卵巢上皮性腫瘤中AQP 1的表達(dá)及臨床意義.doc

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1、卵巢上皮性腫瘤中AQP-1的表達(dá)及臨床意義【摘要】目的研究卵巢癌中水通道蛋白1（AQP1）的表達(dá)及臨床意義。方法卵巢上皮性癌組38例；卵巢交界性上皮性腫瘤組12例；卵巢良性上皮性腫瘤組9例；正常卵巢組織7例為對(duì)照（正常組）。免疫組織化學(xué)（SP）進(jìn)行染色。將AQP1的表達(dá)與卵巢上皮性腫瘤的關(guān)系作出研究。結(jié)果1）在細(xì)胞的細(xì)胞漿內(nèi)及血管內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)陽性。卵巢上皮性癌中78.95%及卵巢交界性腫瘤中66.67%,顯著高于卵巢良性腫瘤33.33%和正常卵巢組織28.57%的表達(dá)率，差異有顯著性（P〈0.05）；2）卵巢癌有

2、腹水者其AQP1表達(dá)率水平明顯高于無腹水量者，差異有顯著性（P〈0.05）；與病理分型及分化程度無關(guān)；3）惡性腫瘤，交界性腫瘤，良性腫瘤及正常卵巢MVD有明顯差異；證明MVD值與AQP1表達(dá)上調(diào)有關(guān)。結(jié)論AQP1在卵巢癌的病理機(jī)制和卵巢癌腹水的發(fā)生到增多可能起到作用?！娟P(guān)鍵詞】卵巢上皮性腫瘤水通道蛋白1腹水卵巢惡性腫瘤是女性生殖器常見的三大惡性腫瘤之一，占女性生殖器惡性腫瘤的20%,卵巢上皮性癌占卵巢惡性腫瘤的90%。水通道蛋白1（aquaporin,AQP1）具有極強(qiáng)的水通透性［1］。2002?2006年間在哈醫(yī)

3、大第一附屬醫(yī)院，及齊醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，住院手術(shù)的66例卵巢上皮性腫瘤組織標(biāo)本，與AQP1蛋口的表達(dá)關(guān)系研究結(jié)果如下。1實(shí)驗(yàn)材料和方法1.1組織標(biāo)本制備收集2002-2006年間在哈醫(yī)大第一附屬醫(yī)院及齊醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科住院手術(shù)的66例患者的石蠟組織標(biāo)本。分為4組:卵巢上皮性癌組38例；卵巢交界性上皮性腫瘤組12例；卵巢良性上皮性腫瘤組9例；正常卵巢組織7例為對(duì)照（正常組）o卵巢上性癌手術(shù)病理分期:采用國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟2000年修訂的手術(shù)病理分期標(biāo)準(zhǔn)，其中I期7例，II期9例,III期13例，N期9例;其

4、中15例伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移;病理類型:漿液性22例，粘液性11例，內(nèi)膜樣5例，病理分級(jí):G17例，G217例，G314例；腹水量，無腹水7例，有腹水（〉100ml）31例?；颊吒顾繛殚_腹后立即吸取，且所有患者術(shù)前未進(jìn)行任何治療，無并發(fā)癥。患者年齡34?79歲，平均年齡56歲。上述標(biāo)本，連續(xù)切片-4μm厚，HE染色，病理證實(shí)。1.2方法免疫組化免疫組織化學(xué)（SP）法進(jìn)行染色。以PBS替代一抗作為陰性對(duì)照，以已知AQP1強(qiáng)烈表達(dá)的乳腺癌標(biāo)木做陽性對(duì)照。1.2.1具體方法1）載玻片準(zhǔn)備；2）切片脫蠟；3）抗原修復(fù)；4

5、)阻斷內(nèi)源性過氧化物酶的活性；5)滴加一抗，兔抗人AQP1多克隆抗體；6)加生物素標(biāo)記的第二抗體；7)滴加辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉卵白素溶液；8)DAB溶液顯色5?10分鐘；9)中性樹脂膠封片；10)蘇木精復(fù)染。1.2.2陽性結(jié)果判定在腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒者作為AQP1陽性細(xì)胞，無著色為陰性細(xì)胞。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析1.3.1AQP1結(jié)果的判定以陽性細(xì)胞百分率進(jìn)行評(píng)估。隨機(jī)取4個(gè)視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)腫瘤細(xì)胞，計(jì)數(shù)400個(gè)腫瘤細(xì)胞屮染色陽性細(xì)胞數(shù)，陽性細(xì)胞數(shù)＞10%為表達(dá)陽性；〈10%為表達(dá)陰性

6、。表達(dá)強(qiáng)度以陽性細(xì)胞的百分率來劃分：無陽性著色或陽性細(xì)胞〈10%細(xì)胞為陰性㈠，＜30%為弱陽性(+),30%?60%為中陽性(++),〉60%為強(qiáng)陽性(+++)o1.3.2腫瘤微血管密度(MVD)計(jì)數(shù)微血管密度的判定：染成棕色的單個(gè)血管內(nèi)皮細(xì)胞或細(xì)胞簇，大于8個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞形成的管腔不記數(shù)。尋找5個(gè)微血管高密度區(qū)，然后在200?400倍鏡下記數(shù)計(jì)算微血管密度，以5個(gè)區(qū)域的均值為該腫瘤的MVD值，微血管數(shù)取最高值。采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用fisher確切概率法，χ2檢驗(yàn)和t檢驗(yàn)對(duì)相應(yīng)資料進(jìn)

7、行分析，取a=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。2結(jié)果1.1AQP1在卵巢上皮性腫瘤中的表達(dá)AQP1在卵巢上皮癌中表達(dá)陽性率為78.95%,交界性上皮腫瘤中為66.67%,良性腫瘤為33.33%,正常卵巢為28.57%。卵巢上皮性癌及交界性腫瘤表達(dá)率,顯著高于良性腫瘤和正常組織，差異有顯著性(P〈0.05)；而良性腫瘤與正常組織之間，惡性與交界性之間差異無顯著性(P>0.05)o2.2AQP1在不同臨床病理特征卵巢癌中的表達(dá)有腹水者明顯高于無腹水量者，差異有顯著性(P<0.05)；與病理分型分化程度，有無淋巴轉(zhuǎn)移無關(guān)差異無顯著性

8、(P>0.05)o1.3AQP1與腫瘤微血管密度(MVD)的關(guān)系CD34標(biāo)記顯示：AQP1強(qiáng)陽性表達(dá)的組織MVD明顯大于弱陽性表達(dá)的組織(P<0.01)及陰性組織(P〈0.05),中陽性明顯低于強(qiáng)陽性(P〈0.01)；有腹水的明顯多于無腹水的(P<0.05)；'MMVD值與AQP1表達(dá)上調(diào)有關(guān)。3討論2.1水在人體的重要作用水是活細(xì)胞的主要組成部分。水占人體