大豆疫霉拮抗菌株的篩選、鑒定及拮抗作用

大豆疫霉拮抗菌株的篩選、鑒定及拮抗作用

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1、安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文大豆疫霉拮抗菌株的篩選、鑒定及拮抗作用姓名:楊光紅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):植物病理學(xué)指導(dǎo)教師:高智謀201206摘要大豆疫霉砌y幻砌砌DmsD廊P是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上極為重要的植物病原菌之一,由其引起的大豆疫病是大豆生產(chǎn)上的毀滅性病害之一。篩選具有生防潛力的大豆疫霉拮抗菌,可以為尋找病害措施和設(shè)計(jì)新的疫病控制策略提供基礎(chǔ)。本學(xué)位論文在大豆疫霉拮抗微生物篩選的基礎(chǔ)上,對(duì)2株拮抗效果較好的細(xì)菌菌株BY.2、BZ.2進(jìn)行了鑒定,并對(duì)其離體及活體拮抗作用以及促生長(zhǎng)作用進(jìn)行了研究,主要研究結(jié)果如下:1、采用平板對(duì)

2、峙法和杯碟法分別對(duì)本實(shí)驗(yàn)室保存的哈茨木霉(刪砌D如刪口^口rzfaM聊)TH.1菌株及枯草芽孢桿菌(曰以cf刀螂s“6療凰)BS菌株以及6株粉紅單端孢(研c矗D砌gcf“m,DJP“m)菌株進(jìn)行了平板抑菌作用及代謝產(chǎn)物活性測(cè)定,結(jié)果表明,它們對(duì)大豆疫霉的拮抗效果均不顯著。2、從安徽省大豆疫病田采集的大豆根際土壤中分離得到4株大豆疫霉拮抗細(xì)菌,平板對(duì)峙試驗(yàn)顯示,其中拮抗細(xì)菌菌株BY-2和BZ.2在第5d時(shí)對(duì)大豆疫霉的平板抑制效果分別為79.O%和63.97%。對(duì)菌株BY_2、BZ一2進(jìn)行了鑒定。經(jīng)形態(tài)觀察、生理生化特性測(cè)

3、定、掃描電鏡觀察及16SrDNA、gyrB序列分析,鑒定上述兩菌株均為枯草芽孢桿菌(曰口cf,脅s甜6療凰)。3、測(cè)定了不同時(shí)間的BY-2代謝液對(duì)大豆疫霉的抑制活性,結(jié)果顯示,72h代謝液對(duì)供試病原菌的菌絲生長(zhǎng)抑制效果最好;BY-272h代謝液對(duì)供試病原菌AHl9的抑制效果顯著高于其他各菌株,抑制效果達(dá)到40.93%。BY_2菌株72h代謝濾液能顯著抑制游動(dòng)孢子萌發(fā),培養(yǎng)濾液處理24h后孢子萌發(fā)抑制率為57.71%,且24h后孢子萌發(fā)抑制率顯著高于其他各處理。4、采用培養(yǎng)皿對(duì)扣法,測(cè)定了BY_2菌株揮發(fā)物對(duì)大豆疫霉的抑

4、制活性。結(jié)果表明,BY-2揮發(fā)物處理對(duì)供試大豆疫霉菌株的菌絲生長(zhǎng)均有顯著的抑制作用,但抑制率隨菌株和處理時(shí)間不同而有顯著差異,其中對(duì)菌株AHl9處理第7d時(shí)的抑制率最高,為91.94%。5、對(duì)篩選獲得的生防菌株進(jìn)行了盆栽試驗(yàn)測(cè)定,結(jié)果顯示菌株BY-2提前3d浸根接種對(duì)大豆疫病的防效顯著高于各處理,接種10d后調(diào)查防效為75.01%;BY-2菌液處理同時(shí)還可顯著地促進(jìn)大豆幼苗的生長(zhǎng);處理的鮮重干重都顯著地高于對(duì)照,分別增加了63.16%、43.48%,根長(zhǎng)和莖長(zhǎng)也都顯著高于對(duì)照,分別比對(duì)照增加56.57%、6.95%。6

5、、研究了溫度、pH、接種量和培養(yǎng)時(shí)間對(duì)菌株BY-2的影響,結(jié)果表明,菌株BY-2最適生長(zhǎng)溫度為30℃,最適pH為7.O,最適接種量為2%,最適培養(yǎng)時(shí)間為48h,為下一步生防菌劑的開發(fā)提供依據(jù)。關(guān)鍵詞:大豆疫霉,拮抗菌,篩選,鑒定,拮抗作用AbstI.a(chǎn)ct腳印Jll砌D陽sQ廊eisoneoftheVe巧importantplalltpatllogenicorgaIlismsina面culturalproduction.SoybenPh)噸ophmorabliglltcausedbytheoomyceteisadest

6、mctiVediseaseofsoybeallintheworld.Screeningofpotentiala11tagonisticbact謝aagainst腳印矗砌Dms咖口willbehelp向1for6ndingnewtargetsofcheIIlicalcon仃olandproVidinggoodideasfordesigningnewcon勃rolsb.a(chǎn)te百es.BasedonthescreeningmicroorgaIlismsagainst腳印^砌DmsQ尬e,theidentificationof

7、strainBY一2andBZ一2andtheiraultagonisticactiVitiestoP.sQ尬Pwerecarriedoutinthisp印既Themainresultswereasf’ollows:1.Byusingag撲platedualcultureandtheCupplatemethod,theiIlllibitoryactiVititiesofmesix乃·fc矗D砌ecf甜m,琊e“聊s仃ainsand乃記辦D(紀(jì),.m以辦口圮脅兒f聊s仃ainTH一1andB以cf,脅s“6療Z如s昀in

8、BSkeptiIlour1aboratorywereinVestigatedrespectiVdy,aIldmeresultsshowedthatmeinhibito巧e婦暗ctsoftheseisolateswerea11notsi弘ificantagainstPs咖P.2.Fourantagonisticbacterialst

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