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《大黃魚肌鈣蛋白基因克隆及序列特征【開題報(bào)告】》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、畢業(yè)論文開題報(bào)告生物技術(shù)大黃魚肌鈣蛋白基因克隆及序列特征一、選題的背景與意義:大黃魚(Pseudosciaenacrocea)俗稱黃花魚,為暖溫性近海經(jīng)濟(jì)魚類,通常生活在近海區(qū)域的中上水層,有結(jié)群涸游習(xí)性,在我國黃海東海及南海海區(qū)都有分布,曾被視為我國海洋捕撈的“當(dāng)家魚”。國內(nèi)外都有許多大黃魚的相關(guān)研究報(bào)道,大黃魚經(jīng)濟(jì)價值較高,肉質(zhì)細(xì)嫩,營養(yǎng)豐,0.1公斤魚肉含蛋白質(zhì)17.6克,還含有脂肪、糖類、鈣、磷、鐵、維生素等多種營養(yǎng)成分,具有很高藥用與食療功效,特別是其鰾具有大補(bǔ)氣血的功能,凡血?dú)馓潛p者均可食用,對治療肺結(jié)核、再生障礙性貧血等癥都有較的效果。另據(jù)臨床報(bào)導(dǎo)其魚鰾用香油炸
2、酥后,壓碎吞服治療食道癌、血癌,有一定療效。因此大黃魚在國內(nèi)外頗受歡迎,養(yǎng)殖大黃魚效益較好,是農(nóng)業(yè)部2008年主要推薦的養(yǎng)殖品種之一。肌鈣蛋白(troponin)是肌肉的主要調(diào)節(jié)蛋白質(zhì),直接參與鈣所控制的肌肉收縮。它占肌原纖維蛋白的5%。由肌鈣蛋白T(TnT)、肌鈣蛋白I(TnI)及肌鈣蛋白C(TnC)三種亞單位組成,這三種成分之間存在著鈣依賴性的相互作用,三者結(jié)合通過鈣控制肌肉的收縮。近幾年來,隨著對肌鈣蛋白研究的深入,檢測肌鈣蛋白的方法及試劑廣泛地應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室,因此它的應(yīng)用范圍越來越廣泛,作用更加突出越來越受重視,所以肌鈣蛋白分子生物學(xué)研究具有重要的臨床意義。近年來,大黃
3、魚養(yǎng)殖的產(chǎn)量和品質(zhì)都有下降的現(xiàn)象,遺傳育種及遺傳多樣性方面的研究結(jié)果表明長期人工繁殖育種的動物會產(chǎn)生養(yǎng)殖品系的遺傳退化,引起某些基因丟失而導(dǎo)致其優(yōu)良經(jīng)濟(jì)性狀衰退。所以,通過現(xiàn)代生物學(xué)方法改良大黃魚的遺傳背景,提高大黃魚的抗病害能力以及肉質(zhì),以達(dá)到高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的效果,是人們正在著力研究的課題。近年來,人們發(fā)現(xiàn)肌鈣蛋白在魚類肌肉中有重要的作用。因此,研究大黃魚的肌鈣蛋白基因,有可能為大黃魚的育種開辟一條新的途徑,為大黃魚肌鈣蛋白的研究積累基礎(chǔ)資料,并促進(jìn)大黃魚養(yǎng)殖的發(fā)展。同時通過大黃魚肌鈣蛋白基因的提取和分析,可為以后制備出核酸探針、篩選和克隆出一批具有優(yōu)良性狀的基因、構(gòu)建基因文庫等
4、研究工作奠定基礎(chǔ)。二、研究的基本內(nèi)容:(1)隨機(jī)測序大黃魚肌肉組織cDNA全長文庫的克隆菌,通過若干次EST測序,測通肌鈣蛋白的cDNA,得到大黃魚肌鈣蛋白cDNA序列;(2)對大黃魚肌鈣蛋白基因進(jìn)行序列同源性分析;(3)進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化樹分析。擬解決的主要問題:(1)獲得肌鈣蛋白基因的序列;(2)大黃魚肌鈣蛋白與其他生物的肌鈣蛋白基因比較有何特點(diǎn)。研究的方法與技術(shù)路線:cDNA全長文庫培養(yǎng)提取質(zhì)粒隨機(jī)測序cDNA文庫BLAST查詢獲得Tn基因的EST引物設(shè)計(jì)測通Tn基因cDNA全長序列分析序列同源性分析進(jìn)化樹分析三、研究的總體安排與進(jìn)度:2010年10月到2010年11月:查閱
5、文獻(xiàn)資料,準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中要用的材料和儀器。2010年12月到2011年2月:相關(guān)文獻(xiàn)綜述、進(jìn)行實(shí)驗(yàn)和外文文獻(xiàn)的翻譯。2011年3月到2011年4月:完成畢業(yè)論文。2011年5月:準(zhǔn)備畢業(yè)論文答辯。四、主要參考文獻(xiàn):[1]FarahCS,ReinaehFC.Thetroponincomplexandregulationofmusclecontraction.FASEBJ,1995,9:755.[2]CalvertMJ,WardDG,TrayerHR,TrayerIP.Theimportanceofthecarboxyl-terminaldomainofcardiactroponin
6、CinCa2+-sensitivemuscleRegulation[J].BiolChem,2000,275(42):32.[3]王慧,徐霞.心肌肌鈣蛋白的研究進(jìn)展[J].中華今日醫(yī)學(xué)雜志,2004,4(2):86.[4]AdamasJE,BedorGS,Davila-RomanVG,eta1.CardiactroponinI:amarkerwithhighspecificityforcardiacinjury[J].AmCoilCardiol.1996:12.[5]門衛(wèi)東,馬建智.心肌肌鈣蛋白的研究進(jìn)展及臨床應(yīng)用[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生,2008,46(13):40.[6]Ap
7、pleFS.TissuespecificityofcardiactroponinI,cardiactroponinTandcreatinekinase-MB[J].ClinChimActa,1999.284(2):l5l-l59.[7]BabuinL,JaffeAS,Troponin:thebiomarkerofchoiceforthedetectionofcardicinju[J].CMAJ,2005,173(10):119-120.[8]王曉陽,胡艷東,史玲玲.心肌肌鈣蛋白應(yīng)用的研究[J].醫(yī)學(xué)綜述