斐林試劑用法再探究

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1、斐林試劑用法再探究摘要：對(duì)于還原糖的檢測(cè)和觀察這個(gè)實(shí)驗(yàn)，書(shū)上介紹了斐林試劑的使用方法，執(zhí)筆者對(duì)于該方法的單一性產(chǎn)生懷疑，根據(jù)科學(xué)探究的一般方法，探究斐林試劑的甲液、乙液的加入順序；水浴的溫度；雙縮服試劑是否能取代斐林試劑三個(gè)問(wèn)題逐一驗(yàn)證。關(guān)鍵詞：還原糖；斐林試劑；實(shí)驗(yàn)探究中圖分類(lèi)號(hào)：G632.41文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1674-9324（2013）21-0226-02一、提出問(wèn)題在還原糖的檢測(cè)和觀察這個(gè)實(shí)驗(yàn)屮，人教版高一生物必修一第18頁(yè)對(duì)檢測(cè)還原糖的試劑-斐林試劑進(jìn)行以下說(shuō)明：①斐林試劑的甲乙液等量混合均勻

2、后再注入；②將試管放入盛有50?65°C溫水的大燒杯中加熱約2分鐘⑴。在做預(yù)實(shí)驗(yàn)時(shí)，爭(zhēng)對(duì)這兩點(diǎn)產(chǎn)生了幾個(gè)疑問(wèn)：①斐林試劑是否一定要混合后才能使用？②斐林試劑是否必須在50?65°C這個(gè)溫度范圍內(nèi)才能作用，低于這個(gè)溫度可不可以？沸水可不可以？③斐林試劑（甲液：0.lg/L的NaOH溶液，乙液:0.05g/mL的CuS04溶液）和雙縮腺試劑（A液0.lg/L的NaOH溶液,B液:0.Olg/mL的CuS04溶液）的兩種成分相同，只是CuS04的濃度不同，雙縮腺試劑是否也能檢測(cè)還原糖?二、作出假設(shè)根據(jù)以上疑問(wèn)，筆者作

3、出假設(shè)：①斐林試劑一定要混合后才能使用；②斐林試劑不一定必須在50?65°C這個(gè)溫度范圍內(nèi)才能作用；③雙縮月尿試劑也能在一定程度上檢測(cè)還原糖。三、制定、實(shí)施計(jì)劃（-）實(shí)驗(yàn)材料、儀器和試劑1?選擇含糖量較高、顏色為白色或近白色的植物組織，以蘋(píng)果、梨為最好（本實(shí)驗(yàn)選擇梨作為實(shí)驗(yàn)材料）。2?儀器、試劑。（1）儀器：解剖刀，試管，試管架，試管夾，大小燒杯，小量筒，滴管，玻璃漏斗，酒精燈，三腳架，石棉網(wǎng)，火柴，研缽，石英砂，紗布。（2）試劑：①斐林試劑（甲液：0.lg/L的NaOII溶液，乙液:0.05g/mL的CuS0

4、4溶液）;②雙縮腺試劑（A液0.lg/L的NaOH溶液,B液:0.Olg/mL的CuS04溶液）。（二）設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)1?以下各組實(shí)驗(yàn)中，所用到的斐林試劑都是按照甲液0.5mL,乙液0.5mL的比例。2?設(shè)計(jì)3組實(shí)驗(yàn)并實(shí)施。對(duì)照實(shí)驗(yàn)：取一支試管標(biāo)為①加入2譏梨組織樣液，加入ImL新鮮配制的斐林試劑（甲液0.5mL,乙液0.5mL混合均勻）。第一組：取三支試管標(biāo)為②③④分別加入2譏梨組織樣液，②號(hào)試管先加甲液0.5mL搖勻后加乙液0.5mL；③號(hào)試管先加乙液0.5mL搖勻后加甲液0.5mL；④試管同時(shí)加入甲液0.5譏、

5、乙液0.5mL搖勻（甲液乙液不混合，分別加入試管，時(shí)間控制基本為同時(shí)）。同時(shí)放入50?65°C水浴加熱2min,觀察顏色變化。第二組：取四支試管標(biāo)為⑤⑥⑦⑧分別加入2mL梨組織樣液和ImL新鮮配制的斐林試劑，分別進(jìn)行水浴加熱，⑤號(hào)試管放入冷水浴，慢慢加熱至50?65°C,⑥號(hào)試管先放入50?65°C水浴然后繼續(xù)加熱，⑦號(hào)試管直接放入沸水浴，⑧號(hào)試管放入85°C的水浴。2分鐘后觀察顏色變化。第三組：取一支試管標(biāo)為⑨加入2譏梨組織樣液，加入雙縮腺試劑A液ImL搖勻后，再加入B液4滴搖勻，放入50?65°C水浴加熱2

6、分鐘，觀察顏色變化。重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)三次。四、觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出結(jié)論第一組實(shí)驗(yàn)結(jié)果：題注：A圖為第一組實(shí)驗(yàn)，三支試管依次為：對(duì)照實(shí)驗(yàn)，先甲后乙，先乙后甲。B圖為第一組實(shí)驗(yàn)，兩支試管依次為：對(duì)照實(shí)驗(yàn)，甲乙不混合同時(shí)加入。根據(jù)圖片清晰可見(jiàn)，四支試管的顏色幾乎一樣，都為磚紅色，憑肉眼根本無(wú)法區(qū)分［2］。因此第一個(gè)假設(shè)不成立，甲乙液混合與不混合差別不是很人，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中甲液、乙液的加入順序無(wú)嚴(yán)格要求［3］。第二組實(shí)驗(yàn)結(jié)果：題注：C圖為第二組實(shí)驗(yàn)，該試管直接放入冷水浴，慢慢加熱至50?65°CoD圖為第二組實(shí)驗(yàn)，該試管先放入5

7、0?65°C水浴然后繼續(xù)加熱。E圖為第二組實(shí)驗(yàn)，三支試管依次為：沸水浴，85°C水浴，對(duì)照組。從圖片C、D、E觀察可得：⑤號(hào)試管的顏色與對(duì)照組相比顏色較淺，⑥號(hào)試管與對(duì)照組接近，⑧號(hào)試管的顏色與對(duì)照組相比顏色較深，⑦號(hào)試管的顏色明顯已非磚紅色，為棕褐色偏向黑色［4］。笫二個(gè)假設(shè)的正確性仍有待驗(yàn)證，水溫過(guò)高時(shí)顏色并非磚紅色，而水溫低時(shí)也能變?yōu)榇u紅色只是顏色較淺。第三組實(shí)驗(yàn)結(jié)果：題注：F圖為第三組實(shí)驗(yàn)，兩支試管依次為：雙縮腺試劑，對(duì)照實(shí)驗(yàn)。從圖中看出雙縮月尿試劑鑒定還原糖時(shí)也能呈現(xiàn)顏色變化，變?yōu)殚冱S色，較磚紅色顏色

8、有點(diǎn)淺。所以假設(shè)三也成立。但這不是意味著兩種溶液可以混用。從兩者的作用原理出發(fā)，兩種溶液還是不能混用［5］,斐林試劑的作用機(jī)理是甲液乙液混合后生成淡藍(lán)色的Cu(0H)2沉淀，然后與還原糖在加熱作用下生成Cu20磚紅色沉淀。而雙縮月尿試劑是用來(lái)鑒定蛋白質(zhì)的，蛋白質(zhì)在堿性溶液中與銅離子(Cu2+)作用形成紫色絡(luò)合物。參考文獻(xiàn)：［1］分子與細(xì)胞［M］?北京：人民教育出版社.［2］蘇宏鑫?斐林