食品中柑橘紅2號的測定 （BJS 201912）.doc

《食品中柑橘紅2號的測定 （BJS 201912）.doc》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。

1、附件1食品中柑橘紅2號的測定BJS2019121范圍本方法規(guī)定了柑橘類水果、果醬、蜜餞、果汁飲料、辣椒油、辣椒醬、火鍋底料、肉制品中柑橘紅2號的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定方法。本方法適用于柑橘類水果、果醬、蜜餞、果汁飲料、辣椒油、辣椒醬、火鍋底料、肉制品中柑橘紅2號的測定。2原理試樣用乙腈提取后，經(jīng)氨基固相萃取柱凈化，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測定，外標(biāo)法定量。3試劑與材料除另有規(guī)定外，本方法中所用試劑均為分析純，水為符合GB/T6682規(guī)定的一級水。3.1試劑3.1.1乙腈（CH3CN）：色譜純。3.1.2二氯甲烷（CH2Cl2）：色譜純。3.1.3甲酸（HCOOH）：色譜純。3.1.4氯化鈉（

2、NaCl）。3.1.5氮氣（N2）：純度≥99.9%。3.2試劑配制3.2.1乙腈-二氯甲烷溶液（17%）：準(zhǔn)確量取乙腈（3.1.1）1mL，于100mL容量瓶中，用二氯甲烷（3.1.2）定容至刻度，搖勻后備用。3.2.2甲酸-乙腈溶液（1%）：準(zhǔn)確量取甲酸（3.1.3）1mL于100mL容量瓶中，用乙腈（3.1.1）定容至刻度，搖勻后備用。3.2.3甲酸水溶液（0.1%）：準(zhǔn)確量取甲酸（3.1.3）1mL于1000mL容量瓶中，用水定容至刻度，搖勻后備用。3.3標(biāo)準(zhǔn)品柑橘紅2號標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：分子式C28H16N2O3，CAS號：6358-53-8，純度≥90.0%。3.4標(biāo)準(zhǔn)溶液配制3.4

3、.1柑橘紅2號標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液（200μg/mL）：準(zhǔn)確稱取按其純度折算為100%質(zhì)量的柑橘紅2號標(biāo)準(zhǔn)品（3.3）0.01g（精確至0.00001g）于50mL容量瓶中，用乙腈（3.1.1）溶解并定容至刻度，搖勻，配制成濃度為200μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，溶液轉(zhuǎn)移至試劑瓶中，4℃冷藏保存，有效期6個月。3.4.2柑橘紅2號中間溶液：準(zhǔn)確移取一定量柑橘紅2號標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液（3.4.1），用乙腈（3.1.1）稀釋成一定濃度的中間溶液，溶液轉(zhuǎn)移至試劑瓶中，4℃冷藏保存，有效期3個月。4儀器與設(shè)備4.1液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配電噴霧離子源（ESI源）。4.2電子分析天平：感量分別為0.00001g和

4、0.01g。4.3超聲波清洗器。4.4渦旋混合器。4.5離心機：轉(zhuǎn)速≥8000r/min。4.6氮吹儀。4.7固相萃取裝置。4.8氨基固相萃取柱：500mg，3mL。74.9微孔濾膜：有機相，孔徑0.22μm。4.10均質(zhì)機。5分析步驟5.1試樣制備固體樣品切成小塊，經(jīng)均質(zhì)機粉碎、混勻，分裝于潔凈容器中。其中水果樣品只取果皮部分粉碎。半固體樣品直接經(jīng)均質(zhì)機均質(zhì)、混勻，分裝于潔凈容器中。液體樣品搖勻后備用。5.2試樣前處理5.2.1試樣提取稱取試樣2g（精確至0.01g）于50mL離心管中，準(zhǔn)確加入10mL乙腈（3.1.1），渦旋振蕩1min，加入2g氯化鈉，劇烈振搖1min，超聲10mi

5、n，以8000r/min離心3min。取上清液乙腈層至15mL離心管中，40℃氮吹濃縮至干，用3mL乙腈-二氯甲烷溶液（1%）（3.2.1）渦旋、超聲溶解殘渣，溶液待凈化。5.2.2試樣凈化用6mL乙腈-二氯甲烷溶液（1%）（3.2.1）活化固相萃取柱，待液面降至柱床表面時，將5.2.1的待凈化液轉(zhuǎn)移至固相萃取柱，同時收集流出液。用6mL乙腈-二氯甲烷溶液（1%）（3.2.1）分兩次洗滌15mL離心管，將洗滌液淋洗固相萃取柱同時收集流出液。合并流出液，在40℃條件下氮吹濃縮至干，準(zhǔn)確加入10mL甲酸-乙腈（1%）溶液（3.2.2）溶解殘渣，過微孔濾膜后，上機測定。5.3基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液制備7

6、稱取5個經(jīng)質(zhì)譜確認不含柑橘紅2號的陰性樣品于50mL離心管中，加入一定濃度的柑橘紅2號的中間溶液，得到柑橘紅2號含量為20ng、50ng、100ng、200ng、400ng的基質(zhì)樣品，其余按5.2步驟操作完成。其中陰性樣品按照5.2步驟操作完成后，上機測試，不含有柑橘紅2號。5.4儀器參考條件5.4.1液相色譜參考條件?a)色譜柱：C18柱（粒徑1.7μm,75mm×2.1mm），或性能相當(dāng)者；b)流動相：A為0.1%甲酸水溶液（3.2.3），B為乙腈（3.1.1），梯度洗脫條件見表1；c)進樣體積：2.0μL；d)流速：0.30mL/min；e)柱溫：40℃；表1流動相及梯度洗脫條件時

7、間/min流動相A/%流動相B/%0.090103.050505.05957.05957.190109.090105.4.2質(zhì)譜參考條件?a）離子源：電噴霧離子源（ESI源），正離子模式；b）監(jiān)測方式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）；c）毛細管電壓：3.0kV；d）脫溶劑氣溫度：500℃；e）離子源溫度：150℃；f）脫溶劑氣流速：850L/h；g）錐孔氣流速：150L/h；h）碰撞氣（Ar）流速：0.12mL/min；7柑橘紅2號的定性、定