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1、實驗十：酶的特性實驗?zāi)康模杭由顚γ傅男再|(zhì)的認識。實驗內(nèi)容：溫度對酶活力的影響pH對酶活力的影響酶的激活及抑制劑酶的專一性溫度對酶活力的影響一、原理：酶的催化作用受溫度的影響，在最適溫度下，酶的反應(yīng)速度最高。大多數(shù)動物酶的最適溫度為37－40℃，植物酶的最適溫度為50－60℃。酶對溫度的穩(wěn)定性與其存在形式有關(guān)。有些酶的干燥制劑，雖加熱到100℃，其活性并無明顯改變，但在100℃的溶液中卻很快地完全失去活性。低溫能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。二、器材：試管及試管架恒溫水浴冰浴沸水浴三、試劑和材料：含0.2﹪淀粉的0.3％NaCl溶液150ml
2、，需新鮮配制稀釋200倍的唾液50ml：用蒸餾水漱口，以清除事物殘渣，再含一口蒸餾水，半分鐘后使其流入量筒并稀釋200倍，混勻備用。KI－碘溶液50ml：將KI20g及碘10g溶于100ml水中。使用前稀釋10倍。四、操作方法：淀粉和可溶性淀粉遇碘呈藍色。糊精按其分子的大小，遇碘可呈藍色、紫色、暗褐色或紅色。最簡單的糊精遇碘不呈顏色，麥芽糖遇碘也不呈色。在不同溫度下，淀粉被唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混合物遇碘呈現(xiàn)的顏色來判斷。取三支試管，編號后按下表加入試劑：管號123淀粉溶液（ml）1.51.51.5稀釋唾液（ml）11－煮沸過的稀釋唾液（
3、ml）－－－搖勻后，將1號、3號兩試管放入37℃恒溫水浴中，2號試管放入冰中，10min后去處，（將2號管內(nèi)液體分為兩半）用KI－碘溶液來檢驗1、2、3管內(nèi)淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。記錄并解釋結(jié)果，將2號管剩下的一半溶液放入37℃水浴中繼續(xù)保溫10min后，再用碘液實驗，結(jié)果如何？pH對酶活性的影響一、原理酶的活力受環(huán)境pH的影響極為顯著。不同酶的最適pH值不同。本實驗觀察pH對唾液淀粉酶活性的影響，唾液淀粉酶的最適pH約為6.8。二、器材試管及試管架吸管滴管50ml錐形瓶恒溫水浴三、試劑和材料新配制的溶于0.3％NaCl的0.5％淀粉溶液25
4、0ml稀釋200倍的新鮮唾液100ml0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液600ml0.1mol/L檸檬酸溶液400mlKI－碘溶液50mlpH試紙：pH=5、pH=5.8、pH=6.8、pH=8四種四、操作方法：取四個標有號碼的50ml錐形瓶。用吸管按下表添加0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液和0.1檸檬酸溶液以制備pH5.0－8.0的四種緩沖液。從四個錐形瓶中各取緩沖液3ml，分別注入4支帶有號碼的試管中，隨后于每個試管中添加0.5％淀粉溶液2ml和稀釋200倍的唾液2ml。向各試管中加入稀釋唾液的時間間隔各為1min。將各試管內(nèi)容物混勻，并依次置于3
5、7℃恒溫水浴中保溫。第四管加入唾液2min后，每隔1min由第3管取出一滴混和液，置于白瓷板上，加1小滴KI－碘溶液，檢驗淀粉的水解程度。待混和液變?yōu)樽攸S色時，向所有試管依次添加1－2滴KI－碘溶液。添加KI－碘溶液的時間間隔從第一管起，亦均為1min。觀察各試管內(nèi)容物呈現(xiàn)的顏色，分析pH對唾液淀粉酶活性的影響。錐形瓶號碼0.2mol/L磷酸氫二鈉（ml）0.1mol/L檸檬酸（ml）pH15.154.855.026.053.955.837.722.286.849.720.288.0唾液淀粉酶的活化和抑制一、原理酶的活性受活化劑或抑制劑的影響。氯
6、離子為唾液淀粉酶的活化劑，銅離子為其抑制劑。二、器材：恒溫水浴試管及試管架三、試劑和材料：0.1％的淀粉溶液150ml稀釋200倍的新鮮唾液150ml1％NaCl溶液50ml1％硫酸銅溶液50ml1％硫酸鈉溶液50mlKI－碘溶液100ml四、操作方法：管號12340.1％的淀粉溶液（ml）1.51.51.51.5稀釋唾液（ml）0.50.50.50.51％硫酸銅溶液（ml）0.5－－－1％NaCl溶液（ml）－0.5－－1％硫酸鈉溶液（ml）－－0.5－蒸餾水（ml）－－－0.537℃恒溫水浴、保溫10minKI－碘溶液（滴）2－32－32－3
7、2－3現(xiàn)象注：保溫時間可根據(jù)各人唾液淀粉酶活力調(diào)整解釋說明，說明本實驗第3管的意義酶的專一性一、原理酶具有高度的專一性。本實驗以唾液淀粉酶和蔗糖酶的作用為例，來說明酶的專一性。淀粉和蔗糖無還原性，唾液淀粉酶水解淀粉生成由還原性的麥芽糖，但不能催化蔗糖的水解。蔗糖酶能催化蔗糖水解產(chǎn)生還原性葡萄糖和果糖，但不能催化淀粉的水解。用Benedict試劑檢查糖的還原性。二、器材：恒溫水浴沸水浴試管及試管架三、試劑和材料：2％蔗糖溶液150ml溶于0.3％NaCl的1％淀粉溶液（需新鮮配制）150ml稀釋200倍的新鮮唾液100ml蔗糖酶溶液100ml將啤酒
8、廠的鮮酵母用水洗滌2－3次（離心），然后放在濾紙上自然干燥。取干酵母100g，置于乳缽內(nèi)，添加適量蒸餾水及少量細沙，用力研磨，提取約1h
