一株煙草青枯病生防菌的篩選鑒定及其發(fā)酵優(yōu)化

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1、一株煙草青枯病生防菌的篩選鑒定及其發(fā)酵優(yōu)化摘要:以煙草青枯病原菌[茄科雷爾氏菌(Ralstoniasolanacearum)]為篩選指示菌,采用平板共培養(yǎng)初篩和發(fā)酵上清濾液復(fù)篩的方法,篩選到煙草青枯病拮抗菌株XLA03,其抑菌圈直徑為13.74mm;經(jīng)16SrDNA鑒定,菌株XLA03為解淀粉芽砲桿菌(Bacillusamy1oliquefaciens)o市單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)優(yōu)化得到了菌株XLA03生物量較高的搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基配方為玉米淀粉15?0g/L.豆粕50.0g/L.K2HPO4?3H2O1.0g/L.MgS04?7H2O0.75g/L、MnSO4?H2O0.010g

2、/L;培養(yǎng)條件為起始pH7?0,接種量1%,裝液量20mL/250mLo關(guān)鍵詞:煙草青枯病菌(Ralstoniasolanacearum);解淀粉芽抱桿菌(Bacillusamyloliquefaciens);篩選;發(fā)酵優(yōu)化中圖分類號:S435.72;TQ458文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A文章編號:0439—8114(2014)08-1810—05ScreeningandFermentationOptimizationofAntagonisticBacillusagainstTobaccoBacterialWiltZHAOXiao-yanl,YANGHuan2,CHENJian-gangl

3、,WANGChang-jun3,JIZhi-xial,CHENShou-wenl(1.StateKeyLaboratoryofAgriculturalMicrobiology,HuazhongAgriculturalUniversity,Wuhan430070,China;2?WuhanLeyangBiotechnologyCo.,Ltd?,Wuhan430071,China;3?HubeiTobaccoResearchInstitute,Wuhan430030,China)Abstract:Onebacterialstrainwasscreenedforitsantagon

4、isticact?1VityagainstRa1stoniaso1anacearumbasedonthesize0fthebacteriostaticcircleinV?1trobythedualcu1tureandcu1turefiltratetestsandnamedasXLA03.ItSbacter■10stat■1cc■1rc1ec0u1dreach13mm.Acc0rdingt0determinat1onandanalysisof16SrDNA,thestra1nXLA03w;as?1dentifiedasBaci11us;amy1011quefaciens?Bas

5、ed0nthesing1efactorexPer1mentsandorthogona1exPeriments,an0Ptima1fe!rmentationmed?1umf0r?1tsbiomass-Pi、c?duct?1oninflaskswascomposedofmaizestarch15.0g/L,soybeanmeal50.0g/L,K2HP04?3H201.0g/L,MgS04?7H2O0.75g/L,MnSO4?H2O0.01g/L.TheoptimalfermentationconditionwasinitialpHof7.0,inocu1umsizeof1%lo

6、aded1iquidof20mL/250mL.Keywords:tobaccobacterialwilt;Baci11usamyloliquefaciens;screening;fermentationoptimization煙草青枯?。鄄≡餅榍芽评谞柺暇?Ralstoniasolanacearum)]是一種典型的維管束病害,最顯著的發(fā)病癥狀是煙草植株出現(xiàn)枯萎現(xiàn)象,危害期大多出現(xiàn)在煙草旺長期或者旺長期以后,根、莖、葉部均會受害[1,2]。經(jīng)常發(fā)病產(chǎn)煙區(qū)的老病田或早地?zé)熖飵缀趺磕甓紩l(fā)生,形成絕產(chǎn)無收和全田發(fā)病的現(xiàn)象,造成大面積煙草產(chǎn)量、品質(zhì)下降,制約著煙草產(chǎn)業(yè)的發(fā)展[3]。

7、目前防治煙草青枯病的方法主要包括化學(xué)防治、生物防治、加強(qiáng)栽培管理和選用優(yōu)質(zhì)的抗病品種[4-7],但這些方法均無法杜絕該病的發(fā)生。生產(chǎn)過程中一般以種植抗性煙草品種和輪作為基礎(chǔ),同吋加強(qiáng)大田栽培管理,通過化學(xué)藥物輔助保護(hù)的綜合防治技術(shù)控制病害發(fā)生。由于消費(fèi)者對煙草品質(zhì)的要求逐步提高,對煙草成熟期病害的防治不宜采用有殘留的化學(xué)約劑,而使用拮抗細(xì)菌防治植物病害能達(dá)到無公害防治的目的[8,9]o國內(nèi)外關(guān)于拮抗細(xì)菌防治植物青枯病的報(bào)道涉及的半防細(xì)菌主要有芽抱桿菌、假單胞菌、鏈霉菌等。其中芽鞄桿菌是一類好氧和兼性厭氧

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