血清漿脂類及脂蛋白測定ppt課件.ppt

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1、血清（漿）脂類及脂蛋白測定——1血脂的組成：甘油三酯(少量甘油二酯和甘油一酯)磷脂膽固醇和膽固醇酯非酯化脂肪酸（游離脂肪酸）等2血脂的運輸形式—脂蛋白1、定義：指血漿脂質(zhì)與載脂蛋白組成的可溶性的生物大分子。3磷脂膽固醇載脂蛋白甘油三酯膽固醇酯2、結(jié)構(gòu)：脂蛋白微粒表面核心453、分類(1)按密度不同HDLLDLIDLVLDLCM6(2)按電泳時區(qū)帶的泳動位置不同CMHDLVLDLLDLCMβ-LP前β-LPα-LP＋α-LP前β-LPβ-LPCM7臨床血脂測定的常見項目：8實驗51：磷鎢酸-鎂沉淀法測

2、定高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）9提取HDL測定膽固醇實驗原理：10超速離心法層析法電泳法☆沉淀法提取HDL的方法：11沉淀法原理：ApoB+多陰離子化合物沉淀↓12硫酸葡聚糖--Mg2+肝素--Mn2+磷鎢酸--Mg2+多陰離子（polyanion）化合物13過氧化物酶膽固醇+O2膽甾烯酮+H2O2H2O2+酚+4-氨基安替比林亞胺醌+H2O膽固醇測定（酶法）：14試劑：沉淀劑酶試劑參考血清（TC測定用的定值血清）15操作步驟：取血清和沉淀劑各200μl，充分混勻，置室溫放置10min后，250

3、0r/min，15min，吸取上清液按表進行操作。1、提取HDL16加入物(μl)空白管標準管測定管上清液——50參考血清—50—蒸餾水50——酶試劑200020002000混勻，37℃水浴15min；空白管調(diào)零，0.5cm比色杯，500nm比色。2、測定膽固醇17計算：參考值：HDL-C(mmol/L)測定管吸光度標準管吸光度×=定值血清膽固醇濃度5.170.9~2.0mmol/L218注意事項：1、血清標本要及時測定——（在室溫條件下，各型脂蛋白之間會發(fā)生脂質(zhì)交換）；——（游離的膽固醇會不斷酯化

4、）。2、離心過程中防止溫度過高（室溫15~25℃），離心后放置時間不能過長?！囟冗^高使沉淀不完全）。19臨床意義：具有抗動脈粥樣硬化作用，是冠心病的保護因素。2021磷酸甘油氧化法測定血清甘油三酯（TG）實驗49：22甘油三酯(TG)的結(jié)構(gòu)：23甘油三酯測定的方法：化學法酶法24化學法（KOH）（過碘酸）皂化氧化抽提甘油甲醛顯色25甘油三酯甘油甲醛變色酸紫紅色26甘油三酯3-磷酸甘油+ADP+ATPO2、H2O+磷酸二羥丙酮+H2O2甘油+脂肪酸+酚、4-氨基安替比亞胺醌+H2OLPLGKGP

5、OPOD☆酶法（磷酸甘油氧化酶法）27試劑：酶試劑2.26mmol/L的三油酸甘油酯標準液28操作：加入物(μl)空白管標準管(×2)測定管(×2)上清液——20參考血清—20—酶試劑20002000200037℃水浴10min；空白管調(diào)零，0.5cm比色杯，500nm比色。29計算：TG(mmol/L)測定管吸光度標準管吸光度×=標準液濃度參考值：0.56~1.70mmol/L2.26mmol/L30臨床意義：增高:與動脈粥樣硬化關(guān)系密切、家族性的脂代謝紊亂、糖尿病等。降低:營養(yǎng)不良、消化吸收綜合

6、征、消耗性疾病等。31注意事項：標本：標本要求是餐后12-14h的空腹血液——（血清TG易受飲食影響）。標本存放不宜超過3天——（避免TG水解而釋放出甘油）。試劑：酶試劑應(yīng)4℃避光保存，出現(xiàn)紅色不可再用。32免疫透射比濁法測定血清載脂蛋白A1和載脂蛋白B實驗53：33抗原抗原抗體復(fù)合物抗體+ApoA1ApoBApoA1抗體ApoB抗體比色原理：34ApoA1與高脂血癥、冠心病呈負相關(guān)；ApoB與高脂血癥、冠心病呈正相關(guān)。臨床意義：35