對影響血細(xì)胞研究儀測定結(jié)果因素實踐研究

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1、對影響血細(xì)胞研究儀測定結(jié)果因素實踐研【中圖分類號］R446［文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B【文章編號11004-5511(2012)06-0383-01各級醫(yī)院臨床檢驗應(yīng)用中非常廣泛的儀器之一就是血細(xì)胞分析儀，隨著計算機技術(shù)的快速發(fā)展和數(shù)據(jù)處理技術(shù)的日新月異，血細(xì)胞分析儀的自動化水平和可檢測維度也越來越高，給臨床檢驗帶來了極大的方便性和準(zhǔn)確性。筆者在基層醫(yī)院的臨床應(yīng)用中，積累了許多檢測數(shù)據(jù)和病例，并進(jìn)行了對比分析，結(jié)合實際進(jìn)一步探究了影響血細(xì)胞分析儀測定結(jié)果的實踐因素。1環(huán)境溫度的干擾實驗室環(huán)境溫度決定了儀器、試劑以及標(biāo)本的溫度，計數(shù)時稀釋液的溫度應(yīng)為(22±4)°Co當(dāng)

2、稀釋液的溫度低時,紅細(xì)胞溶解后的膜碎片聚集，粒度分布曲線的平坦段變短,當(dāng)試劑溫度低于18匸時需加熱使用。有些溶血劑在低溫時可出現(xiàn)結(jié)晶，并不容易被察覺，很難引起操作者的注意，但在顯微鏡下，可見到其中懸浮著許多細(xì)小的結(jié)晶，這樣的溶血劑滴入血液中，白細(xì)胞計數(shù)必然增高。我們基層醫(yī)院地處北方，這種情況在實際操作中時有發(fā)生，尤其是在冬季。血細(xì)胞分析儀分析不出稀釋液在低溫時產(chǎn)生的聚合結(jié)晶，常使分析結(jié)果出現(xiàn)異常。在臨床中可以將溶血劑或稀釋液進(jìn)行加熱，以升高溫度，消除結(jié)晶。還可加入適量的非離子表面活性劑，從而減輕溶血劑結(jié)晶的發(fā)生。低溫也易激活血小板，引起血小板凝集，造成血小

3、板計數(shù)假性降低。2抗凝劑的影響ABX60血液細(xì)胞分析儀檢測EDTA-K2含量不同的靜脈血,臨床結(jié)果表明EDTA-K2有效抗凝劑量在1.5~6.Omg/mL時，不影響分析結(jié)果。自制抗凝瓶EDTA-K2用量1.5?2.2mg/mL為宜。低于1.5mg/mL時抗凝效果欠佳，出現(xiàn)肉眼不易發(fā)現(xiàn)的凝集，可表現(xiàn)為血小板降低。在采血時，一般2mL的采血量，其誤差在土0.5mL范圍內(nèi)的話比較適宜。血量過多或過少都會對結(jié)果造成影響，血量過多抗凝不充分，會出現(xiàn)凝塊；血量過少，會導(dǎo)致抗凝劑過濃。筆者分析認(rèn)為，由于血細(xì)胞遇抗凝劑先有一個短暫的(P2min)收縮過程，這是因為鉀離子進(jìn)

4、入血漿以后，改變了滲透壓，導(dǎo)致水從細(xì)胞內(nèi)流出所致。隨后細(xì)胞將鉀離子泵進(jìn)膜內(nèi)，細(xì)胞又恢復(fù)原態(tài)。絕大部分患者的標(biāo)本這一時間只需要幾分鐘，但也有人需要20?30min。抗凝劑過濃會延長這個平衡時間。3標(biāo)本放置時間的影響筆者通過觀察總結(jié)，發(fā)現(xiàn)標(biāo)本存放3~6h對多數(shù)血液分析參數(shù)均有不同程度的影響，主要影響WBC和PLT結(jié)果。但有部分標(biāo)本在放置的8h內(nèi)大部分參數(shù)沒有顯著改變，而平均血小板體積、血小板分布寬度、大血小板比率和血小板壓積在2h內(nèi)卻有明顯增高。筆者認(rèn)為，標(biāo)本放置時間過長會導(dǎo)致細(xì)胞分層，分層的細(xì)胞會產(chǎn)生不同的代謝物，形成微環(huán)境，此時，細(xì)胞的體積與其周圍的微環(huán)境

5、相適應(yīng)，重新混勻后需重新建立平衡，最初的廣2min收縮,達(dá)到平衡約需30mino這一現(xiàn)象對血脂較高的標(biāo)本影響更為顯著。測定時間對血小板的影響更為顯著，在一定的時間段內(nèi),隨著時間的延長，抗凝劑與血液充分溶融，松散聚集的血小板逐步解聚，血小板數(shù)值逐步升高。實際操作中，由于急需報告結(jié)果(尤其是急診標(biāo)本)而使待測時間縮短，往往導(dǎo)致血小板計數(shù)結(jié)果偏低。4生理和病理因素的干擾在臨床實踐中，筆者有時會發(fā)現(xiàn)應(yīng)用血細(xì)胞儀對新生兒血液進(jìn)行分析時，使用正常量溶血劑計數(shù)白細(xì)胞，各項結(jié)果與實際有差異。筆者認(rèn)為，由于新生兒處于特殊的生理缺氧狀態(tài)，其紅細(xì)胞數(shù)和血紅蛋白都高(Hb>200

6、g/L)o常規(guī)溶血劑用量不能將紅細(xì)胞完全破壞，加大溶血劑用量，可以使白細(xì)胞正確分類，計數(shù)準(zhǔn)確。因此，在新生兒血液分析中掌握好溶血劑用量是獲得可靠結(jié)果的關(guān)鍵。病理因素也可影響血液分析的結(jié)果，在某些疾病的影響下，當(dāng)平均紅細(xì)胞體積小于70fL時，血小板計數(shù)假性升高，這時需用顯微鏡人工計數(shù)才能得到準(zhǔn)確的結(jié)果。5采血因素的影響自動血細(xì)胞分析儀要求靜脈采血，且一針見血。若采血技術(shù)不熟練，不能一針見血，致使采血時間過長，混入組織液成分及血液長時間滯留于采血器中，容易引起血小板的活化和聚集，形成肉眼不易察覺的微小凝塊，致使血小板計數(shù)結(jié)果假性降低。采血后應(yīng)及時混勻，使抗凝劑

7、與血液充分接觸，發(fā)揮抗凝作用。對于末梢血（手指血）的采取，則影響因素更大，采血時如穿刺不深，擠壓過甚，導(dǎo)致血小板凝聚，組織液滲入等，最終致使結(jié)果不準(zhǔn)確。所以采取末梢血時，穿刺要深，盡量使血液自然流出，盡量避免用力擠壓。由于采血不當(dāng)，而引起的溶血對血小板計數(shù)結(jié)果也會有影響，常使血小板計數(shù)增高。通常血小板和紅細(xì)胞在20?30fL之間有重疊。計數(shù)血小板時易受小紅細(xì)胞以及紅細(xì)胞碎片的影響，而使血小板的計數(shù)假性增高。因此，臨床檢驗中發(fā)現(xiàn)溶血標(biāo)本,應(yīng)重新采血或顯微鏡進(jìn)行血小板直接計數(shù)可使結(jié)果可靠。綜上所述，血細(xì)胞分析儀在臨床使用過程中有著手工法無可比擬的優(yōu)點，但也存在

8、著許多干擾因素，不同程度地導(dǎo)致分析結(jié)果的不可靠，因此在實際工作過程