液相色譜柱維護(hù)保養(yǎng)及儀器沖洗

《液相色譜柱維護(hù)保養(yǎng)及儀器沖洗》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。

1、液相色譜柱維護(hù)保養(yǎng)及儀器沖洗注意：每個(gè)色譜柱使用之前都要閱讀一下使用說明書。色譜柱維護(hù)保養(yǎng)是很重要的，關(guān)系到色譜柱的使用壽命和檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，所以任何人用過色譜柱之后，一定要對(duì)色譜柱進(jìn)行保養(yǎng)，管理人員和使用者互相監(jiān)督?？偟脑瓌t是色譜柱要輕拿輕放，避免損壞填料；另外沒有使用的情況下，一定要保證兩端的堵頭封好。對(duì)于具體的色譜柱，下面列出常用色譜柱維護(hù)保養(yǎng)的具體方法和注意事項(xiàng)，以便使用者參考。C18柱（包括預(yù)柱）對(duì)于未啟用的新的色譜柱，先用甲醇或乙腈以小流速（0.2ml/min緩慢升高到0.5ml/min）不接檢測器沖洗色譜柱30分鐘后，將色譜柱與檢測器連上，流

2、速調(diào)為1.0ml/min沖洗色譜柱60分鐘，然后不斷降低有機(jī)相的比例（如80%、50%、10%甲醇或乙腈）各沖洗至少30分鐘。若色譜柱暫時(shí)不用，則將色譜柱保存在高比例有機(jī)相中（如80%甲醇或乙腈，或者參考該色譜柱使用說明書中建議的溶劑中）；色譜柱使用時(shí)應(yīng)用與分析流動(dòng)相相同比例的有機(jī)溶劑（將緩沖鹽溶液換成水）沖洗色譜柱15分鐘，然后再換成流動(dòng)相進(jìn)行樣品分析。樣品分析完后，色譜柱維護(hù)與保養(yǎng)方法：流動(dòng)相中若含酸、堿、鹽類物質(zhì)，則要先用10%甲醇或乙腈沖洗，1.0ml/min的流速?zèng)_洗至少30min，再用80%甲醇或乙腈沖洗至少30min，柱子保存在80%甲醇或乙腈

3、里（具體問題具體分析，洗脫程序可以是梯度洗脫程序，注意如果最后色譜柱保存的是高有機(jī)相，第二天用之前一定要用高水相過渡一下，再換成流動(dòng)相）。如柱子長時(shí)間未用，則柱子保存在100%的甲醇或乙腈里。對(duì)于含有離子對(duì)試劑的流動(dòng)相如庚烷磺酸鈉和十二烷基磺酸鈉等，柱子應(yīng)采用梯度洗脫，一般用乙腈-水系統(tǒng)（水：90-10；乙腈：10-90）沖洗時(shí)間要稍長些，然后保存于90%乙腈。需要特別強(qiáng)調(diào)的是，目前所有的C18柱均不能用純水進(jìn)行長時(shí)間（1小時(shí)以上）沖洗，除非有專門耐水的專用柱，否則，用純水長時(shí)間沖洗色譜柱，會(huì)導(dǎo)致色譜柱的固定相流失和相塌陷，損壞色譜柱。精選范本,供參考！大多

4、數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2~8，有的pH穩(wěn)定范圍會(huì)寬，具體pH穩(wěn)定范圍參照色譜柱說明書，當(dāng)分析條件的pH值偏小或偏大時(shí)，可選擇pH穩(wěn)定范圍寬的柱子進(jìn)行分析，否則，會(huì)損壞色譜柱。在每次進(jìn)行樣品分析時(shí)，要保證流動(dòng)相（包括鹽、緩沖鹽、酸等）與色譜系統(tǒng)及柱內(nèi)的保存液要互溶，如不能互溶，則需要用一定比例的有機(jī)溶劑（不低于10%）或與分析流動(dòng)相相當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑對(duì)柱子進(jìn)行過渡，否則，流動(dòng)相中的鹽會(huì)在系統(tǒng)與柱內(nèi)析出，影響樣品分析或損壞柱子。硅膠柱、正相手性色譜柱【包括AS-H、AD-H、OD-H系列，5DMB、5TBB系列，OA系列（如OA-3100、OA-3300）】對(duì)

5、于未啟用的新的色譜柱，在保證系統(tǒng)是正相的情況下，可先用異丙醇小流速（流速為0.1~0.3ml/min）沖洗色譜柱約15分鐘，然后換上正相流動(dòng)相平衡進(jìn)行色譜分析。硅膠柱及正相手性柱不能過水相（對(duì)于sepax系列的硅膠柱，可以過低比例的水相（有機(jī)相不低于50%）），接上色譜柱之前要保證液相色譜系統(tǒng)中的所有管路為正相流動(dòng)相【如是不含鹽的反相溶液（如水/乙腈；水/甲醇），先用異丙醇沖洗所有管路，然后用正相流動(dòng)相沖洗所有管路，最后再接上色譜柱；若反相流動(dòng)相中含有緩沖鹽（如緩沖鹽/乙腈；緩沖鹽/甲醇），先用純水沖洗HPLC系統(tǒng)，然后用異丙醇沖洗所有管路，最后用正相流動(dòng)相

6、沖洗，再接上色譜柱?！渴褂媒Y(jié)束后，先用異丙醇沖洗色譜系統(tǒng)與色譜柱，再用色譜級(jí)的正己烷沖洗色譜柱，（或者直接用正己烷－異丙醇（90：10）沖洗，并保存在正己烷－異丙醇（90：10）中）。如長時(shí)間未用，則保存在正己烷中。需要特別強(qiáng)調(diào)的是，沖洗硅膠柱時(shí)，不能用純水或含水的有機(jī)溶劑或緩沖鹽體系沖洗色譜柱，只能用純有機(jī)溶劑沖洗色譜柱（對(duì)于sepax系列的硅膠柱可以用不低于50%有機(jī)相沖洗色譜柱），最后保存在純的有機(jī)溶劑中。在進(jìn)行樣品分析前，一定要保證流動(dòng)相與色譜系統(tǒng)及色譜柱柱內(nèi)的保存液要互溶，如不互溶，則需要用異丙醇過度，否則，會(huì)影響色譜系統(tǒng)與損壞柱子。反相手性色譜柱

7、（如：CHIRALCELOZ-3R）：同C18柱陰離子柱和陽離子柱：目前常見的陰子柱有watersIC-PakTM精選范本,供參考！anion，陽離子柱有磺酸基陽離子柱與waters陽離子交換柱（鈣型）。對(duì)于watersIC-PakTManion和waters陽離子交換柱（鈣型），新柱子使用前用高純水小流速（0.2ml/min緩慢升高到0.5ml/min）沖洗約30分鐘，然后再換成流動(dòng)相平衡色譜柱。在沖洗色譜柱之前，要保證整個(gè)色譜系統(tǒng)為純水相。對(duì)于磺酸基陽離子柱（含有硅膠基柱的），使用前用甲醇或乙腈小流速?zèng)_洗30分鐘，然后高純水替換系統(tǒng)沖洗，然后接上色譜柱。

8、分析完樣品后，對(duì)于watersIC-PakTMani