紫外分光光度法-VC含量的測(cè)定

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1、模塊一紫外-可見(jiàn)分光光度法清遠(yuǎn)職業(yè)技術(shù)學(xué)院生物制藥技術(shù)專業(yè)知識(shí)目標(biāo)教學(xué)目標(biāo)能力目標(biāo)熟悉紫外吸收光譜定義及產(chǎn)生、常用術(shù)語(yǔ)、常見(jiàn)有機(jī)化合物紫外吸收光譜、定性鑒定方法；掌握紫外光譜定量分析的原理和方法，干擾的消除。繪制紫外吸收曲線；能采用紫外吸收光譜對(duì)未知試樣定性鑒定，推測(cè)化合物的分子結(jié)構(gòu)；能對(duì)工作波長(zhǎng)的選擇;能對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,繪制工作曲線,確定未知含量。子項(xiàng)目2：用紫外分光光度計(jì)對(duì)維生素C的含量的進(jìn)行測(cè)定項(xiàng)目5：用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)化妝品樣品的維生素C和砷含量進(jìn)行分析評(píng)價(jià)討論有色溶液對(duì)光選擇性吸收，那么一些無(wú)色的有機(jī)溶液是否對(duì)光沒(méi)有吸收呢?哪些物質(zhì)對(duì)紫外線有

2、吸收？請(qǐng)舉例對(duì)紫外光區(qū)有吸收的無(wú)色透明物質(zhì)都可測(cè)定,能吸收紫外光的物質(zhì):具有π電子和共軛雙鍵的化合物.紫外分光光度法的波長(zhǎng)范圍：200nm-400nm紫外吸收曲線繪制：即用一束具有連續(xù)波長(zhǎng)的紫外光照射一定濃度的樣品溶液，分別測(cè)量不同波長(zhǎng)下溶液的吸光度，即得到該化合物的紫外吸收曲線。茴香醛紫外吸收曲線紫外吸收曲線繪制問(wèn)題:如何繪制苯的吸收曲線?紫外光譜產(chǎn)生的原因及其特點(diǎn)產(chǎn)生原因：處于基態(tài)的電子因?yàn)槲漳芰?，電子在不同軌道間發(fā)生躍遷分析特點(diǎn)：1、可用來(lái)定性鑒定和結(jié)構(gòu)分析2、不需要加顯色劑，測(cè)量簡(jiǎn)單方便3、靈敏度高，準(zhǔn)確度σ→σ*＞n→σ*＞π→π*＞n→π*電子

3、躍遷和吸收的光的波長(zhǎng)有何關(guān)系？？紫外光譜常用術(shù)語(yǔ)生色團(tuán)和助色團(tuán)：產(chǎn)生特征吸收帶的具有一個(gè)或多個(gè)不飽和鍵和未共用電子對(duì)的基團(tuán)。紅移和藍(lán)移：由于取代基或溶劑的影響造成化合物結(jié)構(gòu)變化，使吸收峰向長(zhǎng)波和短波方向移動(dòng)的現(xiàn)象。增色效應(yīng)和減色效應(yīng)：由于有機(jī)化合物的結(jié)構(gòu)變化使吸收峰摩爾吸光系數(shù)增加的現(xiàn)象。溶劑效應(yīng)：由于溶劑的極性不同引起某些化合物的吸收峰的波長(zhǎng)、強(qiáng)度和形狀產(chǎn)生變化的現(xiàn)象。吸收帶的類型K吸收帶:π→π＊躍遷,吸收波長(zhǎng)λ217-280nmR吸收帶:n→π＊躍遷,吸收波長(zhǎng)λ>270nmB吸收帶:苯環(huán)震動(dòng)和π→π＊躍遷,吸收波長(zhǎng)λ230-270nmE吸收帶:→π＊躍

4、遷,芳香族化合物的特征吸收帶,吸收波長(zhǎng)λ204nm乙酰苯的紫外吸收光譜思考1、庚烷、環(huán)己烷等烷烴在200-400nm內(nèi)有無(wú)吸收？2、甲苯、丁二烯在200-400nm內(nèi)有無(wú)吸收？3、乙醛、丙酮、乙酸乙酯在200-400nm內(nèi)有無(wú)吸收？4、如果環(huán)己烷中含有少量的雜質(zhì)苯，其紫外吸收曲線會(huì)怎樣?請(qǐng)大家歸納總結(jié)可見(jiàn)分光光度法和紫外分光光度法的聯(lián)系和區(qū)別。(定義、條件、儀器、應(yīng)用)可見(jiàn)分光光度法紫外分光光度法定義基于物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光的吸收而對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的一類方法基于物質(zhì)對(duì)紫外光的吸收而對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的一類方法儀器400-780nm,鎢燈,玻璃吸收池20

5、0-400nm,氘燈,石英吸收池條件有色溶液；顯色劑；控制PH;繪制吸收曲線,選擇最大波長(zhǎng)減小干擾;合適的參比液繪制吸收曲線,選擇最大波長(zhǎng)；合適的參比液紫外吸收光譜的應(yīng)用1、定性鑒定未知樣品采用比較光譜法，標(biāo)準(zhǔn)物對(duì)照，或者標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照。2、推測(cè)結(jié)構(gòu)推定化合物的共扼關(guān)系、部分骨架；區(qū)分化合物的構(gòu)型；互變異構(gòu)體的鑒別；3、化合物純度的檢測(cè)化合物在紫外區(qū)沒(méi)有明顯的吸收峰，而雜質(zhì)在紫外區(qū)有較強(qiáng)的吸收，就可以紫外吸收曲線檢測(cè)出該化合物所含的雜質(zhì)。如乙醇中雜質(zhì)苯測(cè)定檢查了解共軛程度、空間效應(yīng)、氫鍵等；可對(duì)飽和與不飽和化合物、異構(gòu)體及構(gòu)象進(jìn)行判別。紫外—可見(jiàn)吸收光譜中有機(jī)

6、物發(fā)色體系信息分析的一般規(guī)律是：⑴若在200～750nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)無(wú)吸收峰，則可能是直鏈烷烴、環(huán)烷烴、飽和脂肪族化合物或僅含一個(gè)雙鍵的烯烴等。⑵若在270～350nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)有低強(qiáng)度吸收峰(ε＝10～100L·mol-1·cm-1),（n→π躍遷），則可能含有一個(gè)簡(jiǎn)單非共軛且含有n電子的生色團(tuán)，如羰基。有機(jī)紫外吸收光譜的解析⑶若在2５0～300nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)有中等強(qiáng)度的吸收峰則可能含苯環(huán)。⑷若在210～250nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)有強(qiáng)吸收峰，則可能含有2個(gè)共軛雙鍵；若在260～300nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)有強(qiáng)吸收峰，則說(shuō)明該有機(jī)物含有3個(gè)或3個(gè)以上共軛雙鍵。⑸若該有機(jī)物的

7、吸收峰延伸至可見(jiàn)光區(qū)，則該有機(jī)物可能是長(zhǎng)鏈共軛或稠環(huán)化合物。