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《GBT18647-2002 動物球蟲病診斷技術(shù) - 下載地址.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、GB/'r18647-2002前言球蟲病(coccidiosis)是多種動物的一種重要寄生蟲病，對家畜、家禽、魚類和野生動物等均有不同程度的危害，各國均有發(fā)生。本病對家禽和兔危害較大，急性暴發(fā)的死亡率可超過3000;其次是豬、牛、羊等大家畜，急性感染常引起下痢，生長嚴重受阻;也偶有魚類和野生動物發(fā)生球蟲病的報道。特別在集約化的養(yǎng)殖中，若控制不嚴，會造成重大的經(jīng)濟損失。本病的病原為泡子蟲綱(Sporozoa)，球蟲亞綱(Coccidia)，艾美耳科(Eimeriidae)中的艾美耳屬(Eimeria)、等抱屬(Isospora)、泰澤屬(Tyzzeria),溫揚屬(Wenyo
2、nella)的球蟲。每種動物都有各自特有的球蟲種，文獻記錄畜禽和野生動物的球蟲種已達1340種。國內(nèi)外對球蟲病診斷的經(jīng)典方法是病原檢查，并結(jié)合臨床癥狀和病理剖檢進行綜合診斷。盡管國內(nèi)外學(xué)者建立了多種免疫學(xué)和血清學(xué)技術(shù)，如色素試驗法、子袍子制動反應(yīng)、間接血凝試驗、免疫熒光抗體試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗(EIASA)、免疫細胞化學(xué)技術(shù)、隨機引物擴增多態(tài)性DNA(RAPD)等，但由于這些方法檢出的準確性和操作復(fù)雜等問題，尚不能代替現(xiàn)有方法。最常用的方法仍是病原檢查和綜合診斷技術(shù)。病原檢查簡單、易行，既可定量、又可定性，既可用于發(fā)病前、又可用于發(fā)病后，以確定動物或動物群感染球蟲的程度。
3、綜合診斷主要用于發(fā)病或死亡后的診斷，確定動物或動物群是否因感染球蟲而發(fā)病或死亡病原檢查可廣泛用于流行病學(xué)調(diào)查、防治藥物的篩選和臨床驗證、進出口檢疫、無本病健康動物群的建立等。為了規(guī)范球蟲與球蟲病的檢疫方法，使得檢出結(jié)果客觀、準確、一致，以保證《中華人民共和國動物防疫法》的實施，特制定本標(biāo)準。本標(biāo)準的附錄A、附錄B為標(biāo)準的附錄，附錄C為提示的附錄。本標(biāo)準由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出。本標(biāo)準由全國動物檢疫標(biāo)準化技術(shù)委員會歸口。本標(biāo)準起草單位:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海家畜寄生蟲病研究所、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所。本標(biāo)準主要起草人:黃兵、陳兆國、白啟。中華人民共和國國家標(biāo)準Gs/T18
4、647-2002動物球蟲病診斷技術(shù)Diagnostictechniquesforanimalcoccidiosis1適用范圍本標(biāo)準規(guī)定了動物球蟲病的病原檢查和綜合診斷技術(shù)。本標(biāo)準適用于禽類和兔的球蟲病(感染)的診斷。2病原檢查2.1材料準備2門1飽和鹽水，配制方法見附錄A(標(biāo)準的附錄)。2.1.260目銅絲網(wǎng)或尼龍網(wǎng)、100mL量杯、50mL和100mL燒杯、5mL玻璃瓶、吸管、鑷子、天平、離心機、麥氏蟲卵計數(shù)板、載玻片、蓋玻片、顯微鏡等。2-1.3被檢動物或動物群的新鮮糞便不少于200g,2.2操作方法2.2門定性檢查2.2.1.1取被檢動物或動物群的新鮮糞便10g，放人
5、50mL燒杯中，加人適量水。2.2.1.2輕輕攪勻，經(jīng)6。目銅絲網(wǎng)或尼龍網(wǎng)過濾。2.2.1.3將濾液移人4支10mI,-15mL試管，2500r/min離心10min,22.1.4傾去上清液，各管沉淀物中加人少量飽和鹽水，混勻。各管的沉淀物混懸液移人一個5MI玻璃瓶。2.2.1.5用飽和鹽水(見附錄A功A滿，蓋上蓋玻片(蓋玻片須能與液面接觸)，靜置10min,2}2.1.6取下蓋玻片，放在載玻片上。2.2.1.7置載玻片于顯微鏡臺上，用10X10或10X40的倍數(shù)進行檢查。2.2.1.8判定:a)發(fā)現(xiàn)球蟲卵囊，判為陽性，說明該動物(群)已感染球蟲，并可根據(jù)附錄C(提示的附錄
6、)卵囊形態(tài)特征，初步確定為哪一屬的球蟲;b)未發(fā)現(xiàn)球蟲卵囊，需重復(fù)檢查5次，仍未見球蟲卵囊，本糞樣可判為陰性。只有連續(xù)檢查糞便7d-10d，均未發(fā)現(xiàn)球蟲卵囊，方可說明該動物(群)未感染球蟲。2.2.2定量檢查22.2.1對定性檢查中呈陽性的糞樣，要進行定量檢查。2.2-2.2取待檢糞樣2g，放人50mL燒杯。2.2.2.3加人少量自來水?dāng)噭颍?jīng)60目銅絲網(wǎng)或尼龍網(wǎng)過濾，并用自來水沖洗幾次濾網(wǎng)。22.2.4濾液經(jīng)2500r/min離心10mina2.2-2.5用少量飽和鹽水將沉淀物攪勻，移人100mL量杯，加飽和鹽水至60ml處，充分混勻。2.2.2.6用吸管吸取混懸液注滿麥
7、氏蟲卵計數(shù)板，靜置5min,22.2.7將麥氏蟲卵計數(shù)板置于顯微鏡下檢查，用10X10或10X40倍，數(shù)出每個刻室(1cmx1:Mx中華人民共和國國家質(zhì)i監(jiān)督檢驗檢疫總局2002-02-19批準2002-05-01實施標(biāo)準分享網(wǎng)www.bzfxw.com免費下載GB/T18647-20020.15cm=0.15cm'，含10。個小方格)內(nèi)的所有卵囊數(shù)，計算出平均值A(chǔ)。對壓線的卵囊，按左、上壓線計，右、下壓線不計處理。22.2.8每克糞便卵囊數(shù)(OPG)按式(1)計算:OPG=(A令0.15)X60一2=AX200·
