕｎｅｍａｇｎｅｔｉｃｓｅｐａｒａｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙａｎｄｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎａｎｄｓｏｏｎ．Ｗｉｔｈｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｔｅｃｈｎｉｑｕｅ，ｔｈｅｒｅｉｓａｎｅｗｔｅｃｈｎｉｑｕｅｎａｍｅｄｃｔｃｃ

4、ｈｉｐｃｏｎｔａｉｎｓｂｏｔｈｓｃｒｅｅｎｉｎｇａｎｄｓｅｐａｒａｔｉｏｎｆｕｎｃｔｉｏｎｓ．【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ｎｅｏｐｌａｓｍｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇｃｅｌｌｓ；Ｌｕｎｇｎｅｏｐｌａｓｍｓ；Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｔｅｃｈｎｉｑｕｅ腫瘤轉(zhuǎn)移是一個(gè)多階段、多步驟的復(fù)雜過(guò)程。存性抗體與靶細(xì)胞上的抗原結(jié)合成靶細(xì)胞抗原抗體在于原發(fā)瘤和轉(zhuǎn)移瘤之外的腫瘤細(xì)胞統(tǒng)稱(chēng)為游離腫瘤磁珠復(fù)合物，其在磁力作用下發(fā)生移動(dòng)，進(jìn)而與別的細(xì)胞，其中進(jìn)入血流的又稱(chēng)循環(huán)腫瘤細(xì)胞（ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ物質(zhì)分離，達(dá)到分離特異性細(xì)胞的目的。美國(guó)Ｖｅｒｉｔｕｍｏｒｃｅｌｌ，ＣＴＣ）。Ａｓｈｗｏｒｔｈ首次報(bào)道在患者外

5、周血中ｄｅｘ公司研發(fā)的ＣｅｌｌＳｅａｒｃｈ是目前美國(guó)食品和藥品管發(fā)現(xiàn)類(lèi)似腫瘤的細(xì)胞，并提出ＣＴＣ的概念。１９９１年，理局（ＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇＡｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ，ＦＤＡ）惟一批準(zhǔn)Ｓｍｉｔｈ等首先應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎ的ＣＴＣ檢測(cè)方法。其基本步驟為：上皮細(xì)胞黏附因ｓｃｒｉｐｔｉｏｎｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＲＴＰＣＲ）檢測(cè)實(shí)體子（ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ，ＥｐＣＡＭ）抗體磁腫瘤患者外周血中的腫瘤細(xì)胞。近年來(lái)，敏感分子技珠用于捕獲ＣＴＣ，細(xì)胞角蛋白（ｃｙｔｏｋｅｒａｔｉｎ，ＣＫ）

6、熒光術(shù)的發(fā)展使得分離、計(jì)數(shù)外周血ＣＴＣ成為可能。ＣＴＣ抗體識(shí)別上皮細(xì)胞、ＣＤ４５抗體識(shí)別白細(xì)胞、４′６二脒５７在外周血中的數(shù)量稀少，大約每１０～１０個(gè)單核細(xì)胞基２苯基吲哚（ＤＡＰＩ）熒光核染料用于生成細(xì)胞圖中才有一個(gè)ＣＴＣ?，F(xiàn)有針對(duì)ＣＴＣ的檢測(cè)技術(shù)大致分像。符合腫瘤細(xì)胞學(xué)形態(tài)特征并且ＣＫＰＥ＋、ＤＡＰＩ＋為細(xì)胞富集技術(shù)和分析技術(shù)兩類(lèi)。和ＣＤ４５細(xì)胞被定義為ＣＴＣ。該檢測(cè)可自動(dòng)分選從１細(xì)胞篩選富集技術(shù)上皮性腫瘤脫落后進(jìn)入血液中的腫瘤細(xì)胞．只需要由于外周血中ＣＴＣ的數(shù)量非常少，對(duì)血液樣本７．５ｍｌ血液樣本，即可從４００多億血細(xì)胞中檢測(cè)到中的目標(biāo)細(xì)胞進(jìn)行富集以提高其檢出

7、率，顯得極為重一個(gè)ＣＴＣ。磁性細(xì)胞分選技術(shù)的策略包括陽(yáng)性篩選、要。常見(jiàn)的細(xì)胞篩選富集技術(shù)如下。陰性篩選以及兩種方法的結(jié)合。已有報(bào)道，其富集１１免疫磁性分選技術(shù)３４［１２］效率與一般的分離方法相比可提高１０～１０倍。免疫磁性分選技術(shù)（ｉｍｍｕｎｏｍａｇｎｅｔｉｃｓｅｐａｒａｔｉｏｎ，但該方法在缺乏細(xì)胞表面標(biāo)志物的非上皮起源實(shí)體ＩＭＳ）采用納米微粒制備成免疫磁珠，磁珠上的特異瘤（如肉瘤）細(xì)胞的應(yīng)用受到限制，并且其在富集過(guò)程中可能存在ＣＴＣ丟失的風(fēng)險(xiǎn)。１２膜濾過(guò)法ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１６７