電泳技術(shù)及臨床應(yīng)用.ppt

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1、蛋白電泳技術(shù)的臨床應(yīng)用蛋白電泳技術(shù)和多發(fā)性骨髓瘤簡介**市中心醫(yī)院檢驗科生化室使用范圍電泳技術(shù)就是利用在電場作用下，由于待分離樣本中各種分子帶電性質(zhì)以及分子的大小，形狀等性質(zhì)的差異，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而對樣本進行分離、鑒定和提純的技術(shù)。在生化檢測中常用于分離各種蛋白質(zhì)！**市中心醫(yī)院檢驗科生化室發(fā)展歷史和常用類型濾紙電泳醋酸纖維膜電泳凝膠電泳1、瓊脂糖凝膠電泳2、聚丙烯酰胺凝膠電泳毛細血管電泳**市中心醫(yī)院檢驗科生化室1809年俄國科學家列伊斯發(fā)現(xiàn)電泳現(xiàn)象1937年瑞典Tiselius建立界面電泳技術(shù)，首次證明血清是由白帶白和球蛋白組成，1948年

2、獲得諾貝爾化學獎1950年后，區(qū)帶電泳發(fā)展到成熟1980年以來，毛細管電泳逐漸被重視電泳技術(shù)在臨床中應(yīng)用急、慢性疾病造血系統(tǒng)疾病：多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥肝臟疾病腎臟疾病中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾?。憾喟l(fā)性硬化癥遺傳性疾?。旱刂泻Ｘ氀x性疾病：糖尿病心血管疾?。盒墓！用}硬化惡性腫瘤。。。。。。。**市中心醫(yī)院檢驗科生化室1.什么情況下必須進行電泳檢測？總蛋白異常升高或異常下降A(chǔ)/G比例變化血液沉降速度發(fā)生異常變化出現(xiàn)惡性疾病征兆在免疫球蛋白定量檢測中發(fā)現(xiàn)某一種免疫球蛋白出現(xiàn)大量異常增加**市中心醫(yī)院檢驗科生化室操作步驟-儀器和電泳膠片準備**市中心醫(yī)院檢驗科生化室操作

3、步驟-掛緩沖條和電泳膠片**市中心醫(yī)院檢驗科生化室操作步驟-點樣**市中心醫(yī)院檢驗科生化室操作步驟-選擇電泳類型**市中心醫(yī)院檢驗科生化室操作步驟-烘干染色**市中心醫(yī)院檢驗科生化室操作步驟-掃描**市中心醫(yī)院檢驗科生化室電泳結(jié)果**市中心醫(yī)院檢驗科生化室2.血清蛋白電泳看的是什么？含量的變化:條帶中蛋白含量增或減基于蛋白含量的變化,有助于我們對以下疾病的篩查:炎癥、營養(yǎng)不良、肺氣腫等性質(zhì)的變化:異常條帶的出現(xiàn)對異常條帶的篩查,有助于我們檢測下列疾病:骨髓瘤、巨球蛋白血癥、細菌和病毒感染等*在這些情況下,必須要做其他輔助測試,比如說免疫固定,使用不同類型的抗血清

4、對異常蛋白進行檢測.(對于后期治療有很重要的指導意義)**市中心醫(yī)院檢驗科生化室血清蛋白電泳簡介血清蛋白電泳可以對血清或其他體液中的異常蛋白質(zhì)進行篩選。血清蛋白質(zhì)在堿性條件下主要根據(jù)其所帶電荷數(shù)將其分離成五種片段：白蛋白,α1球蛋白、α2球蛋白、β球蛋白、γ球蛋白、每一區(qū)帶含有一種或多種血清蛋白質(zhì)。**市中心醫(yī)院檢驗科生化室血清蛋白電泳簡介**市中心醫(yī)院檢驗科生化室血清蛋白成分簡介—白蛋白白蛋白（Alb）由肝實質(zhì)細胞合成，分子量6.64萬，等電點4～5.8，半壽期（15～19天，占血漿總蛋白的40%～60。血漿白蛋白濃度可以受飲食中蛋白質(zhì)攝入的影響，在一定程度上

5、可以作為個體營養(yǎng)狀態(tài)的評價指標，有較廣泛的載體功能。正常參考值：35～50g/L。血漿白蛋白增高較少見，在嚴重失水時，對監(jiān)測血濃縮有診斷意義。低白蛋白血癥，可見于：合成減低：急、慢性肝病。營養(yǎng)不良或吸收不良。遺傳性缺陷：無白蛋白血癥。組織損傷（手術(shù)或創(chuàng)傷）或炎癥（感染性疾?。┮鸬陌椎鞍追纸庠黾?。異常丟失：如腎病綜合征、慢性腎小球腎炎、糖尿病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、潰瘍性結(jié)腸炎、腫瘤、燒傷所致滲出性皮炎。分布異常：如門脈高壓時，大量蛋白質(zhì)從血管內(nèi)滲入腹腔。**市中心醫(yī)院檢驗科生化室血清蛋白成分簡介—α1區(qū)α1-抗胰蛋白酶（AAT）是具有蛋白酶抑制作用的一種急性時相反應(yīng)

6、蛋白，分子量為5.5萬，等電點4.8，半壽期4天，電泳中位與α1區(qū)帶，是這一區(qū)帶的主要組分。低血漿AAT可以發(fā)現(xiàn)于胎兒呼吸窘迫綜合癥，AAT先天缺陷易導致肺氣腫和肝硬化。α1-酸性糖蛋白（AAG）早期稱之為乳清類粘蛋白，分子量4萬，等電點2.7～3.5，半壽期5天，電泳位于α1區(qū)帶。AAG是主要的急性時相反應(yīng)蛋白，在急性炎癥時增高，在風濕病、惡性腫瘤及心肌梗死患者亦常增高，在營養(yǎng)不良、嚴重肝損害等情況下降低。α1-脂蛋白分子量20萬。在嚴重肝病如肝硬化時明顯降低，妊娠及高雌激素血癥時可輕度增加。甲胎蛋白（AFP）主要在胎兒肝臟中合成，分子量6.9萬，電泳位于α1

7、區(qū)帶。在成人AFP可以在大約80%的肝癌患者血清中升高，在生殖細胞腫瘤出現(xiàn)AFP陽性率為50%，在其他腸胃管腫瘤如胰腺癌或肺癌及肝硬化等患者亦可出現(xiàn)不同程度的升高。**市中心醫(yī)院檢驗科生化室血清蛋白成分簡介—α1區(qū)此區(qū)顯色的條帶主要是：α1-抗胰蛋白酶在一些肺病是情況下，α1-抗胰蛋白酶下降，有的時候缺如在某些嚴重創(chuàng)傷后，此區(qū)可出現(xiàn)明顯高峰，同時α1-抗胰蛋白酶也增高注意：1.α1-抗胰蛋白酶偶爾出現(xiàn)雙峰，它預示著既有單克隆抗體成分又有α1-抗胰蛋白酶的改變。2.一些罕見的病例中，此區(qū)帶會出現(xiàn)另一個較寬的峰，它其實可能有甲胎蛋白的出現(xiàn)**市中心醫(yī)院檢驗科生化室血

8、清蛋白成分簡介—α2區(qū)結(jié)