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1、羅格列酮對髂動(dòng)脈球囊損傷兔 血管內(nèi)皮的保護(hù)作用廣州軍區(qū)武漢總醫(yī)院心內(nèi)科丁世芳曹選超盧青研究背景經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈腔內(nèi)成形術(shù)（percutaneoustransluminalcoronaryangioplasty，PTCA）SMC過度增殖遷移血管內(nèi)皮損傷血管負(fù)性重塑炎癥細(xì)胞激活血管彈性回縮血栓形成、機(jī)化再狹窄影響PTCA術(shù)后再狹窄重要因素血管內(nèi)皮損傷平滑肌細(xì)胞的過度增殖、遷移脂肪組織：內(nèi)分泌器官？分泌多種物質(zhì)，如纖溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、瘦素、腫瘤壞死因子-a、抵抗素及脂聯(lián)素(adiponectin，APN)等改善胰島素抵抗、調(diào)節(jié)脂肪代謝、防止動(dòng)脈粥樣硬化等方面
2、有著重要作用脂聯(lián)素也被稱為apM1、Acrp30或AdipoQ，是一種脂肪細(xì)胞特異的細(xì)胞因子脂聯(lián)素(adiponectinAPN)生物學(xué)作用抗AS抗炎抗氧化胰島素增敏噻唑烷二酮類(TZDs)藥物是高選擇性過氧化物酶體增殖物激活受體（PPAR）γ激動(dòng)劑，是治療2型糖尿病的一類新藥該類藥物與體內(nèi)受體結(jié)合后激活，從而改善2型糖尿病患者的胰島素抵抗、高胰島素血癥和高糖血癥代謝紊亂羅格列酮就是其中有代表性的一種改善2型糖尿病患者的胰島素抵抗、改善高胰島素血癥和高糖血癥代謝紊亂調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝紊亂抑制過度的炎癥反應(yīng)抗動(dòng)脈粥樣硬化腎臟保護(hù)作用研究目的羅格列酮(ROS)脂聯(lián)素(APN)內(nèi)
3、膜增殖再狹窄（RS）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)羅格列酮對髂動(dòng)脈球囊損傷兔 血管內(nèi)皮的保護(hù)作用隨機(jī)分組模型制備血清學(xué)指標(biāo)病理形態(tài)學(xué)研究內(nèi)容1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組手術(shù)對照組1僅行右側(cè)股動(dòng)脈結(jié)扎術(shù)，普通飲食喂養(yǎng)2高脂飲食喂養(yǎng)8周后，行右側(cè)髂動(dòng)脈球囊內(nèi)膜剝脫術(shù)模型組3高脂飲食8周+右側(cè)髂動(dòng)脈球囊內(nèi)膜剝脫術(shù)+術(shù)前3天羅格列酮（2mg1/日）羅格列酮組2.兔腹-髂動(dòng)脈血管內(nèi)膜損傷模型制作麻醉—速麻安肌肉注射右側(cè)膝上大腿內(nèi)側(cè)股動(dòng)脈搏動(dòng)最明顯處縱行切開皮膚，鈍性分離皮下組織及肌肉股動(dòng)脈、股靜脈、股神經(jīng)游離完畢股動(dòng)脈遠(yuǎn)端結(jié)扎，近端用無創(chuàng)血管夾暫時(shí)夾閉阻斷血流用眼科剪在結(jié)扎動(dòng)脈上方作一個(gè)45度切口，直接插入冠
4、脈球囊導(dǎo)管，深度約12-15cm，達(dá)髂動(dòng)脈分叉水平以6～8個(gè)大氣壓充盈動(dòng)脈球囊，將充氣球囊沿髂動(dòng)脈上下牽拉5-8cm至股動(dòng)脈近端，反復(fù)3次，充分剝離髂動(dòng)脈內(nèi)膜術(shù)后以醫(yī)用活力碘消毒手術(shù)傷口，肌注青霉素80萬單位抗感染，連續(xù)3天模型制備所用的球囊和壓力泵3.血生化標(biāo)本的采集和測定于實(shí)驗(yàn)初和術(shù)后1、4周末采測血糖（FPG）、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）的含量ELISA法測定血漿中脂聯(lián)素的表達(dá)水平4.病理形態(tài)學(xué)觀察術(shù)后1、4周末處死各組動(dòng)物，游離腹主動(dòng)脈并逆行分離至髂總動(dòng)
5、脈和股動(dòng)脈，以左、右髂動(dòng)脈分叉點(diǎn)為參照，依次留取病理標(biāo)本各1～2cm，固定切片，分組編號HE染色及彈力纖維染色觀察受損血管組織形態(tài)學(xué)改變，利用圖像分析軟件，進(jìn)行新生內(nèi)膜面積、中膜面積及內(nèi)膜增殖指數(shù)等分析5.免疫組化及細(xì)胞凋亡檢測免疫組化（SABC法）烤片，脫蠟，水化→封閉內(nèi)源性過氧化物酶→熱修復(fù)抗原→BSA封閉→滴加一抗→滴加二抗→滴加SABC→DAB顯色→蘇木素復(fù)染→脫水，透明，封固陽性表達(dá)分析：每份標(biāo)本分別選取5個(gè)高倍視野（×400倍），染色完成后在光鏡下觀察結(jié)果，以細(xì)胞漿內(nèi)棕黃色粗大顆粒為陽性。HPAIS1000高清晰度彩色病理圖像分析系統(tǒng)采集圖像，Image-
6、ProPlusversion6.0軟件對圖像進(jìn)行分析。細(xì)胞凋亡檢測（TUNEL法）19烤片，脫蠟，水化→封閉內(nèi)源性過氧化物酶→蛋白酶消化→標(biāo)記緩沖液→滴加生物素化地高辛抗體→滴加SABC→DAB顯色→蘇木素復(fù)染→脫水，透明，封固陽性表達(dá)分析：每份標(biāo)本分別選取5個(gè)高倍視野（×400倍），染色完成后在光鏡下觀察結(jié)果，細(xì)胞核中有棕黃色顆粒者為陽性細(xì)胞。計(jì)算細(xì)胞凋亡的陽性率=（陽性細(xì)胞數(shù)/觀察細(xì)胞總數(shù)）×100%6.統(tǒng)計(jì)分析以SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組資料間的比較采用t檢驗(yàn)，多組間差異的顯著性比較用方差分析，P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義制
7、表、攝片描述實(shí)驗(yàn)結(jié)果組別時(shí)間FPGTCTGHDL-CLDL-C正常對照組08.44±0.401.43±0.090.73±0.130.91±0.140.71±0.0818.29±0.341.37±0.630.69±0.130.86±0.160.68±0.3448.26±0.451.41±0.290.74±0.140.88±0.130.74±0.09模型組08.41±0.461.38±0.070.81±0.200.92±0.150.69±0.0918.33±0.4228.71±1.72b1.08±0.25b0.87±0.1418.32±0.92b48.3
