《高爾基體溶酶體》PPT課件

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1、1898高爾基(Golgi)-銀染神經(jīng)細(xì)胞----高爾基體---高爾基復(fù)合體一.高爾基復(fù)合體的形態(tài)結(jié)構(gòu)相對(duì)恒定連續(xù)的整體膜結(jié)構(gòu)電鏡扁平囊泡(cisternae)小囊泡(vesicles)大囊泡(vacuoles)形成面高爾基復(fù)合體各部分膜囊具有不同的細(xì)胞化學(xué)反應(yīng),可用來進(jìn)行鑒別光鏡:網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)呈極性的細(xì)胞器煙草根尖細(xì)胞高爾基體的電鏡照片順面網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)(cisGolginetwork)[CGN]扁囊彎曲成凸面又稱形成面(formingface)或順面(cisface)特征:位于順面最外側(cè)的扁平膜囊。中間多孔呈連續(xù)分枝狀??杀讳~酸特異性染色。嗜鋨反應(yīng),經(jīng)鋨酸浸染后,高爾基體的順面膜囊被特異地染

2、色;功能:接受內(nèi)質(zhì)網(wǎng)新合成的蛋白質(zhì)與脂類,將其分類后大部分轉(zhuǎn)入中間膜囊,小部分再返回內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。中間膜囊特征:位于順面網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)與反面網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)之間由扁平囊與管道組成。標(biāo)志酶:NADP酶煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酶(NADP酶)的細(xì)胞化學(xué)反應(yīng),是高爾基體中間幾層扁平囊的標(biāo)志反應(yīng).功能:糖基修飾糖酯形成多糖的合成反面網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)(transGolginetwork)[TGN]面向質(zhì)膜的凹面又稱成熟面(matureface)或反面特征:位于反面的最外層。形態(tài)為管網(wǎng)狀,與反面囊泡相連,另一側(cè)深入細(xì)胞質(zhì)中。標(biāo)志酶:TPP酶,CMP酶焦磷酸硫胺素酶(TPP酶)的細(xì)胞化學(xué)反應(yīng),可特異地顯示高爾基體的反面1-2層膜

3、囊;胞嘧啶單核苷酸酶(CMP酶)的細(xì)胞化學(xué)反應(yīng),可顯示靠近反面上的一些膜囊狀和管狀結(jié)構(gòu),CMP酶也是溶酶體的標(biāo)志酶,溶酶體是在此產(chǎn)生的。功能:參與蛋白的分類與包裝,運(yùn)輸。周圍小泡順面?zhèn)鹊哪遗?小囊泡[vesicles]:內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高爾基體間的運(yùn)輸小泡。反面?zhèn)鹊哪遗?,大囊泡[vacuoles]:體積較大,運(yùn)輸作用分泌泡與分泌顆粒。扁平囊呈盤狀,3-10層稱-----高爾基堆扁平囊間距:20-30nm;囊腔寬:6-15nm形成面膜?。?nm;成熟面膜厚:8nm囊腔內(nèi)含:中等電子密度的物質(zhì)中間膜囊作用:多數(shù)糖基修飾;糖脂的形成;來源:小囊泡融合。凸面:形成(順)面;小囊泡Φ30-80nm球形小

4、泡,膜厚:6nm;泡內(nèi)含物質(zhì):低電子密度物質(zhì),較透明。來源:由rER‘芽生’而來。大囊泡Φ100-150nm;膜厚:8nm;泡內(nèi)含物質(zhì):高電子密度物質(zhì),濃縮泡。來源:扁平囊周邊或局部球狀膨突脫落形成。凹面:成熟(反)面二.高爾基復(fù)合體的分布和數(shù)量根據(jù)細(xì)胞類型不同,分布狀態(tài)有所不同:神經(jīng)細(xì)胞---核周圍交織成網(wǎng);肝細(xì)胞---分散分布;有極性的上皮細(xì)胞---核頂部,順面朝向內(nèi)質(zhì)網(wǎng),反面朝向質(zhì)膜。根據(jù)分化程度和功能狀況,其發(fā)達(dá)程度和數(shù)量不同:分化程度、分泌功能↑→數(shù)量↑(多達(dá)數(shù)千)(胰腺外分泌細(xì)胞、漿細(xì)胞)未分化的胚胎細(xì)胞、分泌功能不旺盛的肌細(xì)胞和淋巴細(xì)胞→數(shù)量↓三.高爾基復(fù)合體的化學(xué)組成高

