羊角拗苷對豚鼠心室肌細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度的影響

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1、中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志２００７年１０月；２１（５）：３８１－３８４ＣｈｉｎＪＰｈａｒｍａｃｏｌＴｏｘｉｃｏｌ２００７Ｏｃｔ；２１（５）：３８１－３８４·３８１·羊角拗苷對豚鼠心室肌細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度的影響１１１１１邱奕寧，簡珊，彭其斌，戴紅梅，龍利紅，１２１１王芳，呂家高，姚偉星，陳建國（華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院１．藥理學(xué)系，２．附屬同濟(jì)醫(yī)院心血管內(nèi)科，湖北武漢４３００３０）摘要：目的觀察羊角拗苷（Ｄｉｖ）對豚鼠心室肌細(xì)Ａｒｎ．〕種子中提取，具有強(qiáng)心、消腫的功效。實(shí)驗(yàn)表２＋胞內(nèi)游離鈣離子（［Ｃａ］ｉ）濃度的影響，以探討Ｄｉｖ明它與毒毛花苷Ｋ（ｓｔｒｏｐｈａｎｔｈｉｎＫ）

2、具有相似的作用正性肌力作用的機(jī)制。方法Ｆｕｒａ２／ＡＭ熒光探針和療效，其吸收、排泄、蓄積等藥代學(xué)特性及不良反標(biāo)記豚鼠心室肌細(xì)胞，應(yīng)用熒光離子成像系統(tǒng)觀察應(yīng)亦與毒毛花苷Ｋ相似，但毒性較小，有效劑量僅－１２＋［１］－１Ｄｉｖ８００ｎｍｏｌ·Ｌ對心室肌細(xì)胞［Ｃａ］ｉ的影響。為毒毛花苷Ｋ的２／３。Ｄｉｖ在低于０．３６５ｍｇ·Ｌ２＋－１結(jié)果在正常臺氏液中，Ｄｉｖ使心室肌細(xì)胞［Ｃａ］ｉ（６８３ｎｍｏｌ·Ｌ）的劑量對離體貓心乳頭肌具有劑量２＋依賴性的正性肌力作用［２］。本實(shí)驗(yàn)采用熒光離子顯著升高（２４３±３６）％，在無鈣液中對［Ｃａ］ｉ無明顯影響。在無Ｎａ＋、無Ｋ＋臺氏液中，Ｄｉｖ使［

3、Ｃａ２＋］成像技術(shù)，研究Ｄｉｖ對急性分離的豚鼠心室肌細(xì)胞ｉ２＋２＋升高（９６±２０）％。給予Ｌ型鈣通道阻滯劑ＣｄＣｌ２內(nèi)游離Ｃａ濃度（［Ｃａ］ｉ）的影響，以期初步闡明１００μｍｏｌ·Ｌ－１預(yù)處理后，Ｄｉｖ仍使［Ｃａ２＋］升高（６３羊角拗苷的正性肌力作用機(jī)制。ｉ±１０）％。給予Ｔ型鈣通道阻滯劑ＮｉＣｌ２４０μｍｏｌ·Ｌ－１預(yù)處理后，Ｄｉｖ引起的［Ｃａ２＋］升高基本被阻斷。１材料和方法ｉ－１結(jié)論體外應(yīng)用Ｄｉｖ８００ｎｍｏｌ·Ｌ時(shí)使豚鼠心室?。保眲?dòng)物２＋２＋細(xì)胞［Ｃａ］ｉ升高，該升高作用依賴于細(xì)胞外Ｃａ健康成年豚鼠，雌雄不拘，體重２５０～３００ｇ，由的存在，可能主要由Ｔ型鈣通道

