斐林試劑熱滴定定糖法

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1、山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告費(fèi)林試劑熱滴定定糖法xx生科四班201100140120同組者：xx【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?.初步掌握費(fèi)林試劑熱滴定定糖法的原理和方法。2.正確掌握滴定管的使用方法和熱滴定的終點(diǎn)?！緦?shí)驗(yàn)原理】1.還原糖還原糖（reducingsugar）：羰基碳（異頭碳）沒有參與形成糖苷鍵能夠還原斐林(H.vonFehling)試劑或托倫斯(B.Tollens)試劑(銀氨溶液)的糖稱為還原糖，所有的單糖（除二羥丙酮和五碳糖，即核糖和脫氧核糖），不論醛糖、酮糖都是還原糖。大部分雙糖也是還原糖，蔗糖例外。斐林試劑

2、是含Cu2+絡(luò)合物的溶液，被還原后得到磚紅色Cu2O的沉淀。托倫斯試劑被還原后（銀鏡反應(yīng)）能生成單質(zhì)銀，在試管壁上可看到“銀鏡”。分子結(jié)構(gòu)中含有還原性基團(tuán)（如游離醛基`半縮醛羥基或游離羰基）的糖，叫還原糖，如葡萄糖、果糖、麥芽糖、乳糖。一般情況下，單糖的還原能力主要來自它的醛基，如葡萄糖，而多糖則大多因?yàn)榘肟s醛羥基的存在。還原后，自己會(huì)變成糖酸。如葡萄糖就會(huì)變成葡萄糖酸。2.費(fèi)林試劑費(fèi)林試劑由氫氧化鈉的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1g/mL的溶液和硫酸銅的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05g/mL的溶液，還有酒石酸鉀鈉配制而成的

3、。它與可溶性的還原性糖(葡萄糖、果糖和麥芽糖)在加熱的條件下，能夠生成磚紅色的氧化亞銅沉淀。因此，斐林試劑常用于鑒定可溶性的還原性糖的存在與否。3.實(shí)驗(yàn)方法5山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告本實(shí)驗(yàn)采用費(fèi)林試劑熱滴定法，費(fèi)林試劑是氧化劑，由甲、乙兩種溶液組成。甲液含硫酸銅和次甲基藍(lán)(氧化還原指示劑)；乙液含氫氧化鈉，酒石酸鉀鈉和亞鐵氰化鉀。當(dāng)甲、乙兩溶液混合時(shí)，硫酸銅與氫氧化鈉反應(yīng)生成天藍(lán)色的氫氧化銅沉淀。在堿性溶液中，酒石酸鉀鈉與沉淀的氫氧化銅作用形成可溶性的絡(luò)合物?！緦?shí)驗(yàn)儀器】1.移液管(5、10毫升)2.100

4、毫升容量瓶3.水浴鍋4.鐵架臺(tái)5.膠頭滴管【實(shí)驗(yàn)材料】1.面粉2.酚酞試劑3.菲林試劑（甲、乙液）4.10%氫氧化鈉5.標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖（1mg/ml）6.6MHCl7.燒杯8.玻璃棒9.堿式滴定管10.電爐11.分析天平【實(shí)驗(yàn)操作】1.總糖的提取準(zhǔn)確稱取面粉1克，加入6mol/L鹽酸10毫升，蒸餾水15毫升，混勻。沸水浴加熱半小時(shí)后，取出幾滴水解液用碘化鉀-碘溶液檢查水解是否完全，若已經(jīng)水解完全，則不呈現(xiàn)藍(lán)色。冷卻后用10%氫氧化鈉中和至中性溶液，定容至100毫升。準(zhǔn)確吸取該溶液10ml，移入100ml

5、容量瓶內(nèi)并定容至刻度，即為測定總糖的樣品液。2.空白測定5山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告準(zhǔn)確吸取費(fèi)林甲、乙液各5ml和蒸餾水5ml放入100毫升的錐形瓶中，再用滴定管加入6ml的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液，混勻后加熱，沸騰后，記錄下滴定管的起始刻度，每滴1-2秒的速度由滴定管滴入標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液直至藍(lán)色變成黃色且在30s內(nèi)顏色又變成深紅色為止。記錄滴定完后滴定管的刻度，并同時(shí)記錄滴定所需時(shí)間。平行測定三次，直至所得的平均數(shù)與各組的差值＜0.05ml。3.總糖的測定準(zhǔn)確吸取樣品液5ml放于100ml錐形瓶內(nèi)，加入費(fèi)林甲液、乙液各5m

6、l，為使測定的時(shí)間與空白測定的時(shí)間基本一致，向錐形瓶內(nèi)加入3ml的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液，然后按測定空白同樣操作進(jìn)行滴定（控制流速，使滴定時(shí)間與空白滴定的時(shí)間基本一致），記下耗用標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖的毫升數(shù)。平行測定三次，直至所得的平均數(shù)與各組的差值＜0.05ml。2、3步中所加試劑如下表：空白滴定樣品滴定次數(shù)123平均123平均費(fèi)林甲/ml555/555/費(fèi)林乙/ml555/555/蒸餾水/ml555/////樣液/ml////555/預(yù)加葡萄糖/ml888/444/消耗葡萄糖/ml1.751.501.451.571

7、.251.301.151.235山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告【計(jì)算】樣品m=1.0025gV1=9.57V2=5.23還原糖(或總糖)%==86.58%【分析討論】1.原理分析本實(shí)驗(yàn)采用費(fèi)林試劑熱滴定法，費(fèi)林試劑由甲、乙兩種溶液組成。甲液含硫酸銅和次甲基藍(lán)(氧化還原指示劑)；乙液含氫氧化鈉，酒石酸鉀鈉和亞鐵氰化鉀。當(dāng)甲、乙兩溶液混合時(shí)，硫酸銅與氫氧化鈉反應(yīng)生成天藍(lán)色的氫氧化銅沉淀。在堿性溶液中，酒石酸鉀鈉與沉淀的氫氧化銅作用形成可溶性的絡(luò)合物。熱滴定中滴入標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液直至藍(lán)色變成黃色且在30s內(nèi)顏色又變成深紅色

8、為止，記錄下數(shù)據(jù)處理即可得面粉中的糖含量。2.步驟分析1)為使空白測定與樣品測定的時(shí)間一致，在樣品滴定之前應(yīng)提前加入一定量的葡萄糖；2)在滴定過程中，應(yīng)注意在顏色由藍(lán)色變?yōu)樽仙珪r(shí)，應(yīng)減慢滴速，當(dāng)顏色變?yōu)橥咙S色時(shí)，立即停止加入葡萄糖，顏色會(huì)再度變回紫色時(shí)，不應(yīng)再滴加葡萄糖；3)在水解面粉時(shí)應(yīng)確保面粉完全水解，即加入碘液后不再出現(xiàn)特殊的藍(lán)色，此外，水解液應(yīng)中和為中性。3.誤差分析本實(shí)驗(yàn)至少有以下幾種原因可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)誤差的出現(xiàn)：1)實(shí)驗(yàn)過程中容量瓶定容后，沒有搖勻，導(dǎo)致局部