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《過(guò)表達(dá)maspin對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞凋亡的影響.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、第29卷第5期天津科技大學(xué)學(xué)報(bào)V_01．29NO．52014年10月JournalofTianjinUniversityofScience&Technology0ct．2014DOI：10．13364~．issn．1672—6510．2014．05．005過(guò)表達(dá)maspin對(duì)人乳腺癌MCF一7細(xì)胞凋亡的影響李艷琦，張同存，孫雪光，廖興華，王楠，羅學(xué)剛(天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院，天津300457)摘要：通過(guò)構(gòu)建maspin表達(dá)質(zhì)粒，在人乳腺癌MCF．7細(xì)胞中過(guò)表達(dá)maspin，研究maspin對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖率及凋亡率的影響．MTT檢測(cè)
2、實(shí)驗(yàn)表明，過(guò)表達(dá)maspin能夠劑量依賴性抑制MCF．7細(xì)胞的增殖率．采用TUNEL法和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)maspin對(duì)MCF．7細(xì)胞凋亡的影響，結(jié)果表明過(guò)表達(dá)maspin可促進(jìn)MCF-7細(xì)胞凋亡進(jìn)而抑制其增殖．關(guān)鍵詞：乳腺癌；MCF．7細(xì)胞；maspin；凋亡中圖分類號(hào)：R737．9文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1672-6510(2014)05-0020-04EffectofoVerexpressingMaspinontheApoptosisofHumanBreastCancerCellMCF．7LIYanqi，ZHANGTongcun，SUN
3、Xueguang，LIAOXinghua，WANGNan，LUOXuegang(CollegeofBiotechnology。TianjinUniversityofScience&Technology，Tianjin300457，China)Abstract：Byconstructingmaspinexpressionplasmid，theefectsofoverexpressedmaspinontheproliferationandapoptosisofhumanbreastcancercellMCF．7werestudied．Thep
4、roliferationofMCF．7cellswasobservedwiu1MTTheresultsshowthattheoverexpressionofmaspininhibitedMCF-7cell’Sproliferationinadosedependentmanner．The印Op—tosisofMCF．7cellsWaSobservedwithTUNELandflowcytometry,TheresultsindicatethatthemaspinoverexprssioncouldpromotetheapoptosisofM
5、CF一7cellandtherebyinhibitcellularproliferation．Keywords：breastcancer；MCF一7cells；maspin；apoptosis乳腺癌是具有高發(fā)率和死亡率的惡性腫瘤之一[11．津康源生物技術(shù)有限公司；空載質(zhì)粒pcDNA3．1，本乳腺癌的發(fā)生和發(fā)展是多基因突變的結(jié)果，這包括原實(shí)驗(yàn)室保藏；FastPfuDNA聚合酶、質(zhì)粒抽提試劑癌基因的激活和抑癌基因的失活L2J．maspin是一種盒，北京全式金生物技術(shù)有限公司；gpnI限制性內(nèi)新型的非經(jīng)典絲氨酸蛋白酶抑制劑，作為一個(gè)腫瘤抑切酶、
6、XhoI限制性內(nèi)切酶、T4DNA連接酶、制基因，它能在體內(nèi)抑制腫瘤的生長(zhǎng)和遷移[3-4]．DeadEnda~熒光測(cè)定TUNEL系統(tǒng)，Promega生物技maspin已經(jīng)被證明能夠抑制細(xì)胞運(yùn)動(dòng)性、侵襲和遷術(shù)有限公司；M—MLV逆轉(zhuǎn)錄酶、Turbo轉(zhuǎn)染試劑、移p．然而，maspin對(duì)細(xì)胞增殖和凋亡的影響還沒(méi)Trizol裂解液，上海英駿生物技術(shù)有限公司；膠回收有被研究清楚．本文構(gòu)建了maspin的表達(dá)質(zhì)粒，探索試劑盒、DM2000PlusDNAMarker，北京康為世紀(jì)生過(guò)表達(dá)maspin對(duì)MCF一7細(xì)胞增殖和凋亡的影響，這物科技有限公司；ma
7、spin一抗，Abcam公司；MTT，將為maspin在乳腺癌治療方面的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)．北京索萊寶科技有限公司；AnnexinV細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒，天津三箭生物技術(shù)有限公司．1材料與方法1．2細(xì)胞株和細(xì)胞培養(yǎng)1．1主要試劑人乳腺癌細(xì)胞株MCF一7細(xì)胞為本實(shí)驗(yàn)室保DMEM低糖培養(yǎng)基，Gibico公司；胎牛血清，天藏．在含體積分?jǐn)?shù)10％滅活胎牛血清的DMEM低糖收稿日期：2013—12~35；修回日期：2014-03—12基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31071126，31000343)作者簡(jiǎn)介：李艷琦(1989一)，男，天津人，碩士
8、研究生；通信作者：張同存，教授，tony@rust．edu．cn．2014年l0月李艷琦，等：過(guò)表達(dá)maspin對(duì)人乳腺癌MCF一7細(xì)胞凋亡的影響·21·培養(yǎng)液中，于37℃、CO2體積分?jǐn)?shù)5％
