茉莉酸甲酯對高山紅景天愈傷組織中紅景天苷和多糖積累的影響

《茉莉酸甲酯對高山紅景天愈傷組織中紅景天苷和多糖積累的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在工程資料-天天文庫。

1、茉莉酸甲酯對高山紅景天愈傷組織中紅景天昔和多糖積累的影響［摘要］目的：探明茉莉酸甲酯（MeJA）對高山紅景天愈傷組織生物量及有效物質(zhì)積累的影響，旨在為其產(chǎn)品生產(chǎn)提供一種新的材料來源。方法：在3L氣球型氣升式生物反應器內(nèi)培養(yǎng)高山紅景天愈傷組織20d后添加MeJA,研究了MeJA處理時間及濃度對愈傷組織生物量、紅景天昔和多糖積累及超氧化物歧化酶（SOD）和過氧化物酶（POD）活性的影卩向。結(jié)果:用125umol?L-l的MeJA處理時發(fā)現(xiàn)0?6d愈傷組織生物量無明顯變化，但超過6d后顯著減少，MeJA處理4d時紅景天昔和多糖的含量及生產(chǎn)量最高，同時SOD和POD活性達最大。MeJA濃度對愈傷組織

2、生物量和活性物質(zhì)積累影響很大，濃度超過125Hmol?L-l時愈傷組織生物量明顯減少；紅景天昔和多糖的最大積累量分別出現(xiàn)在225,275umol?L-l的MeJA濃度處理。對SOD和POD活性測定結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在MeJA225卩mol?L-l處理中出現(xiàn)峰值。對高山紅景天愈傷組織中紅景天昔及多糖含量與野生植株進行比較的結(jié)果,愈傷組織中紅景天昔和多糖含量顯著高于植株的根和莖葉，愈傷組織中紅景天昔的含量分別是根、莖葉的1.1倍、2.4倍；多糖含量分別是根、莖葉的3.6,8.0倍。結(jié)論：高山紅景天愈傷組織在氣球型氣升式生物反應內(nèi)培養(yǎng)20d后加入225Umol?L-l的茉莉酸甲酉旨后繼續(xù)培養(yǎng)4d有利于紅景

3、天昔及多糖的積累，且這兩種活性物質(zhì)的含量明顯高于野生植株。因此，通過生物反應器培養(yǎng)愈傷組織是一種獲得大量高山紅景天活性物質(zhì)的有效方法，可作為高山紅景天產(chǎn)品生產(chǎn)的另一原材料來源。［關鍵詞］茉莉酸甲酯；紅景天昔；多糖；酶活性高山紅景天RhodiolasachalinensisA.Bor又名紅景天，庫頁紅景天，景天科紅景天屬多年生草本植物,是長白山珍惜藥用植物之一，以根及根莖入藥［1］,具有抗缺氧、抗輻射，提高免疫、抗病毒［2］等藥理作用,其主要的活性物質(zhì)是紅景天昔、多糖類、黃酮類、酚類、揮發(fā)油⑶等。近年來，隨著對紅景天藥理功效研究的不斷深入，其功能也廣泛地被人們所了解，導致市場需求量逐年增加。目

4、前，高山紅景天的野生資源已瀕臨枯竭，且在人工栽培方面由于其適合在高寒干燥的環(huán)境中生長、不耐高溫、極易發(fā)生病害，難以滿足市場的需求量⑷。因此利用植物細胞培養(yǎng)工程手段來獲得植物代謝產(chǎn)物的研究已越來越受關注，生物反應器的應用是大量獲得代謝產(chǎn)物的重要途徑。然而在生物反應器培養(yǎng)過程中，往往利用誘導子來刺激植物代謝產(chǎn)物的合成。茉莉酸甲酯在植物代謝過程中起誘導信號傳導作用［5］,有效刺激植物代謝產(chǎn)物的生物合成，可引起植物代謝產(chǎn)物的迅速積累［6］。在許多研究中茉莉酸甲酯作為一種誘導子可顯著的提高代謝產(chǎn)物產(chǎn)量，楊英等⑺發(fā)現(xiàn)，茉莉酸甲酯對脹果甘草細胞的生長有抑制作用，但是能夠促進甘草總黃酮產(chǎn)量的增加；王學勇等⑻

5、認為MeJA能顯著促進丹參毛狀根中丹參酮類成分的積累并向培養(yǎng)基中釋放。對于高山紅景天，在懸浮培養(yǎng)中利用茉莉酸甲酯作為誘導子獲得大量的代謝產(chǎn)物還尚未見相關報道，因此本試驗用反應器內(nèi)培養(yǎng)20d的愈傷組織為材料，探明了加入茉莉酸甲酯處理時間及濃度對高山紅景天愈傷組織中紅景天昔和多糖含量積累的影響以及對SOD和POD活性的測定，旨在為提高紅景天代謝產(chǎn)物提供一種新途徑，為紅景天藥物的開發(fā)提供技術參考。1材料參照邵春繪等⑼方法獲得愈傷組織并增殖，將增殖的愈傷組織（鮮重約20g）接種于含2L培養(yǎng)基的3L氣球型氣升式生物反應器中，培養(yǎng)基為MS+BA3.0mg?L-l+NAA0.3mg?L-l+蔗糖30g?L

6、-l,pH調(diào)節(jié)為5.8,在溫度為（25±2）°C,光照強度為1600lx,每天光照16h條件下培養(yǎng)20d,將獲得的愈傷組織作為本試驗的試驗材料。3L氣球型氣升式生物反應器，JA21002電子天平（上海精天電子儀器有限公司），PHS-3C型pH計（上海精密科學儀器有限公司雷磁儀器廠），YHW1103遠紅外快速干燥箱（天津市華北實驗儀器有限公司），LG16-B離心機（北京雷波爾離心機有限公司），0.22um過濾器（直徑13mm,北京英偉達科技有限公司）,UV1102型分光光度計（上海天美科學儀器有限公司）,高效液相色譜（SP-15CShimadzuCo.Japan）,色譜柱ThermoScien

7、tific（4.6mmX250mm,5um,USA）,紫外檢測器（SPD-15C,ShimadzuCo.Japan）,超聲波提取器（TH-100QX,濟寧市超聲波儀器有限公司）。葡萄糖購于天津市科密歐化學試劑有限公司（批號20120206）,紅景天昔標準品購于成都曼斯特生物科技有限公司（批號MUST-12102401）o2方法2.1茉莉酸甲酯處理天數(shù)對高山紅景天愈傷組織生物量和有效物質(zhì)積累的影響反應器培養(yǎng)20