植物組培復(fù)習(xí)總結(jié)

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1、第一章植物細(xì)胞組培：在離體條件下利用人工培養(yǎng)基對(duì)植物器官、組織、細(xì)胞原生質(zhì)體等進(jìn)行培養(yǎng)，使其長(zhǎng)成完整株體。類(lèi)型1器官培養(yǎng)2莖尖分生組織培養(yǎng)3愈傷組織培養(yǎng)4細(xì)胞培養(yǎng)5原生質(zhì)體培養(yǎng)植物組培特點(diǎn):1培養(yǎng)條件可認(rèn)為控制2生長(zhǎng)周期短，繁殖率高3管理方便，利用工廠(chǎng)化生產(chǎn)和自動(dòng)化控制植物細(xì)胞全能性：每個(gè)植物體細(xì)胞或性細(xì)胞都具有該植物的全套遺傳基因，因此在一定條件下培養(yǎng)都可發(fā)育成一個(gè)與母體一樣的植株。植物細(xì)胞變現(xiàn)全能性必須經(jīng)過(guò)的步驟:成熟細(xì)胞——分生細(xì)胞——胚狀體——完整植株成熟細(xì)胞——愈傷組織——出根出芽——完整植株愈傷組織:原本指植物受傷后在表面形成的一團(tuán)薄壁細(xì)胞。植物組培中特指人工培養(yǎng)基

2、上形成的無(wú)數(shù)生長(zhǎng)的薄壁細(xì)胞。脫分化：已經(jīng)完全分化定型的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)成為重新恢復(fù)分裂能力的細(xì)胞的過(guò)程。誘導(dǎo)細(xì)胞脫分化是處于抑制的，需要外接條件刺激，在各條件中，激素起重要作用。4類(lèi)植物1有些植物只需生長(zhǎng)素——IAA吲哚乙酸NAA萘乙酸2,4-D如菊苣2有些僅需細(xì)胞激動(dòng)素蘿卜大豆3須加細(xì)胞激動(dòng)素和生長(zhǎng)素?zé)煵莺}卜馬鈴薯4不需加任何激素?zé)煵萦鷤M織再分化：植物成熟細(xì)胞經(jīng)過(guò)脫分化后（形成愈傷組織后），由愈傷組織再形成完整植株的過(guò)程。植物組培過(guò)程取組織——形成愈傷組織——幼胚——植物幼體——成熟植株脫分化再分化*以高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性植物組培動(dòng)物組培原理植物細(xì)胞全能性

3、細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分蔗糖、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑葡萄糖、動(dòng)物血清培養(yǎng)結(jié)果植物植株細(xì)胞系、細(xì)胞株培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無(wú)病毒植株等獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌物植物組培發(fā)展簡(jiǎn)史探索階段施萊登施旺創(chuàng)立細(xì)胞學(xué)說(shuō)提出理念細(xì)胞學(xué)說(shuō)要點(diǎn)1動(dòng)植物均由細(xì)胞組成2所有細(xì)胞來(lái)自其他細(xì)胞3卵和精子是細(xì)胞4單個(gè)細(xì)胞可分裂形成組織5細(xì)胞遺傳全能性；組培技術(shù)哈勃蘭特成功培育出植物提供理論基礎(chǔ)奠基階段懷特配制出培養(yǎng)基認(rèn)識(shí)到維生素和植株激素在植物組培中的重要作用崔徵用不同種類(lèi)和比例植物激素處理離體培養(yǎng)的煙草莖段和髓發(fā)現(xiàn)腺嘌呤和生長(zhǎng)素的比例是控制芽和根形成的主要條件之一斯圖爾特證實(shí)哈波蘭特50年前

4、理論正確性快速發(fā)展階段MS培養(yǎng)基PEG原生質(zhì)體融合法植物遺傳轉(zhuǎn)化體細(xì)胞無(wú)性系變異人工種子植物組培應(yīng)用1增加遺傳變異性，改良作物2繁殖植物無(wú)性系：組培中從一個(gè)單細(xì)胞、一塊愈傷組織、一個(gè)芽等器官都可獲得無(wú)性系。無(wú)性系就是用植物體細(xì)胞繁殖所得的后代。植物組培的無(wú)性系5種原球莖經(jīng)原球莖形成植物蘭花愈傷發(fā)生型細(xì)胞或愈傷組織通過(guò)不定芽形成植株煙草愈傷組織胚狀體發(fā)生型細(xì)胞或愈傷組織通過(guò)胚狀體胡蘿卜體細(xì)胞培養(yǎng)器官型離體莖花芽等直接產(chǎn)生小植株百合無(wú)菌短枝扦插腋芽，連同短枝經(jīng)滅菌后在無(wú)菌條件下培養(yǎng)，使其生根3有用化合物的工業(yè)化生產(chǎn)培養(yǎng)物低溫貯藏和種質(zhì)庫(kù)的建立生物科學(xué)的發(fā)展三大成就生苦克隆技術(shù)基因工

