植物組培論文(Y)

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1、蘭花的組織培養(yǎng)XX生物科學(xué)XXX指導(dǎo)教師XX學(xué)號XXXXXXXXXX摘要：組織培養(yǎng)是先進(jìn)的無性繁殖方法。取用植物器官或組織的一小部分，脫離母體而加以培養(yǎng)，經(jīng)過誘導(dǎo)和分化，使它再牛成獨(dú)立的新植株。也稱為外植體培養(yǎng)。關(guān)鍵詞：植物組織培養(yǎng)蘭花植物快速繁殖早在1902年，德國植物學(xué)家哈巴蘭特(Haberlandt)預(yù)言：“植物細(xì)胞具有全能性，每個細(xì)胞都像胚胎細(xì)胞那樣，可以經(jīng)過體外培養(yǎng)成為一個完整的植株。”在這個假說指引下，法國科學(xué)家戈第勒(Gautheret)和諾貝庫特(Nobecourt)用小塊的胡蘿卜根，于1938年成功地在試管中用培養(yǎng)基培養(yǎng)出愈傷組織。1939年，美國

2、科學(xué)家懷特(White)用煙草莖段形成層進(jìn)行組織培養(yǎng)和繼代培養(yǎng)，也獲得成功。他們的工作為植物細(xì)胞和組織培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。1949年,美國斯庫格(Skooog)等又從愈傷組織中分化出幼苗來，培養(yǎng)出了真正的試管植物。從此之后，組織培養(yǎng)的技術(shù)，不斷創(chuàng)新改進(jìn)，在實(shí)驗(yàn)上和應(yīng)用上都獲得日新月異的進(jìn)展。蘭花的莖尖組織培養(yǎng)，最早是法國人葛雷爾(Morel)在I960年獲得成功的。他利用莖尖培養(yǎng)的目的是想除去蘭屬植物上的病毒，他得到了無病毒的幼苗。他發(fā)現(xiàn)蘭屬莖尖培養(yǎng)，可逐漸增大而形成類原球莖體，與蘭花胚胎正常發(fā)育相似，經(jīng)過分割，重復(fù)培養(yǎng)可以大量增殖。按照理論計(jì)算，1個外植體在

3、1年之內(nèi)可產(chǎn)生400萬株苗之多。從此，組織培養(yǎng)技術(shù)被應(yīng)用于蘭花的繁殖，多年來形成了蘭花的工廠化、商品化的生產(chǎn)。目前，蘭花的各個部位，各個器官，即根、莖、葉、芽、花序、幼胚等都可以作為外植體進(jìn)行培養(yǎng)。組織培養(yǎng)要有必要的設(shè)備和比較高的技術(shù)措施。首先要有培養(yǎng)室、無菌接種室及各種培養(yǎng)用具、用品等。在培養(yǎng)時要先配制培養(yǎng)基，剝?nèi)⊥庵搀w，然后消毒、接種、轉(zhuǎn)移，最后試管苗移植等，都需要比較復(fù)雜和細(xì)致的技術(shù)?，F(xiàn)將組織培養(yǎng)的方法簡介如下。1培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基是用各種不同成分和劑量的元素，加上各種維生素、激素等制成。蘭花種類不同，培養(yǎng)基的成分也有所不同。大多數(shù)的培養(yǎng)基是用固體或半固體的，

4、也有用液體培養(yǎng)的，在液體中培養(yǎng)則需特殊的通氣方法，如常用的離心機(jī)或轉(zhuǎn)動機(jī),不停地將培養(yǎng)基轉(zhuǎn)動。培養(yǎng)基須包拾礦物質(zhì)、糖、維生素及生長激素。在實(shí)際中用得最多的是MS培養(yǎng)基，或在此基礎(chǔ)上加添少數(shù)激素。MS培養(yǎng)基(MurashigeandSkoogbasicmedium)的成分如下：成分用量(mg)NH4N03硝酸鞍400Ca(N03)2?4H20硝酸鈣144KN03硝酸鉀80KH2P04磷酸二氫鉀125MgS04*7H20硫酸鎂72KCL氯化鉀65NaFe—EDTA螫合鐵25H3B03硼酸16MnS04>4H20硫酸猛65ZnS04?7H20硫酸鋅27KI碘化鉀0.75I

5、AA卩引跺乙酸2Kinetin激動素0.04-0.Thiamin維生索Bl0.1Nicotinicacid煙酸0.50.52100100000.021000mlPyridoxine維生素B6Glycine甘氯酸Myo—inositol肌醇Casein一hydrolysate水解酪蛋白Sugar蔗糖蒸憾水PH值為5.0-6.0配制培養(yǎng)基要在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行，各種用具、玻璃瓶或試管，都要嚴(yán)格消毒殺菌。最后配成的培養(yǎng)液注入玻璃瓶或試管內(nèi)，再進(jìn)行消毒，冷卻后接入蘭花外植體。接種工作應(yīng)在無菌接種室或超凈工作臺上完成。2接種方法2.1釆取莖尖蘭屬植物的組織培養(yǎng)以莖尖為最常用的材料。

6、莖尖是分生組織最為活躍的生長點(diǎn)。選擇健壯植株，將外層的葉和鞘葉剝?nèi)?，把整個莖尖切下，浸入2.5%的漂白粉溶液或7%的次氯酸鈉溶液中15—20分鐘。然后取出用蒸館水沖洗5-6次，將消毒液沖洗十凈。在顯微鏡或擴(kuò)大鏡下將莖尖的生長點(diǎn)挑出，并即刻接種到玻璃管培養(yǎng)基上。2.2培養(yǎng)原球體生長點(diǎn)一般經(jīng)過4-6周的培養(yǎng)，產(chǎn)生出小而圓的原球體。將原球體取出，重新分切，1分為4,再入培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)，經(jīng)1—2個月又可長出原球體。同樣，再行分割；重新培養(yǎng)。在兒個月之內(nèi)，就會獲得大量的原球體。2.3分化培養(yǎng)把切割的原球體放在液體培養(yǎng)基中，放在旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)床上進(jìn)行旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)。當(dāng)其小塊組織稍為長大后，轉(zhuǎn)

7、接在分化的培養(yǎng)基上，讓它分化根和芽。2.4試管苗移植當(dāng)原球體組織分化根和芽，逐漸長大之后，就成為幼小植株。經(jīng)一段培養(yǎng)，生長到一定程度就應(yīng)該從玻璃瓶或試管中取出，移植到土壤或基質(zhì)中了。移出試管后，用口來水將根上的培養(yǎng)基輕輕沖洗干凈。栽培基質(zhì)一般用水苔或蛭石。栽植后移入溫室內(nèi)培養(yǎng)。在組織培養(yǎng)中要經(jīng)過兩個關(guān)：第一個關(guān)是分化培養(yǎng)基的生長激素和劑量，能否分化根和芽，完全取決于它。用什么激素和什么劑量，每種蘭花都不一樣，要經(jīng)過摸索試驗(yàn)才能掌握。可以設(shè)計(jì)幾種配方，進(jìn)行對比實(shí)驗(yàn)來確定。第二個關(guān)是試管苗移出瓶后，往往不適應(yīng)外界環(huán)境而大批死亡。要創(chuàng)造良好條件，在精心管理之下，才能獲