總皂苷的測(cè)定方法.docx

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1、A1總皂苷的測(cè)定方法方法來(lái)源：《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》（2003版）保健食品中總皂苷的測(cè)定方法（分光光度法）A1.1試劑Amberlite-XAD-2大孔樹(shù)脂，Sigma化學(xué)公司U.S.A正丁醇分析純乙醇分析純中性氧化鋁層析用，100-200目人參皂苷Re購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所香草醛溶液稱取5g香草醛，加冰乙酸溶解并定容至100ml。高氯酸分析純冰乙酸分析純?nèi)藚⒃碥誖e標(biāo)準(zhǔn)溶液：精確稱取人參皂苷Re標(biāo)準(zhǔn)品0.020g，用甲醇溶解并定容至10.0ml，即每毫升含人參皂苷Re2.0mg。A1.2儀器比色計(jì)、層析柱A1.3試驗(yàn)步驟A1.3

2、.1試樣處理A1.3.1.1固體試樣：稱取1.000g左右的試樣（根據(jù)試樣含人參量定），置于100ml容量瓶中，加少量水，超聲30min，再用水定容至100ml，搖勻，放置，吸取上清液1.0ml進(jìn)行柱層析。A1.3.1.2柱層析：用10mL注射器作層析管，內(nèi)裝3cmAmberlite-XAD-2大孔樹(shù)脂，上加1cm中性氧化鋁。先用25ml70%乙醇洗柱，棄去洗脫液，再用25ml水洗柱，棄去洗脫液，精確加入1.0ml已處理好的試樣溶液（見(jiàn)3.1），用25ml水洗柱，棄去洗脫液，用25m170%乙醇洗脫人參皂苷，收集洗脫液于蒸發(fā)皿中，置于60℃水

3、浴揮干。以此作顯色用。A1.3.1.3顯色：在上述已揮干的蒸發(fā)皿中準(zhǔn)確加入0.2ml5%香草醛冰乙酸溶液，轉(zhuǎn)動(dòng)蒸發(fā)皿，使殘?jiān)既芙?，再?.8ml高氯酸，混勻后移入5ml比色管中，塞緊蓋子于60℃水浴上加熱10min，取出，冰浴冷卻后，準(zhǔn)確加入冰乙酸5.0ml，搖勻后，以1cm比色池于560nm波長(zhǎng)處與標(biāo)準(zhǔn)管一起進(jìn)行比色測(cè)定。A1.3.1.4標(biāo)準(zhǔn)管：吸取人參皂苷Re標(biāo)準(zhǔn)溶液（2.0mg/ml）100μl放蒸發(fā)皿中，放在水浴揮干（低于60℃），或熱風(fēng)吹干（勿使過(guò)熱），以下操作從“3.2柱層析……”起，與試樣相同。測(cè)定吸光度值。A1.4計(jì)算：X=

4、式中：X：試樣中總皂苷量（以人參皂苷Re計(jì)），g/100gA1：被測(cè)液的吸光度值　　A2：標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度值　　　C：標(biāo)準(zhǔn)管人參皂苷Re的濃度，μgV：試樣稀釋體積，mlm：試樣質(zhì)量，g計(jì)算結(jié)果保留二位有效數(shù)字。