5、程干細(xì)胞技術(shù)植物基因工程技術(shù)發(fā)展對(duì)植物育種影響核心DNA重組技術(shù)T-DNA轉(zhuǎn)化原理植物細(xì)胞全能性通過(guò)揭示T-DNA轉(zhuǎn)化原理，改造Ti質(zhì)粒并構(gòu)建植物表達(dá)載體系統(tǒng)，誘導(dǎo)轉(zhuǎn)基因細(xì)胞分化。發(fā)展最快領(lǐng)域?？寺V義一個(gè)細(xì)胞個(gè)體無(wú)性繁殖產(chǎn)生的后代基因克隆是指基于大腸埃希菌的DNA片段（或基因）的擴(kuò)增過(guò)程目標(biāo)DNA的獲得、重組載體的構(gòu)建、受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)化以及重組細(xì)胞的篩選和繁殖植物遺傳轉(zhuǎn)化：將外源基因轉(zhuǎn)移到植物體內(nèi)穩(wěn)定的整合、表達(dá)與遺傳的過(guò)程先決條件建立穩(wěn)定高效的轉(zhuǎn)化體系主要方法農(nóng)桿菌法基因槍法花粉管通道法顯微注射法電擊法聚乙二醇法基因組學(xué)：最早指基因組作圖和測(cè)序。后來(lái)經(jīng)發(fā)展科學(xué)家定義為研究生物

6、基因組的結(jié)構(gòu)和功能的科學(xué)。分為結(jié)構(gòu)基因組學(xué)和功能基因組學(xué)兩大部分。DNA分子標(biāo)記直接分子水平檢測(cè)DNA差異DNA水平上遺傳變異的直接反應(yīng)現(xiàn)在有數(shù)十種對(duì)植物育種影響篩選分子標(biāo)記，構(gòu)建分子標(biāo)記遺傳圖普，為植物育種，特別是數(shù)量性狀遺傳育種提供參考第二章基本設(shè)備：超凈工作臺(tái)植物組培用具培養(yǎng)基配置用具——燒杯容量瓶量筒移液器培養(yǎng)用具——試管三角瓶培養(yǎng)皿封口膜接種用具——酒精燈鑷子噴霧器解剖刀用具洗滌——洗滌劑酸洗轉(zhuǎn)基因廢棄物必須滅菌用具滅菌——干熱滅菌酒精灼燒過(guò)濾0.2um小型器具——分注器血球計(jì)數(shù)器移液器過(guò)濾滅菌器常用儀器——酸度計(jì)天平磁力攪拌器高壓蒸鍋滅菌器干燥滅菌箱離心機(jī)電冰箱搖床

7、培養(yǎng)箱顯微鏡培養(yǎng)室潔凈培養(yǎng)架植物生長(zhǎng)專(zhuān)用燈25℃70%-80%濕度培養(yǎng)室和接種室滅菌2%新杰爾敏擦洗75%乙醇噴霧UV照射20MIN（紫外）器皿和接種工具滅菌解剖刀鑷子剪刀等采用干熱滅菌法烘箱滅菌120℃1H外植體滅菌原則：充分滅菌不損傷外植體不同外植體滅菌要求不一樣常用方法75%乙醇（無(wú)毒濕潤(rùn)植物）氯化汞（有殘毒）次氯酸鈉（無(wú)害）培養(yǎng)基滅菌方法高溫高壓蒸汽滅菌過(guò)濾滅菌植物組織培養(yǎng)基主要成分：水無(wú)機(jī)成分大量元素NPKCa（平衡體內(nèi)離子）MgS微量元素鐵硼猛鋅銅鉬鈷氯有機(jī)物質(zhì)硫胺素VB1鹽酸吡