4、介導(dǎo)，Ｌ型鈣通道和華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。＋２＋ＮａＣａ交換蛋白亦參與其中。其正性肌力作用１．２儀器與藥品２＋與心室肌細(xì)胞［Ｃａ］ｉ升高有關(guān)。羊角拗苷，相對分子質(zhì)量５３４．６７，熔點(diǎn)２２１～關(guān)鍵詞：羊角拗苷；心??；鈣，細(xì)胞內(nèi)２２６℃，純度＞９５％，由同濟(jì)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)系提供；蛋中圖分類號：Ｒ２８５，Ｒ９７２白酶Ｅ為Ｍｅｒｃｋ公司產(chǎn)品；ＣｄＣｌ２、ＮｉＣｌ２、ＴｒｉｓＨＣｌ、文獻(xiàn)標(biāo)識碼：ＡＦｕｒａ２／ＡＭ、ＤＭＳＯ、膠原酶Ⅰ、牛血清白蛋白、ＨＥＰＥＳ文章編號：１０００３００２（２００７）０５０３８１０４均購自Ｓｉｇｍａ公司；其余試劑為國產(chǎn)分析純。Ｆｕ

5、ｒａ２熒光測鈣系統(tǒng)（Ｔ．Ｉ．Ｌ．ＬＰｈｏｔｏｎｉｃｓ，Ｇｅｒｍａｎｙ）。羊角拗苷（ｄｉｖａｒｉｃｏｓｉｄｅ，Ｄｉｖ）是從夾竹桃科植物１．３豚鼠心室肌細(xì)胞的分離－１羊角拗〔Ｓｔｒｏｐｈａｎｔｈｕｓｄｉｖａｒｉｃａｔｕｓ（Ｌｏｕｒ．）Ｈｏｏｋ．ｅｔ豚鼠腹腔注射２０％烏拉坦（１．０～１．２ｇ·ｋｇ）麻醉，氣管插管，肝素抗凝，行主動(dòng)脈插管，游離心收稿日期：２００６０９１４接受日期：２００７０５１９臟，固定于Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ裝置上恒溫灌流（３７℃，１０－１－１基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（３０５７０５５６）；教ｍＬ·ｍｉｎ，通１００％Ｏ２）。先以臺氏液（ｍｍｏｌ

6、·Ｌ：育部優(yōu)秀青年教師資助計(jì)劃（２００３）；武漢市青年科技晨光ＮａＣｌ１３５，ＫＣｌ５．４，ＭｇＣｌ２·６Ｈ２Ｏ１，ＣａＣｌ２１．８，計(jì)劃（２００４５００６０７１１１）ＮａＨ２ＰＯ４·２Ｈ２Ｏ０．３，ＨＥＰＥＳ１０，葡萄糖１０，ｐＨ作者簡介：邱奕寧（１９８２－），女，福建龍巖人，臨床醫(yī)學(xué)７．３），再以無鈣液（不加ＣａＣｌ２，其余成分同臺式液）７年制學(xué)生。－１灌流后，以含膠原酶Ⅰ０．２３ｇ·Ｌ，牛血清白蛋白聯(lián)系作者陳建國Ｅｍａｉｌ：ｃｈｅｎｊ＠ｍａｉｌｓ．ｔｊｍｕ．ｅｄｕ．－１－１０．５ｇ·Ｌ，蛋白酶Ｅ０．１２ｇ·Ｌ的無鈣液循環(huán)灌流ｃｎＴｅｌ：（０２７）８３６９２６３６

7、Ｆａｘ：（０２７）８３６９２６０８；王芳Ｅｍａｉｌ：ｗａｎｇｆａｎｇ０３２２＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎＴｅｌ：（０２７）８３６９１７６０９～１０ｍｉｎ，再用無鈣液灌流３ｍｉｎ終止酶解反應(yīng)，剪－１Ｆａｘ：（０２７）８３６９２６０８碎心室肌，置于低鈣臺氏液（０．２ｍｍｏｌ·ＬＣａＣｌ２）·３８２·ＣｈｉｎＪＰｈａｒｍａｃｏｌＴｏｘｉｃｏｌ２００７Ｏｃｔ；２１（５）２＋中孵育３０～４０ｍｉｎ，上清液過濾，即得到分離的單個(gè)２．４ＣｄＣｌ２對Ｄｉｖ引起的［Ｃａ］ｉ升高的影響心室肌細(xì)胞，室溫下靜置１～２ｈ后用于實(shí)驗(yàn)。在臺氏液