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1、農(nóng)殘檢測方法1.農(nóng)殘試劑配置緩沖溶液:取一包緩沖劑,加入500ml蒸餾水,溶解攪拌均勻,密閉、避光、陰涼處保存。顯色劑:取顯色劑一瓶,加入15ml緩沖溶液溶解,4℃冰箱中保存。底物:取底物一瓶,加入15ml蒸餾水溶解,4℃冰箱中保存。乙酰膽堿酯酶:取乙酰膽堿酯酶一瓶,用3ml緩沖溶液溶解,4℃冰箱中保存。注:因農(nóng)殘試劑生產(chǎn)廠家眾多,使用時請以試劑說明書為準(zhǔn)!2.樣品處理選取有代表性的蔬菜樣品,擦掉樣品表面泥土,剪成1cm見方碎片,取樣品1g,放入燒杯或提取瓶中,加入5ml緩沖溶液,振蕩1min~2min,倒出提取液
2、,靜置3min~5min,待用。注意:樣品不可用水沖洗,應(yīng)擦去表面泥土等雜物后取樣。為了保證取樣具有代表性,葉菜一般取來自不同植株葉片的葉尖部樣本,果菜從不同個體的表皮處取樣。3.對照溶液測試在提取瓶中加入2.5ml緩沖溶液,再加入100ul酶液、100ul顯色劑,搖勻后于37℃放置15分鐘(每批樣品的控制時間必須一致)。15分鐘后再加入100μL底物搖勻,此時檢液開始顯色反應(yīng),應(yīng)立即倒入1cm比色皿,放入儀器比色池中,將儀器調(diào)到測量界面,按操作指示面板按鍵區(qū)的“對照”按鈕,儀器開始做對照。3分鐘后儀器自動對照完成
3、,對照完成后將對照樣取出,保持儀器界面不變。注意:對照測試必須在第一通道進行,對照測試△A應(yīng)>0.3,若對照測試的結(jié)果小于以上數(shù)值時,儀器會自動提示“對照錯誤”,須重新做對照,以保證測量結(jié)果的準(zhǔn)確性。(對照測試△A<0.3的原因:一是酶的活性不夠,二是反應(yīng)溫度太低。)4.樣品溶液測試另取干凈的提取瓶,放入2.5ml樣品提取液,加入100ul酶液、100ul顯色劑,搖勻后于37℃放置15分鐘(放置的時間與對照液放置的時間必須一致)。15分鐘后再加入100μL底物搖勻,此時檢液開始顯色反應(yīng),應(yīng)立即倒入1cm比色皿,放入
4、儀器比色池中,按操作指示面板按鍵區(qū)的“測量”按鈕開始測量,3分鐘后儀器測量完成,顯示測量結(jié)果。結(jié)果以酶被抑制的程度(抑制率)表示,當(dāng)蔬菜樣品提取液對酶的抑制率≥50%時,表示蔬菜中有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在,樣品為陽性結(jié)果,陽性結(jié)果的樣品需要重復(fù)檢驗2次以上。對陽性結(jié)果的樣品,可用其它方法進一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。5.說明蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有對酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時,可采取整株(體)蔬菜浸提。對一些含葉綠素較高的蔬菜,也可采取整株
5、(體)蔬菜浸提的方法,減少色素的干擾。甲醛檢測方法1.試劑配置甲醛試劑(一)甲醛試劑(二):將甲醛試劑(二)①加少量熱水溶解,再加入甲醛試劑(二)②,冷卻后定容于50ml容量瓶注意:所有試劑均需避光、低溫(冰箱4℃)保存!甲醛試劑(一)有腐蝕性;配制好的甲醛試劑(二)可使用一個月。2.樣品處理準(zhǔn)確稱取0.2g樣品放入哈希管中,加入5滴甲醛試劑(一)和10ml蒸餾水,混勻后蓋緊瓶蓋,放入沸水中加熱5min,取出冷卻至室溫,用0.45μm微孔濾膜過濾,以除去懸浮顆粒,此為待測溶液。3.空白取蒸餾水10ml于10ml比色
6、管中,加入甲醛試劑(二)1ml,混合均勻,放入恒溫水浴鍋中50℃加熱15分鐘,取出冷卻至室溫,移入1cm比色皿中,放入儀器相應(yīng)比色池中,按操作指示面板區(qū)的“對照”鍵進行對照,對照完成后,儀器會自動記錄對照結(jié)果,并在顯示屏下方顯示為“對照測量完成”。4.測量移取處理好的樣品溶液5ml于10ml比色管中,加入蒸餾水定容至10ml,然后再加入甲醛試劑(二)1ml,混合均勻,放入恒溫水浴鍋中50℃加熱15分鐘,取出冷卻至室溫,移入1cm比色皿中,放入已經(jīng)做過對照的儀器通道中按操作提示面板區(qū)的“測量”鍵進行測量,測量完成后,
7、儀器自動顯示樣品中甲醛濃度值X(mg/kg)。吊白塊檢測方法1.試劑配置吊白塊試劑(一)吊白塊試劑(二):將吊白塊試劑(二)①加少量熱水溶解,再加入吊白塊試劑(二)②,冷卻后定容于50ml容量瓶注意:所有試劑均需避光、低溫(冰箱4℃)保存!吊白塊試劑(一)有腐蝕性;配制好的吊白塊試劑(二)可使用一個月。2.樣品處理準(zhǔn)確稱取0.2g樣品放入哈希管中,加入5滴吊白塊試劑(一)和10ml蒸餾水,混勻后蓋緊瓶蓋,放入沸水中加熱5min,取出冷卻至室溫,用0.45μm微孔濾膜過濾,以除去懸浮顆粒,此為待測溶液。3.空白取10
8、ml蒸餾水于10ml比色管中,加入吊白塊試劑(二)1ml,混合均勻,放入恒溫水浴鍋中50℃加熱15分鐘,取出冷卻至室溫,移入1cm比色皿中,放入儀器相應(yīng)比色池中,按操作指示面板區(qū)的“對照”鍵進行對照,對照完成后,儀器會自動記錄對照結(jié)果,并在顯示屏下方顯示為“對照測量完成”。4.測量移取處理好的樣品溶液5ml于10ml比色管中,加入蒸餾水定容至10ml,然后再