小麥品種貴農(nóng)22號抗條銹病基因的遺傳分析及分子標記

小麥品種貴農(nóng)22號抗條銹病基因的遺傳分析及分子標記

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1、摘要小麥品種貴農(nóng)22號抗條銹病基因的遺傳分析及分子標記摘要小麥品種貴農(nóng)22號是我國育種學家利用來自簇毛麥的外源基因育成的著名抗源品種,在抗病育種和生產(chǎn)上具有重要的應用價值。本研究利用遺傳分析和分子標記技術(shù)對其進行了研究,主要取得了以下結(jié)果:1.通過對25個簇毛麥易位系進行抗條銹性研究,發(fā)現(xiàn)簇毛麥的抗條銹特性的確可以傳遞到普通小麥中,并在普通小麥遺傳背景中得到不同程度的表達。在簇毛麥眾多的易位系中,貴農(nóng)22號表現(xiàn)優(yōu)異的抗條銹性.苗期和成株期測試結(jié)果表明,該品種對目前流行小種條中29號、30號、31號和3

2、2號及其它小種和致病類型條中28號、水源類型一N、雜46類型一II、條中29號mut-3,mut-5均表現(xiàn)免疫到近免疫反應。這說明存在于貴農(nóng)22號染色體上的簇毛麥易位片段,不僅具有高度的抗條銹特性,而且抗銹性穩(wěn)定,抗銹譜廣。2探明了貴農(nóng)22號抗條銹病的遺傳規(guī)律。在抗條銹鑒定的基礎(chǔ)上,系統(tǒng)的研究了貴農(nóng)22號/輝縣紅正、反交F:代、F,代及BC,F:代共42個家系,對條中29號、30號、和31號的抗條銹性遺傳規(guī)律,結(jié)果表明,貴農(nóng)22號對條中29號、30號和31號的抗病性分別由三對顯性核基因控制。3.通過優(yōu)

3、化試驗條件,建立了適用于抗條銹病基因分子標記研究的工作體系。通過對Mgz+濃度、模板濃度、引物濃度、dNTP濃度和退火溫度的優(yōu)化,建立了一套穩(wěn)定性較好、重現(xiàn)性較高、靈敏度較強、適合于小麥抗條銹基因分子標記的RAPD技術(shù)體系。在25pL反應體系中,Mgz+濃度為1.5mmol/L、模板濃度為Ing爾L、引物濃度為。5Vmol/L,dNTP濃度為0.15mmol/L,TaqDNA聚合酶0.75U。該體系最佳擴增程序為:95℃預變性4min,94℃變性lmin,36℃退火Imin,72℃延伸2min,共44

4、個循環(huán),72℃補償延伸1Omin,40C保溫。4篩選到與抗條銹基因緊密連鎖的兩個RAPD分子標記。共用237條隨機引物在抗感池中篩選與抗條銹性相關(guān)的標記,初選中發(fā)現(xiàn)11條引物在抗感池中表現(xiàn)多態(tài)性。在F代群體中進行驗證,發(fā)現(xiàn)引物OPU-1在97株抗病個體中可穩(wěn)定的擴增出300bp的特異性條帶,引物OPI-6在94株抗病個體中可穩(wěn)定的擴增出1.2k6的特異性條帶,而在感病植株中均未出現(xiàn),表明2條引物均與抗條銹病基因緊密連鎖。將與抗銹基因連鎖的特異性片段OPU-l-,a?;厥?,連接到pBluescriptl

5、IKS+質(zhì)粒中,已篩選到重組質(zhì)粒。通過本研究工作,創(chuàng)制了一系列貴農(nóng)22號1輝縣紅正、反交F2.F9代家系及其F小麥品種貴農(nóng)22號抗條銹病基因的遺傳分析和分子標記的測交后代,為進一步研究貴農(nóng)22號的抗條銹遺傳奠定了基礎(chǔ)。本文所得的RAPD標記,為小麥分子標記輔助選擇抗銹育種及創(chuàng)制聚合抗條銹病品種提供了有力的工具,同時利用該標記可進行抗條銹基因的圖位克隆,為明確抗條銹基因與條銹菌的互作機理發(fā)揮重要作用。關(guān)鍵詞:小麥條銹病(PucciniastriiformisWest.)貴農(nóng)22號遺傳分析RAPD標記抗條

6、銹性摘要IIIAbstractGuinongNo.22isafamousgermplasm,whichderivedfromHaynaldiavillosahybridingwitheummerwheatandcommonwheatcultivarinChina,andisimportantinwheatbreedingandproductionpractice.ThisarticlestudiedfortheinheritancetraitsandmolecularmarkerstoGuinongN

7、o.22andthemainresultsareasfollowing:1.Twenty-fivetranslocationlinesofHaynaldiavillosaweremeasuredanddemonstratedtheresistancegenesfromHaynaldiavillosahasbeentransferredandcouldbeexpressedinthecommonwheatbackground.GuinongNo.22wasfoundtohavehighresistanc

8、etowheatstriperustamongtheexaminedwheatlines.ThefurtherresultsdemonstratedGuinongNo.22canresistancetoalloftheepidemicstriperustracesinseedingsandadults,theinfectiontypeswere0to0;.Theseresultsshowedthechromosomefragmentderivedfrom

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