豆豉制作流程

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1、干豆豉制作流程菌種活化→菌種擴大培養(yǎng)→黃豆浸泡→蒸煮→冷卻→接種→制曲→洗曲→發(fā)酵→輔料混合→分裝→指標測定一、菌種活化1、PDA培養(yǎng)基制備及滅菌1.1材料及儀器材料:新鮮馬鈴薯、蔗糖、瓊脂、自來水器材:小鋁鍋、天平、1000ml刻度搪瓷量杯、小刀、玻璃棒、分裝漏斗、紗布、18mm×180mm試管21支、棉花、試管架、100ml量筒、電爐、高壓蒸汽滅菌裝備、恒溫箱1.2制備方法培養(yǎng)基配方:去皮馬鈴薯125g,蔗糖30g,瓊脂10g,自來水500ml(按去皮馬鈴薯200g,蔗糖20g,瓊脂20g,自來水1000ml計)操作步驟:a、去皮馬鈴薯125g切方塊(1cm大小)+500m

2、l→煮沸20min→雙層紗布過濾→計量濾液體積,鋁鍋中煮沸。b、向鋁鍋中加入蔗糖、浸洗過的瓊脂,加熱攪拌至瓊脂融化,并補足水量至400ml。c、趁熱分裝于試管,每管裝量約1/4試管長(每管約10ml)。d、分裝后塞好棉塞,舊報紙將棉塞部位包好,貼標簽。e、121℃高壓蒸汽滅菌30min。f、滅菌后趁熱擺放斜面。備注:斜面培養(yǎng)基至少制備20支2、米曲霉接種及活化2.1材料及儀器材料:米曲霉菌種(滬釀3.042)、PDA斜面培養(yǎng)基試管21支、接種環(huán)1支、酒精燈1盞、打火機、試管架、舊報紙、橡皮筋、記號筆、標簽紙、恒溫箱2.1米曲霉接種a、手持兩種試管(有菌種和無菌種)各一支、接種環(huán)

3、,斜面向上,試管水平,灼燒接種環(huán)。b、拔管塞:右手旋轉松動管塞并將其拔下,放于手中,勿放于桌面。c、試管口滅菌:拔塞后,試管口過火滅菌,切勿燒得過燙。d、取菌:接種環(huán)在試管口??繒?,小心挑取少量菌體,注意不要使帶菌的接種環(huán)部分碰壁,取出后接種環(huán)不要通過火焰。e、接種:從另一斜面培養(yǎng)基底部向上作Z字形來回劃線,勿將培養(yǎng)計劃破。f、塞管塞:取出接種環(huán),灼燒試管口,在火焰旁旋上管塞,注意不要用試管迎接管塞,以免不潔空氣進入試管。g、接種環(huán)滅菌:灼燒接種環(huán)。備注:接種4支2.2米曲霉活化a、第一次活化:將已經接種好的4支試管和空白組的5支試管,分別做好標簽并分別用舊報紙包扎棉花塞部分,

4、放在28℃恒溫箱培養(yǎng),在培養(yǎng)期間注意觀察菌體生長情況,即觀察斜面上綠色菌絲長勢情況。備注:報紙包扎時注意培養(yǎng)基部分能全部被觀察到。b、4第二次活化:挑取培養(yǎng)的4支接種試管中菌體長勢最好的2支進行再接種(接種8支培養(yǎng)基試管)、活化培養(yǎng)。備注:菌體長勢看其菌絲與孢子,培養(yǎng)基表面均勻布滿綠色菌絲,可見孢子即為長勢好。3、麩皮培養(yǎng)基配制及菌體擴大培養(yǎng)3.1.1麩皮培養(yǎng)基制備(按接種量0.4%計)材料:麩皮90g、水90ml、二級菌種:PDA培養(yǎng)基二次活化好的菌體儀器及容器:高壓滅菌鍋、500ml三角瓶6個、10ml量筒、酒精燈、接種環(huán)、打火機、舊報紙、橡皮筋、棉花培養(yǎng)基配方:麩皮與水的

5、質量比1:1二級菌種培養(yǎng)基制備:每瓶三角瓶稱取麩皮15g(2cm左右厚),向其加入15ml水(按麩皮與水的質量比1:1計)混合均勻,塞上棉花塞并用舊報紙包扎棉花塞部分,于0.1MPa滅菌40min,取出搖動,冷卻到室溫。備注:制備6瓶麩皮培養(yǎng)基3.1.2制備無菌水材料:水容器:10ml量筒、試管(帶橡膠塞)、記號筆操作:量取10ml水置于試管,塞好塞,做標記,同麩皮培養(yǎng)基一起滅菌。3.13制備無菌移液管材料:1ml移液管3支、棉花、牙簽、舊報紙操作:a、取適量棉花,用牙簽塞入移液管管口,棉花塞入長約1.5cm。b、手撕寬約2cm的舊報紙條,包扎塞好棉花的移液管,即報紙條按一定傾

6、角旋轉纏繞移液管至移液管全部包住。C、滅菌:將移液管同麩皮培養(yǎng)基一起滅菌。3.2菌體擴大培養(yǎng)3.2.1接種二級菌種:PDA培養(yǎng)基二次活化好的菌體在無菌條件下接種少許二級菌種置入麩皮培養(yǎng)基內并充分搖勻,置于28℃恒溫箱中培養(yǎng)(3天左右),中途扣瓶數(shù)次,直至麩皮上長滿綠色孢子后備用。具體操作:A、選取菌種:在第二次活化后,從中選取菌體生長良好的6支試管。B、制菌懸液:點燃酒精燈,向其加入1ml無菌水,灼燒接種環(huán)后,在試管壁口停靠會,輕輕地將菌體刮下,制成菌懸液。C、接種:在無菌條件下,將制好的菌懸液與麩皮培養(yǎng)基混合均勻,即用1支試管的菌懸液混于1瓶麩皮培養(yǎng)基,搖勻使其混合均勻,依次

7、進行下去。備注:接種6瓶3.2.2菌體擴大培養(yǎng)將接種好的3瓶麩皮培養(yǎng)基一同置于28℃恒溫箱培養(yǎng)3天左右,在培養(yǎng)期間注意觀察培養(yǎng)基狀態(tài)及菌體生長情況。麩皮基培養(yǎng)階段:在培養(yǎng)期間,微生物產熱會使培養(yǎng)基結塊,減少培養(yǎng)基中的氧含量,從而影響微生物生長繁殖,通常每隔5-6小時定期扣瓶。扣瓶操作:將三角瓶傾斜45度左右,用手在瓶底下敲擊,并邊敲邊搖,當培養(yǎng)基呈松散狀即可,注意勿將三角瓶倒置,以免培養(yǎng)基污染雜菌,影響發(fā)酵。備注:菌體擴大培養(yǎng)后,選取長勢良好的2瓶備用。4二、黃豆前處理材料:黃豆5kg、水、

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