《疫原和抗血清制備》PPT課件

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1、免疫原和抗血清制備——陳雪麗陳春婉馮慧婷侯純?nèi)靥m州大學(xué)2010級醫(yī)學(xué)檢驗二班案例一常州狂犬疫苗造假事件該公司2008年生產(chǎn)的4個批次人用狂犬疫苗效價低于國家標(biāo)準，可能導(dǎo)致疫苗接種后免疫抗體水平低，無法充分發(fā)揮疫苗應(yīng)有的預(yù)防保護作用，屬于不合格產(chǎn)品。什么是疫苗？抗原？抗體？作用？疫苗病原微生物及其代謝產(chǎn)物預(yù)防疾病用于人工主動免疫的生物制劑人工減毒、滅活、利用基因工程等經(jīng)過特殊處理的抗原Avaccineisabiologicalpreparationthatimprovesimmunitytoaparticulardisease.Avaccinetypical

2、lycontainsanagentthatresemblesadisease-causingmicroorganismandisoftenmadefromweakenedorkilledformsofthemicrobe,itstoxinsoroneofitssurfaceproteins.Theagentstimulatesthebody'simmunesystemtorecognizetheagentasforeign,destroyit,and"remember"it,sothattheimmunesystemcanmoreeasilyrecogni

3、zeanddestroyanyofthesemicroorganismsthatitlaterencounters.疫苗的分類傳統(tǒng)新型傳統(tǒng)新型傳統(tǒng)新型類毒素重組抗原疫苗重組載體疫苗DNA疫苗減毒活疫苗滅活疫苗亞單位疫苗合成肽疫苗基因工程疫苗免疫原性強的病原微生物，如傷寒、霍亂等，理化方法滅活人工誘導(dǎo)變異或從自然界中篩選的毒力高度減弱的病原微生物用0.3%-0.4%甲醛處理，喪失毒性的外毒素去除有害成分，保留免疫原性成分，腦膜炎球菌莢膜疫苗將具有免疫原性的多肽抗原或氨基酸序列與適當(dāng)載體或佐劑結(jié)合成的疫苗采用DNA重組技術(shù)制備的只含保護性抗原組分的基因工程疫苗

4、將編碼病原體免疫原性的基因插入減毒的病毒或細菌，接種到人體將編碼抗原的基因轉(zhuǎn)入真核表達載體后注入人體，它需要人體細胞來利用這段基因自己表達抗原疫苗大致可以分為六大類：滅活疫苗，是被徹底殺死的病原，相當(dāng)于把反動分子槍斃以后曝尸示眾，由于是已經(jīng)死掉的階級敵人，往往導(dǎo)致革命隊伍警惕性不很高，常需要反復(fù)刺激；減毒活疫苗，其實就是可以改造好的黑五類后代，經(jīng)過教育改造，已經(jīng)減弱或喪失了危害性，進入人體后現(xiàn)身說法介紹反革命分子的長相，并且可以繁殖供長期圍觀，效果很好，但也存在突然又反叛的危險，所以在篩選確認時耗費時間極長；類毒素疫苗，是處理后的細菌外毒素，相當(dāng)于階級敵人

5、的便便經(jīng)過消毒后給革命群眾作為識別特征；亞單位疫苗，是除去其他成分后提取病原體中有效免疫原所得，如多糖類疫苗等，相當(dāng)于將謀逆賊子砍頭后傳首九邊以供識別；上述種種，均直接來源于病原，真正像照片的，其實是基因重組疫苗和DNA疫苗，它們都是對病原體照相——找到編碼免疫原的基因——這段基因相當(dāng)于底片，在基因重組疫苗中，該基因被插入表達系統(tǒng)——比如把乙肝的HBS抗原基因植入酵母菌當(dāng)中，酵母菌就是沖片機，表達出的抗原相當(dāng)于沖印好的照片，經(jīng)過純化制成疫苗；DNA疫苗則是將編碼抗原的基因轉(zhuǎn)入真核表達載體后注入人體，它需要人體細胞來利用這段基因自己表達抗原------相當(dāng)于

6、上級只發(fā)放底片，得自己沖洗。免疫原疫苗抗原抗原誘導(dǎo)機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答（免疫原性）與免疫應(yīng)答產(chǎn)物結(jié)合（抗原性）疫苗經(jīng)過特殊處理誘導(dǎo)機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答免疫原誘導(dǎo)機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答抗原半抗原僅具有抗原性疫苗都是免疫原？免疫原都是疫苗？免疫原都是抗原？抗原都是免疫原？疫苗免疫原抗原合格疫苗？安全性有效性專一性可獲得性適合大批量生產(chǎn)易保存經(jīng)濟如何制備？疫苗的制造過程，大體上可以分成4部分：1.篩選種毒；2.擴繁病原；3.處理純化；4.驗證批簽。如何制備？顆粒性抗原的制備（細胞、細菌、寄生蟲等）滅活疫苗細胞抗原（綿羊紅細胞）經(jīng)生理鹽水等溶液洗凈，配制成一定濃度；細菌抗原純菌

7、增菌后處理制備菌體(O)抗原置于100℃水浴2-2.5h去除鞭毛(H)抗原；制備H抗原，菌液用0.3%-0.5%甲醛處理；制備細菌毒素抗原，殺菌后用0.5%-1%氯化鈣處理?？扇苄钥乖瓉唵挝灰呙绨ǎ旱鞍踪|(zhì)、核酸、多糖、脂蛋白等來源：組織和細胞步驟：提取和純化粗提組織、細胞破碎，取上清組織勻漿：必須為新鮮或低溫保存高速組織搗碎機法；研磨法（腦、胰腺）2.細胞破碎：凍融法，緩慢融化，適用于細胞超聲破碎法，間歇進行，適用于細胞酶法，不易破壞內(nèi)含物成分，適用于微生物表面活性劑處理法，多用于細菌提取核酸純化（以蛋白為例）超速離心法差速離心法分離大小和密度差異較大的

8、顆粒差速離心法原理示意圖純化密度梯度離心法將樣品放在惰性介質(zhì)（梯度