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《高效油脂降解菌的篩選及其降解影響因素的初步研究_金建云》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、DOI牶牨牥牣牨牫牫牥牥牤j牣cnki牣hnlkxb牣牪牥牥牰牣牥牬牣牥牨牭第25卷第4期華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)Vol.25No.42006年8月JournalofHuazhongAgriculturalUniversityAug.2006,400～403文章編號(hào)1000-2421(2006)04-0400-04高效油脂降解菌的篩選及其降解*影響因素的初步研究1,2)2)1,2,3)**金建云李芳林開春1)2)(華中農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科技學(xué)院,武漢430070;武漢天惠生物工程有限公司,武漢430070;3
2、)武漢綠世紀(jì)生物工程有限責(zé)任公司,武漢430070)摘要以豆油作為唯一碳源,經(jīng)過2個(gè)月馴化后篩選獲得具有高效油脂降解能力的細(xì)菌1株,編號(hào)為S16,經(jīng)鑒定為芽孢桿菌。對(duì)影響S16降解能力的幾個(gè)因素進(jìn)行了初步研究,結(jié)果表明,在初始pH為7.0,初始含油量為400mg/mL,搖床轉(zhuǎn)速為200r/min,培養(yǎng)溫度30℃條件下,該菌株生長(zhǎng)旺盛,發(fā)酵72h后對(duì)豆油的降解率可以達(dá)到73.5%。關(guān)鍵詞油脂;油脂降解菌;降解率;影響因素中圖法分類號(hào)Q939.9文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A當(dāng)代人類面臨兩大難題,一是環(huán)境問題,二是能
3、1材料與方法源危機(jī)。隨著人們生活水平的不斷提高,含油脂的垃圾產(chǎn)量呈現(xiàn)出直線上升的趨勢(shì),單從環(huán)境的觀點(diǎn)1.1樣品來源看,它們是一種污染,但是從資源的觀點(diǎn)看,它們又采自華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)生食堂下水道口以及校門是一種可再生的寶貴資源:這些垃圾是油脂含量很口大排檔案下水道口。高的廢棄物,若能將其處理收集起來,它們又是很好1.2實(shí)驗(yàn)儀器[1,2]的生物柴油生產(chǎn)原料。然而,油脂相對(duì)于淀粉、AY220型電子天平;HQL150B恒溫冷凍搖床;蛋白等有機(jī)質(zhì)要難于降解,酶法制備生物柴油必須XS-18型光學(xué)顯微鏡;SKP
4、-01型紫外分光光度計(jì);獲得活性較高的脂肪酶,因此,篩選出高效的油脂降RE52-98旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器等。解菌,無論是對(duì)環(huán)境治理,還是對(duì)酶法生產(chǎn)生物柴1.3培養(yǎng)基油,都有著重要的意義。能夠降解油脂的微生物在斜面培養(yǎng)基(g/L):NaCl5,蛋白胨10.0,牛肉自然界中廣泛存在,各類微生物對(duì)油脂的降解能力膏5,pH7.2～7.4,用水定容至1000mL;不盡相同,這主要依賴于微生物群落的種屬組成,大富集培養(yǎng)液(g/L):NaCl0.5,蛋白胨5.0,牛肉量的研究都集中在混合菌株的降解作用研究上,而膏0.5
5、,豆油4mL,pH7.2～7.4,用水定容至[3]1000mL;對(duì)單一菌株降解油脂的研究很少。目前,日本、歐美一些發(fā)達(dá)國(guó)家已將油脂降解菌應(yīng)用到生物垃圾降分離培養(yǎng)基(g/L):NaCl5.0,KH2PO40.3,解、含油廢水的處理、洗滌用酶和生物柴油的生產(chǎn)等MgSO47H2O0.1,K2HPO41.5,(NH4)2SO4多項(xiàng)領(lǐng)域,而我國(guó)對(duì)于這些方面的應(yīng)用尚處于初步1.0,瓊脂17～20,Tween8020mL,pH7.2～7.4,探索階段。本研究以日常食用豆油為限制性碳源,用水定容至1000mL;
6、經(jīng)過對(duì)微生物群體的長(zhǎng)期馴化后,獲得1株高效油復(fù)篩培養(yǎng)液(g/L):蛋白胨1.0,NH4NO40.2,脂降解菌并對(duì)影響其降解能力的因素進(jìn)行了初步研K2HPO40.5,KH2PO40.5,MgSO47H2O0.1,豆究。油0.4mL,pH7.2～7.4,用水定容至1000mL。收稿日期:2005-12-21*國(guó)家"十五"攻關(guān)項(xiàng)目(2001BA50918)資助**通訊作者金建云,男,1979年生,華中農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科技學(xué)院碩士研究生,武漢430070第4期金建云等:高效油脂降解菌的篩選及其降解影響因素的
7、初步研究4011.4馴化方法原試驗(yàn)、產(chǎn)生吲哚試驗(yàn)、甘油產(chǎn)生二羥基丙酮試驗(yàn)以將采集的樣品充分混合,取5g加入裝有45及菌株生長(zhǎng)條件耐性試驗(yàn)。利用文獻(xiàn)[6]進(jìn)行檢索。mL無菌水和無菌玻璃珠的150mL三角瓶?jī)?nèi),置于1.9入選菌株影響降解油脂能力的因素研究搖床上,200r/min轉(zhuǎn)速充分振蕩10min,然后取5將入選菌株在肉湯培養(yǎng)液中培養(yǎng)24h后,按mL稀釋加入35mL富集培養(yǎng)液中,并在40℃,2002%的量接種(培養(yǎng)液營(yíng)養(yǎng)成分參照復(fù)篩培養(yǎng)液),初r/min,pH7.0條件下培養(yǎng)。以后每天觀察,如果發(fā)
8、始含油量為400mg/L,發(fā)酵溫度40℃,搖床轉(zhuǎn)速現(xiàn)油脂降解得好,就補(bǔ)加少量豆油。每4d轉(zhuǎn)接10200r/min,培養(yǎng)72h,分別進(jìn)行以下幾組處理測(cè)定mL培養(yǎng)物至30mL新的培養(yǎng)基中,以促進(jìn)油脂分降解率的變化:(1)將初始pH值分別設(shè)為4.0,解菌的生長(zhǎng)。此馴化過程持續(xù)2個(gè)月。5.0,6.0,7.0,8.0,9.0,10.0,測(cè)試各自在發(fā)酵72h1.5油脂分解菌的初篩后降解率的變化;(2)每6h檢測(cè)1次,測(cè)試不同初將分離得到的菌株點(diǎn)接到初篩培養(yǎng)基平板上,始pH值條件下培養(yǎng)液pH值的變化趨勢(shì)以及降
