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1、現(xiàn)代電泳技術(shù)的臨床應用Sebia1使用范圍和檢測原理電泳技術(shù)就是利用在電場的作用下,由于待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)以及分子本身大小,形狀等性質(zhì)的差異,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而對樣品進行分離,鑒定或提純的技術(shù).在生化檢測中,主要用于分離各類蛋白分子.2發(fā)展歷程1809年俄國科學家列伊斯首先發(fā)現(xiàn)電泳現(xiàn)象1937年瑞典科學家Tiselius建立了界面電泳技術(shù),并首次證明了血清是由白蛋白及α,β,γ球蛋白組成的因此獲得1948年諾貝爾化學獎.1950年后,區(qū)帶電泳從發(fā)展到成熟.1980年以來,毛細管電泳逐漸受到重視3常用的電泳技術(shù)濾紙電泳醋酸纖維素薄膜電泳凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳:瓊脂糖
2、凝膠適用于蛋白質(zhì)和核酸的電泳支持介質(zhì),成本低,結(jié)果易保存.聚丙烯酰胺凝膠電泳:最常用的定性分析蛋白質(zhì)的電泳方法,特別是用于蛋白質(zhì)純度檢測和測定蛋白質(zhì)分子量,一般用于科研.毛細管電泳:經(jīng)典電泳技術(shù)和現(xiàn)代微柱分離相結(jié)合的產(chǎn)物4電泳技術(shù)的醫(yī)學應用蛋白質(zhì)電泳分析是實驗室必備的檢測手段,可全面精確,描繪出患者蛋白質(zhì)的全貌.對疾病的早期診斷,療效觀察及預后判斷具有非常重要的臨床價值.5蛋白的電泳檢測根據(jù)使用的染料或者是底物的不同，我們可以檢測到不同類型的蛋白:血清蛋白脂蛋白(運送脂類)各種酶類血紅蛋白6電泳技術(shù)在臨檢中的應用急,慢性炎癥造血系統(tǒng)疾病:多發(fā)性骨髓瘤,巨免疫球蛋白血癥腎臟疾病肝臟疾病中樞神
3、經(jīng)系統(tǒng)疾病:多發(fā)性硬化癥遺傳性疾病:地中海貧血代謝性疾病:糖尿病心血管疾病:心梗,動脈粥樣硬化惡性腫瘤7正確解釋電泳結(jié)果 為臨床對疾病的判斷提供可靠參考89gba2白蛋白a1:a1酸性糖蛋白,a1抗胰蛋白酶:結(jié)合珠蛋白,a2巨球蛋白,a脂蛋白,銅藍蛋白:轉(zhuǎn)鐵蛋白,血液結(jié)合素,C3補體,b脂蛋白:免疫球蛋白血清蛋白電泳10蛋白染色血清蛋白電泳后會呈現(xiàn)出5或者6條帶.染色后,每個條帶呈現(xiàn)出的不同程度的染色對應著各自的蛋白濃度.如何檢測染色程度:需要使用光密度儀.11正常的電泳圖譜12出現(xiàn)單克隆免疫球蛋白的電泳圖譜13蛋白電泳檢測的不同步驟制備膠片,加樣,啟動電源,開始電泳,染色,脫色,結(jié)果檢
4、測14血清蛋白電泳的目的是什么?檢測異常:含量的變化:條帶中蛋白含量的增加或減少性質(zhì)的變化:異常條帶的出現(xiàn)15臨床意義將電泳作為常規(guī)檢測之一,基于蛋白含量的變化,有助于我們對以下疾病的篩查:炎癥營養(yǎng)不良肺氣腫16臨床意義對異常條帶的篩查,有助于我們檢測下列疾病:骨髓瘤巨球蛋白血癥(Waldenstrom)細菌和病毒感染在這些情況下,必須要做其他輔助測試,比如說免疫固定,使用不同類型的抗血清對異常蛋白進行檢測.(對于后期治療有很重要的指導意義)17電泳結(jié)果的臨床應用及常見電泳結(jié)果分析電泳檢測18什么情況下必須進行電泳檢測?A/G比例變化血液沉降速度發(fā)生異常變化出現(xiàn)惡性疾病征兆在免疫球蛋白定量
5、檢測中發(fā)現(xiàn)某一種免疫球蛋白出現(xiàn)大量異常增加19電泳區(qū)帶分析20雙白蛋白,或者一條寬峰,或者在白蛋白條帶出現(xiàn)附屬條帶可能是由以下原因造成:遺傳性雙白蛋暫時性的雙白蛋白血癥可能是由于藥物刺激導致的急性胰腺炎導致的雙白蛋白血癥:大量的胰酶的出現(xiàn)可以導致白蛋白降解白蛋白區(qū)帶21雙白蛋白血癥22雙白蛋白血癥2324在下列情況下白蛋白會出現(xiàn)下降:-腎病綜合癥,蛋白流失,胃腸病:檢查尿蛋白-淋巴細胞增生綜合征-營養(yǎng)不良-肝臟功能不全-慢性炎癥-嚴重燒傷-血液稀釋25在下列情況中白蛋白會出現(xiàn)增加:-脫水癥狀-血液濃縮-白蛋白注射26Alpha1globulins(α1球蛋白區(qū)帶)將會在下列情況下出現(xiàn)下降:
6、-蛋白流失-肝功能不全-先天性抗胰蛋白酶缺乏癥出現(xiàn)兩個條帶:-抗胰蛋白酶的不同基因型出現(xiàn)增加:-炎癥癥狀27A1AT不同的基因型28A1AT等電聚焦電泳29急性炎癥電泳圖譜30Alpha2globulins(α2球蛋白區(qū)帶)下列情況中出現(xiàn)下降:-肝功能不全-血管內(nèi)溶血31出現(xiàn)兩個條帶:-溶血標本(結(jié)合珠蛋白-血紅蛋白復合體)-結(jié)合珠蛋白不同基因型-出現(xiàn)單克隆免疫球蛋白(帶有大量負電荷)*Alpha2條帶在電泳圖譜中,是一個很特殊的條帶.因為這一條帶中含有五種蛋白:HDL,Haptoglobin,Alpha2Macroglobulin,CeruloplasminandGcglobulin.由
7、于結(jié)合珠蛋白有不同的基因表現(xiàn)型,增加了這一條帶的復雜程度.結(jié)合珠蛋白非?？拷麬lpha1條帶;出現(xiàn)溶血時結(jié)合珠蛋白的遷移率會發(fā)生改變.同時,由于HDL的含量或者是存放過久的標本,HDL的遷移速度可能會更快.32溶血的標本33出現(xiàn)在a2區(qū)域的單克隆免疫球蛋白34下列情況下Alpha2區(qū)域會出現(xiàn)增加現(xiàn)象:-炎癥癥狀-腎病綜合征-出現(xiàn)游離輕鏈35腎病綜合征363738Betaglobulins(β球蛋白區(qū)帶)在下列情況下會出現(xiàn)
