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《榨菜低鹽腌制體系中優(yōu)勢種群的分子鑒定及分析【開題報告+文獻綜述+畢業(yè)論文】》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、畢業(yè)論文開題報告生物工程榨菜低鹽腌制體系中優(yōu)勢種群的分子鑒定及分析一、選題的背景與意義蔬菜的腌制加工，在我國已有悠久的歷史,但是傳統(tǒng)的蔬菜腌制工藝均采用高鹽進行腌制。成品鹽度太高，而食用過多的食鹽對人體某些器官會造成永久性損壞。因此，我國人民對高鹽腌制食品也越來越不歡迎。低鹽腌制蔬菜因其可以保持蔬菜原有的營養(yǎng)成分以及有益人體健康而受到越來越多的消費者的喜愛，并在迅速占領市場。在低鹽條件下勢必引起各種微生物的生長，因此，在此條件下使腌制保藏過程正?；倪^程是一個十分復雜的微生物學發(fā)酵過程，同時伴隨著復雜的生物化學變化和物理變化。目前,我國各種蔬菜腌制品的發(fā)酵,都是借助于
2、天然附著在蔬菜表面上的微生物的作用來進行的。據測定,蔬菜收獲后表面所含的微生物不僅種類多,而且數量大,但有益菌一般數量都較低。本研究采用的SSCP方法體現了一種快速、簡易的研究微生物群落結構的方法，但是測序列較短，個別可能只確定屬、科分類地位，無法精確地鑒定到種，所以結合16SrDNA/rRNA的序列分析來進一步進行研究。我們從環(huán)境微生物樣品中提取出rRNA或總DNA后，利用PCR擴增、和DNA測序等技術分析微生物樣品的16SrDNA，從而對環(huán)境微生物進行檢測，或對其進行分類、定位。rDNA或rRNA序列既具有保守性,又具有高變性,是目前細菌分類和鑒定經常使用的一種檢
3、測方法。本研究采用分子檢測的方法和傳統(tǒng)微生物學方法相結合，總結出蔬菜腌制體系中的特征微生物。根據已有的實驗基礎進一步系統(tǒng)地研究主要微生物對風味的形成、和營養(yǎng)作用等，從而揭示腌制體系得到優(yōu)良產品的重要微生物的貢獻。二、研究的基本內容與擬解決的主要問題：研究內容：（1）蔬菜腌制過程中微生物含量和發(fā)酵液pH的測定關鍵時間點分別取蔬菜腌制液，測出發(fā)酵液中所含微生物的總量和乳酸菌的數量，并測定蔬菜腌制液的pH。（2）蔬菜腌制過程中優(yōu)勢菌系的分子分析關鍵時間點分別取蔬菜腌制液，采用16SrDNA建立該腌制體系的基因文庫并且與單鏈構象多態(tài)性(PCR-SSCP)方法、傳統(tǒng)的分離鑒定方
4、法進行比較分析，總結出腌制樣品中的特征微生物。擬解決的關鍵問題：16SrDNA克隆文庫的構建。三、研究的方法與技術路線：1技術路線：腌制蔬菜預處理成品取樣測定、分析總菌數、乳酸菌數16SrDNA序列測定腌制液pH測定2主要方法：（1）、選取當季蔬菜，稱量裝壇，進行腌制（2）、根據微生物的關鍵時間點取不同鹽濃度樣，分別進行微生物總數、乳酸菌數和腌制液pH的測定，總結出腌制品質比較優(yōu)良的鹽濃度。（３）根據最佳鹽濃度腌制菜，進行分子檢測，總結出蔬菜腌制體系中的優(yōu)勢群落。（４）針對優(yōu)勢菌群進行相關的功能分析。四、研究的總體安排與進度：2010年11月初—2010年11月底：實
5、驗前的準備工作：查找資料，撰寫開題報告；準備實驗；2010年11月中旬—2010年12月底根據季節(jié)腌制當季蔬菜，測定發(fā)酵過程中總菌數，確定關鍵時間點并取樣，提取并優(yōu)化提取樣品中細菌總DNA的方法。2011年3月中旬—2011年4月底：采用細菌擴增通用引物27F和1492R進行PCR擴增與擴增產物鑒定和純化，DNA序列測定與分析；2011年5月初：整理試驗結果，論文初稿和校對。五、主要參考文獻：[1]陳意音，食品科學．94(5)：18—22[2]李雄輝.蔬菜低鹽腌制過程中的酸度變化及控制[J].中國調味品,1995,6:11-13.[3]王巖,沈錫權,吳祖芳.PCR-S
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