植物快速繁殖和脫毒

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1、1第七章植物快速繁殖和脫毒英東生命科學(xué)學(xué)院白音2愈傷組織根、芽誘導(dǎo)培養(yǎng)離體的植物器官、組織或細胞完整植株外植體脫分化再分化分化培養(yǎng)選擇優(yōu)良母株外植體表面消毒、接種移苗入土和入圃植物組織培養(yǎng)過程煉苗、馴化生長素、細胞分裂素37.2莖尖培養(yǎng)脫毒7.1植物快速繁殖的途徑和方法7.5脫毒后防病毒再感染7.3莖尖以外其他途徑脫毒(學(xué)生自學(xué))7.4脫毒苗的鑒定主要內(nèi)容47.1植物快速繁殖的途徑和方法◆概念：利用離體培養(yǎng)技術(shù)，將來自優(yōu)良植株的器官、組織和細胞進行離體培養(yǎng)，在短期內(nèi)獲得大量遺傳性一致的個體的方法（技術(shù)）稱快速

2、繁殖rapidclonepropagation（無性繁殖propagationinvitro或微繁micropropagation），由于這種繁殖方式繁殖數(shù)量大、速度快，因此也稱離體快速無性繁殖。5◆植物快速繁殖的類型器官型器官發(fā)生型胚狀體發(fā)生型原球莖型6◆離體快速繁殖的程序無菌培養(yǎng)物的建立培養(yǎng)物的增殖生根培養(yǎng)煉苗和移栽鑒定（細胞學(xué)或形態(tài)學(xué)）7◆植物快速繁殖的應(yīng)用①擴大繁殖珍稀植物資源和育種原始材料。②擴大繁殖經(jīng)濟效益高、但難于繁殖的植物。③用于有性繁殖變異范圍大而自然條件下又不易無性繁殖的植物。④用于自然繁

3、殖極易感染病毒的植物。⑤繁殖銷售量大、但一時用常規(guī)（分株、扦插、播種）方法，難以滿足數(shù)量上需要的植物。87.2莖尖培養(yǎng)脫毒植物脫毒（viruselimination）：利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，脫除植物細胞中浸染的病毒，生產(chǎn)健康的繁殖材料。97.2.1認(rèn)識病毒◆特點◆生活周期10◆植物病毒侵染寄主的主要途徑①農(nóng)業(yè)操作時的機械微傷②介體（昆蟲、螨、線蟲、真菌等）造成的微傷③通過嫁接、菟絲子“橋接”傳播11香蕉束頂病馬鈴薯病毒◆病毒的危害：產(chǎn)量降低、品質(zhì)退化柑橘黃龍病12◆植物患病毒病后主要表現(xiàn)三類癥狀①因葉綠體被破

4、壞或不能合成新的葉綠素而引起花葉、黃化或紅化等癥狀。②植株發(fā)生矮化、叢生或畸形等。③形成枯斑或壞死等癥狀。13◆病毒在植物體內(nèi)的運轉(zhuǎn)方式長距離運轉(zhuǎn)，通過寄主植物韌皮部的輸導(dǎo)組織隨著營養(yǎng)輸送進行轉(zhuǎn)移,速度很快。一旦病毒進入韌皮部，運轉(zhuǎn)速度突然增快。例如：水稻條紋葉枯病毒運轉(zhuǎn)速度為25cm/h。從細胞到細胞的短距離運轉(zhuǎn)，經(jīng)過細胞間的胞間連絲向鄰近細胞中擴散，速度很慢。煙草普通花葉病毒運轉(zhuǎn)速度為6-13μm/h。14◆病毒在植物體內(nèi)的分布病毒在植物體內(nèi)成不均勻分布，越靠近生長點的部位，病毒含量越低，生長點（約0.1

5、-1.0mm區(qū)域）則幾乎不含或含病毒很少。15分生組織能逃避病毒的侵染，可能的原因是：分生組織中不存在維管束系統(tǒng)“病毒鈍化系統(tǒng)”莖尖中存在高水平內(nèi)源生長素旺盛分裂的分生組織中，代謝活性很高分生組織分化速度大于病毒傳播速度莖尖生長活躍16◆依據(jù)：病毒在植物體內(nèi)分布是不均一的，越接近生長點，病毒濃度越稀，因此有可以采用小的莖尖離體培養(yǎng)而脫除植物病毒。7.2.2植物莖尖培養(yǎng)脫毒法17◆原理：已知病毒是DNA大分子，病毒侵染植物后可進入植物細胞。當(dāng)植物細胞分裂時，病毒DNA隨著復(fù)制。植物細胞分裂和病毒繁殖之間存在相互

6、競爭，在迅速分裂的植物細胞中，是正常核蛋白合成占優(yōu)勢，而在植物細胞伸長期間，是病毒核蛋白合成占優(yōu)勢。18◆無病毒苗的獲得幼苗莖尖的２～３cm小段沖洗1h左右表面消毒在雙筒解剖鏡下剝?nèi)ビ兹~，露出圓滑的生長點注射器針頭或解剖針，切取帶有1～2個葉原基的生長點培養(yǎng)基(ＭＳ或white)表面消毒劑、無菌水接種培養(yǎng)①莖尖剝離②組織培養(yǎng)選擇優(yōu)良母株19①同一種病毒在不同植物體內(nèi)分布部位不同莖原基所帶葉原基的數(shù)目與生長點（莖尖）大小的相關(guān)性例：蘋果莖原基0.05－0.08mm莖原基帶2片葉原基0.1－0.2mm莖原基帶4片

7、葉原基0.3－0.4mm莖原基帶6片葉原基0.6－0.8mm◆莖尖培養(yǎng)法脫除植物病毒的技術(shù)關(guān)鍵20②不同病毒種類在同一種植物中分布部位不同馬鈴薯：馬鈴薯卷葉病毒、Y病毒：1.0－3.0mm以內(nèi)的莖尖中X病毒：0.2－0.5mm以內(nèi)的莖尖中G病毒：0.2－0.3mm以內(nèi)的莖尖中S病毒：0.2mm以下說明取莖尖培養(yǎng)時，培養(yǎng)不同大小莖尖，所脫除的病毒種類不同。21③莖尖越小對培養(yǎng)基的要求越高，成功率越低莖尖越小，莖尖內(nèi)營養(yǎng)、水分越難長時間維持。因此對培養(yǎng)基營養(yǎng)組成，滲透壓、酸堿度、激素種類及濃度要求也就越高。莖尖越

8、小，剝離技術(shù)要求越高?？傊捎们o尖培養(yǎng)脫毒法，必須將植物種類、病毒種類、剝離莖尖的大小以及培養(yǎng)基營養(yǎng)組成四個方面統(tǒng)一起來考慮，才能收到理想的脫毒效果。22◆影響微莖尖培養(yǎng)的因素①外植體大?、谂囵B(yǎng)條件③外植體的生理狀態(tài)237.2.3提高脫毒效果◆熱處理脫毒法和莖尖脫毒法相結(jié)合。◆化學(xué)處理脫毒法和莖尖脫毒法相結(jié)合。24(1)熱處理（高溫處理、溫?zé)岑煼ǎ┟摱痉ㄔ恚翰《臼荄NA大分子，病毒進入植物細胞后