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1、發(fā)酵車間培訓資料生產(chǎn)二部2017.06.12第一部分意識的培養(yǎng)我們的發(fā)酵屬于純培養(yǎng),是由單一菌種接種以后進行的培養(yǎng),其中不可以有任何雜菌,否則會影響發(fā)酵的成敗及產(chǎn)品的使用效果,所以為了確保每一批發(fā)酵的成功,在生產(chǎn)過程中菌種、發(fā)酵人員必須具備以下兩種意識:無菌意識由于微生物個體小、分布廣泛等特性,發(fā)酵染菌的途徑有很多,而且如果染菌的話,我們無法及時做出判斷,必須培養(yǎng)一段時間才能看出來,發(fā)現(xiàn)以后的結(jié)果只能是重消、提前放罐或倒罐,造成不小的損失,所以生產(chǎn)過程中每一個環(huán)節(jié)都必須具備無菌意識,每一步操作都按照操作規(guī)程進行,抓住每一個細節(jié),才能確保不會染菌。無菌意識是每一個菌種、發(fā)酵、生測人員具
2、有的意識。2、安全意識空氣壓力能達到0.25~0.3MPa;正常供氣壓力0.15-0.2MPa,(儀表用空氣注意減壓);空氣溫度:50+5℃蒸汽壓力0.4-0.6MPa以上,防止壓力過高擊穿墊片、閥門等設(shè)備用電;(本崗位熟練人員操作、防水...維修必須專業(yè)電工進行)機械攪拌;(設(shè)備檢修必須切斷電源且有明顯的標識牌、高速離心設(shè)備注意平衡及緊鎖裝置)酸堿、易燃易爆、粉塵:防護措施及應(yīng)急措施。⑤進罐檢查:切點電源、明顯標識牌、有人值守⑥人員著裝⑦發(fā)酵罐:空消、實消等加熱狀態(tài)打開夾套排污閥,防止夾套或內(nèi)壁損毀;移種、放罐升高壓力后,不能同時關(guān)閉進氣、排氣閥門,防止罐內(nèi)產(chǎn)生負壓。第二部分、發(fā)酵
3、罐罐體管道結(jié)構(gòu)介紹空氣路:培養(yǎng)過程中向罐內(nèi)通無菌空氣蒸汽管路物料管路:配料管路、補料管路取樣路:培養(yǎng)過程中取樣監(jiān)控菌體生長情況尾氣路:排氣(大排氣、小排氣)出料路:移種、放罐夾套進水路:冷凍水、循環(huán)水、熱水(蒸汽)夾套回水路:冷凍水、循環(huán)水、熱水(蒸汽)排污管路各種圖形、顏色代表的意義截止閥、球閥、隔膜閥電磁閥止回閥空氣管道排污管道水管道物料管道蒸汽管道第三部分、發(fā)酵基本操作過程罐檢空消電極標定配料實消接種中控培養(yǎng)放罐洗罐檢修第一:罐檢目的:快速檢查發(fā)酵罐,確保發(fā)酵罐正常,可以上罐。檢查項目:閥門:所有閥門是否能正常使用、是否處于正確的位置。壓力表:壓力表是否歸零。PH和溶氧電極:電
4、極是否拔出并正確保養(yǎng)。罐體:罐內(nèi)是否清洗干凈。攪拌電機:點動電機,看電機運轉(zhuǎn)是否正常。攪拌葉輪、消泡裝置是否緊固,有無松動等。第二:空消空消主要目的是在進罐生產(chǎn)前對設(shè)備清潔和殺滅其他微生物,防止因設(shè)備清潔不徹底或設(shè)備停用時間過久,微生物滋生,從而對生產(chǎn)造成影響。1、放罐后及時清洗空消。2、長期不用罐或更換品種、染菌罐需空消。3、空消之后無菌空氣保壓待用??障僮髁鞒躺郎貜目諝饴?、取樣路和出料路進蒸汽排凈罐內(nèi)的冷空氣后關(guān)小排氣閥,節(jié)省蒸汽滅菌調(diào)節(jié)空氣一閥、取樣一閥、出料一閥和排氣閥控制壓力壓力0.14~0.16MPa,溫度126~128℃,時間30分鐘降溫排空罐內(nèi)冷凝水自然冷卻第三、電
5、極標定目的:為了確保電極準確測量,必須在使用前對電極進行標定。注意事項:新電極或放置很久的電極必須激活以后才可以進行標定和使用。PH電極用3moL/L的KCl溶液浸泡6小時激活,溶氧電極通電6小時激活。PH電極標定的時候需要將接地電極放入盛放標準液的燒杯內(nèi)。接種以后設(shè)定好發(fā)酵參數(shù),然后進行溶氧電極百分百標定。PH電極利用6.86的標準液進行電極零點標定,電壓值在3000左右;利用4.0的標準液進行電極斜率標定,斜率在260左右;溶氧電極利用飽和NaSO3溶液進行電極零點標定,電壓值在1300左右;百分百標定。電極標定參數(shù):第四:配料增容:實消過程中部分蒸汽會冷凝形成冷凝水進入培養(yǎng)基中
6、,從而導(dǎo)致培養(yǎng)基體積變大,變大的部分即為增容。不同的地區(qū),不同的氣候,不同的產(chǎn)品品種及原料增容量都會不同的,需要通過多次實消滅菌總結(jié)才能得到一個經(jīng)驗值。10-30%領(lǐng)料:正確填寫領(lǐng)料單,從倉庫領(lǐng)料,并從領(lǐng)料單簽字確認。溶料:按工藝要求順序溶解各種原料;原料全部溶解,無雜質(zhì)、無硬塊。投料:確認電極已經(jīng)安裝上,出料一閥已經(jīng)關(guān)閉??紤]增容和種子體積,定容到發(fā)酵消前體積。第五:實消發(fā)酵罐實消是對發(fā)酵培養(yǎng)基進行徹底的滅菌處理,利用高溫過飽和蒸汽的強穿透能力使各種細菌、真菌蛋白質(zhì)凝固而死亡。實消結(jié)束以后罐內(nèi)是無菌的環(huán)境,需通入無菌空氣進行保壓直到培養(yǎng)結(jié)束。實消操作流程預(yù)熱:打開夾套排污,用蒸汽
7、進行預(yù)熱當溫度達到90度以上停止預(yù)熱,關(guān)閉攪拌。升溫:三路進汽;當壓力升到0.05MPa時打開所有和罐體連接的排汽閥門,消毒過程不得有消毒死角。保壓:調(diào)節(jié)三路進氣及排汽,常規(guī)滅菌保壓過程:溫度121壓力0.1230分鐘滅菌結(jié)束:保壓結(jié)束先關(guān)閉各小排氣及取樣、放料管路進汽,待罐壓低于精過濾器壓力后,快速關(guān)閉空氣管路蒸汽閥門,打開空氣閥門,調(diào)整進氣、排氣閥門,保持罐壓0.05-0.1MPa;降溫:開啟冷卻水降溫至工藝要求溫度,降溫過程注意罐壓,防止罐