5、爾基復(fù)合體膜,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜,細(xì)胞膜化學(xué)組分上的對(duì)比粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜高爾基復(fù)合體膜細(xì)胞膜總磷脂61%45%40%卵磷脂47.8%31.4%32.0%膽固醇0.120.470.51含有多種酶:特征酶:糖基轉(zhuǎn)移酶從形成面到成熟面多糖的含量呈梯度上升趨勢(shì)四.高爾基復(fù)合體的功能高爾基復(fù)合體與細(xì)胞的分泌活動(dòng)參與糖蛋白的合成和修飾參與蛋白質(zhì)的改造對(duì)蛋白質(zhì)的分揀運(yùn)輸高爾基復(fù)合體與溶酶體的形成高爾基復(fù)合體與膜的轉(zhuǎn)變。(一)高爾基復(fù)合體與細(xì)胞的分泌活動(dòng)?3H標(biāo)記亮氨酸加入培養(yǎng)基內(nèi),在不同的時(shí)間內(nèi)收集細(xì)胞做放射性自顯影.3分鐘20分鐘90分鐘高爾基復(fù)合體參與了細(xì)胞分泌活動(dòng),并起著重要的運(yùn)輸作用;在分泌顆粒的形成過程

6、中起著濃縮、修飾、加工等作用。分泌蛋白質(zhì)的分泌途徑蛋白質(zhì)在rER的核糖體上合成進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔(修飾)細(xì)胞內(nèi)膜泡運(yùn)輸高爾基復(fù)合體(加工修飾)濃縮泡酶原顆粒分泌泡細(xì)胞內(nèi)貯存分泌物排向胞外分泌過程概括為六個(gè)階段:1核糖體階段-------肽鏈的合成;2內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔階段-----肽鏈延伸、加糖、折疊與儲(chǔ)存;3胞內(nèi)運(yùn)輸階段-----分泌蛋白轉(zhuǎn)運(yùn),以出芽方式形成運(yùn)輸小泡,移向高爾基體并與扁囊融合;4分泌蛋白濃縮階段---由形成面向分泌面移動(dòng),完成濃縮、加工,形成濃縮泡脫離進(jìn)入胞質(zhì)中;5胞內(nèi)儲(chǔ)存階段-----繼續(xù)濃縮,等待釋放;6胞吐階段---------濃縮泡向細(xì)胞頂端移動(dòng),最后與質(zhì)膜融合,排到胞外。(

7、二)高爾基復(fù)合體對(duì)蛋白質(zhì)的修飾加工1.參與糖蛋白的合成和修飾N-連接的寡糖鏈:在rER腔內(nèi)合成。(半成品)糖蛋白:3H標(biāo)記甘露糖短期培養(yǎng)顆粒主要在rER3H標(biāo)記半乳糖;唾液酸只在高爾基體3H標(biāo)記N-乙酰葡萄糖胺同時(shí)在rER和高爾基體表明N-乙酰葡萄糖胺和甘露糖存在于寡糖鏈的核心部位,是在rER膜上的糖基轉(zhuǎn)移酶的催化下加在肽鏈上的;而半乳糖、唾液酸是構(gòu)成糖鏈的周圍部分,在高爾基體內(nèi)。正在ER中合成蛋白質(zhì)的N-連接糖基化N-連接的寡聚糖的進(jìn)一步加工

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