冰凍切片和石蠟切片各自的優(yōu)劣之處

冰凍切片和石蠟切片各自的優(yōu)劣之處

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1、冰凍切片和石蠟切片各自的優(yōu)劣之處是什么1、從一抗的選擇方面來看。有的一抗既能做石蠟切片又能做冰凍切片,而有的一抗只能做冰凍切片,關鍵取決于所要檢測的抗原穩(wěn)定性,有的抗原不穩(wěn)定,經(jīng)過組織固定,脫水、透明、浸蠟、包埋、脫蠟等一系列的做石蠟切片的步驟,所檢測的抗原易被破壞,這時只能用冰凍切片來做,檢測這類抗原的一抗只能做冰凍切片,而那些穩(wěn)定的抗原,能經(jīng)受住石蠟切片的的考驗,一般來講也可以用冰凍切片來做,總得來講,對于既可以用冰凍切片也可以用石蠟切片檢測的抗原,用石蠟切片檢測的染色效果要比冰凍切片好一些。2、從研究目的來看。石蠟切片對

2、組織細胞的定位很準確,而長期凍存組織的冰凍切片可能因冰晶的形成破壞組織細胞形態(tài)的結(jié)構(gòu),并造成抗原的彌散,從而定位不準確。3、從抗原的保真性來看。冰凍切片對抗原的保真很好,而石蠟切片在組織固定,脫水、透明、浸蠟、包埋、脫蠟等過程中可能會對抗原的性質(zhì)造成影響。4、從操作步驟的繁瑣程度看。染色過程冰凍切片簡單,而石蠟切片要求脫蠟入水、抗原修復等過程,比較繁瑣。5、總之,石蠟切片對標本的長期保存較合適,且組織細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)保持好;而冰凍切片適合對新鮮組織的制片,然后立即固定、染色效果較好,且免疫熒光中可以相對避免石蠟自發(fā)熒光的干擾。冰凍

3、切片(frozensection)是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度,然后進行切片的方法。因其制作過程較石蠟切片快捷、簡便,而多應用于手術中的快速病理診斷。冰凍切片的種類較多,有低溫恒冷箱冰凍切片法,二氧化碳冰凍切片法,甲醇循環(huán)制冷冰凍切片法等。這些方法,隨著時代的變遷,科技的發(fā)展,許多年前被認為是非常重要的技術,現(xiàn)在也逐步被淘汰了。當然有些技術,如低溫恒冷箱冰凍切片法,正在受到青睞。  ??編輯本段冰凍切片的應用 ?。?)在手術進行中,突然發(fā)現(xiàn)病人的病變與原診斷,原定手術方案不相符合,或者懷疑時,需要病理確定?! 。?/p>

4、2)了解淋巴結(jié)內(nèi)是否有轉(zhuǎn)移的腫瘤細胞,或者轉(zhuǎn)移的程度,以利于確定是否需要徹底掃除淋巴結(jié)或者其它的治療措施?! 。?)對于已確定為惡性腫瘤的患者,則需要了解其手術范圍是否足夠,上下切緣是否有殘存的腫瘤組織?! 。?)在做剖腹探查時所發(fā)現(xiàn)的腫塊或者異樣的組織?! 。?)顯示組織中的脂肪和脂類物質(zhì),這常見于某些病例如脂肪瘤及肉瘤,某些科研組織等。 ?。?)某些酶的顯示如ATP酶,琥珀酸脫氫酶等?! 。?)神經(jīng)病理學技術中的某些染色法如:Eager氏法,Marchi氏法,Cajal氏法,Hortega氏法和Holzer氏法等?! 。?

5、)對某些物質(zhì)所進行的免疫熒光的研究。編輯本段冰凍切片的制作方法低溫恒冷箱冷凍切片制作法  以ShandonAs620E型恒溫箱冷凍切片機為例,該機的箱面上有電子控制板,裝有即時冷凍鍵和除霜鍵,啟動即時冷凍鍵,機器馬上進行工作狀態(tài),并可持續(xù)10mins。啟動即時除霜鍵,可將工作間頂部后面的制冷柵上的霜除掉,并可持續(xù)15mins。有照明鍵一個,啟動該鍵可照明工作間,有利工作及觀察組織的冰凍狀況。配有消毒鍵一個,當進行一周的工作或者一天的工作后,啟動該鍵,可對工作間進行消毒。當每天工作完畢時,可啟動密鎖鍵,鎖住工作間。除此之外,箱面

6、的左邊有四個按鍵,兩個為快速自動進退鍵,兩個為微小進退鍵,還有一個手動旋鈕,調(diào)節(jié)修組織塊時的進退?! ±鋬鱿鋬?nèi)左邊的冷凍臺,溫度可達-60℃左右,冷凍箱的中間為一臺切片機,工作間的溫度在0-30℃間可任意調(diào)節(jié),并在箱面上的熒屏顯示出來。操作方法及步驟 ?、偃〔?,未能固定的組織取材,不能太大太厚,厚者冰凍費時,大者難以切完整,最好為24×24×2mm?! 、谌〕鼋M織支承器,放平擺好組織,周邊滴上包埋劑,速放于冷凍臺上,冰凍。小組織的應先取一支承器,滴上包埋劑讓其冷凍,形成一個小臺后,再放上細小組織,滴上包埋劑。 ?、蹖⒗鋬龊玫慕M

7、織塊,夾緊于切片機持承器上,啟動粗進退鍵,轉(zhuǎn)動旋鈕,將組織修平?! 、苷{(diào)好欲切的厚度,根據(jù)不同的組織而定,原則上是細胞密集的薄切,纖維多細胞稀的可稍為厚切,一般在5~10um間。 ?、菡{(diào)好防卷板。制作冰凍切片,關鍵在于防卷板的調(diào)節(jié)上,這就要求操作者要細心,準確地將其調(diào)較好,調(diào)校至適當?shù)奈恢?。切片時,切出的切片能在第一時間順利地通過刀防卷板間的通道,平整地躺在持刀器的鐵板上。這時便可掀起防卷板,取一載玻片,將其附貼上即可?! 、迲暡煌慕M織選擇不同的冷凍度。冷凍箱中冷凍度的高低,主要根據(jù)不同的組織而定,不能一概而論。如:切未經(jīng)

8、固定的腦組織,肝組織和淋巴結(jié)時,冷凍箱中的溫度不能調(diào)太低,在-10--15℃左右,切甲狀腺、脾、腎、肌肉等組織時,可調(diào)在-15~20℃左右,切帶脂肪的組織時,應調(diào)至-25℃左右,切含大量的脂肪時,應調(diào)至-30℃。冰凍切片時的注意事項 ?、俜谰戆寮扒衅逗统值都苌系陌鍓K應保持干

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